1、Shodex使用說明書SUGAR系列SH1011，SH1821，SC1011，SC1821，SP0810，SC1211，SZ5532感謝您購買Shodex系列色譜柱！在使用之前，請仔細閱讀說明書，以保證色譜柱的最佳使用狀態和使用壽命。1介紹色譜柱的填料為剛性的苯乙烯/DVB基質的強離子交換樹脂，專用于糖類的分離。ShodexSUGAR系列色譜柱在糖類的分離和分析上表現出優秀的性能，是應用于食品、生物化學品、天然產物中糖分析的首選。ShodexSUGAR系列色譜柱的基本分離原理是體積排阻色譜，除此之外，還有分配色譜的原理和離子相互作用，比如配位交換，樣品與抗衡離子互相作用，使得在精細結構上不同的

2、各種單糖得以分離。另外，SH系列的色譜柱由于具有顯著的離子排斥作用，可同時分離有機酸和糖。2型號和特點ShodexSUGAR系列色譜柱有7種型號，每種型號在抗衡離子、孔徑尺寸、孔結構以及糖的選擇性上有所不同。表一型號和特點型號1)抗衡離子分離模式規格mm)排阻限理論塔板數儲存溶劑2)SH1011H+SEC+IE3)8*3001,000215,000H2OSH1821H+SEC+IE8*30010,000215,000H2OSC1011Ca2+SEC+LE48*3001,000212,000H2OSC1821Ca2+)SEC+LE8*30010,000210,000H2OSP0810Pb2+SE

3、C+LE8*3001,000210,000H2OSC1211Ca2+P5)+LE6*25025,00025%CH3CN/H2OSZ5532Zn2+P+LE6*15025,00070%CH3CN/H2O5）分配機理以下六種保護柱可用于表一中的色譜柱。表二保護柱型號抗衡離子規格（mm）儲存溶劑1）應用色譜柱SH-GH+6*50H2OSH系列SC-LGH+6*50H2OSC和SP系列SP-GCa2+6*50H2OSP系列SC-GCa2+4.6*1025%CH3CN/H2OSC1211SZ-GPb2+4.6*1070%CH3CN/H2OSZ5532KS-G2)Ca2+6*50H2OSC和SP系列3使用

4、條件和范圍1）標準使用條件表三標準使用條件型號流動相流速（ml/min）柱溫（C）SH10110.01NH2SO40.51.05060SH18210.01NH2SO40.51.05060SC1011H2O0.51.07080SC1821H2O0.51.07080SP0810H2O0.51.07080SC121125%CH3CN/H2O0.51.05060SZ55322）可用范圍70%CH3CN/H2O0.51.05060表四可用范圍型號流動相流速（ml/min）柱溫（C）柱壓（MPa）SH1011H2O0.05N最大1.5H2SO4最高95最大5.0SH1821H2O0.05N最大1.5H2S

5、O4最高95最大5.0SC1011H2O20%CH3CN/H2O最大1.5最高95最大4.0SC1821H2O20%CH3CN/H2O最大1.5最高95最大4.0SP0810H2O20%CH3CN/H2O最大1.0最高95最大3.0SC1211H2O45%CH3CN/H2O最大1.0最高95最大4.0SZ5532H2O95%C最大2.0最高80最大4.0H3CN/H2O4流動相用作流動相的純水必須為去離子水，經至少0.45微孔濾膜過濾。在使用之前，流動相必須充分脫氣，防止氣泡產生，影響色譜柱的使用。ShodexSUGAR系列色譜柱在使用時都必須加熱，所以脫氣尤為重要。建議使用ShodexDEG

6、AS系列脫氣設備。SH系列盡管可以使用去離子水可作為流動相，但堿金屬仍有可能在填料上吸附，會改變柱子的色譜行為，建議在流動相中加入少許的硫酸或磷酸以防止金屬離子的吸附。SC系列和SP0810基本上使用去離子水作為流動相。極性的有機溶劑也可添加在流動相中，可提高色譜柱對糖醇的分離能力，并減少疏水物質的吸附。添加有機溶劑的比例最大不可超過20%。SC系列在流動相中加入鹽可提高離子化合物的分離能力?？杉尤氲柠}為Ca(NO3)2和CaSO4,pH值范圍在37之間。另外，如果樣品中含有大量的重金屬，在流動相中加入1050ppm的Ca-EDTA,以防止損害色譜柱性能。SC1211和SZ5532所用的流動相

7、基本上為水和有機溶劑的混合溶液，一般有機溶劑用乙腈。分離機理是基于分配色譜。請參照表四的使用范圍選擇流動相。5流速正常情況下，建議使用表三中的流速，表四中注明了可使用的流速范圍。一般來說，糖類在液體中的擴散速度遠小于其他物質。流速越慢，分離度越高。在低聚物的分離中，更低的流速能獲得更令人滿意的分離效果。6柱加熱如上所述，糖類在溶劑中的擴散速度很慢，因此，通過加熱色譜柱在流動相允許的高溫條件下分離能獲得更好的分離度。一般情況下，建議使用表三所示的溫度。如果SC系列和SP0810在使用時沒有加熱到50C，糖的端基差向異構體會被分離，特別注意一定要在合適的溫度下使用色譜柱。SH系列色譜柱不適用于高溫

8、下分離蔗糖和蜜三糖（棉子糖），因為色譜柱的填料性質類似于這兩種糖的分解催化劑。如果不可避免的要在SH系列色譜柱上分離這兩種糖，就必須在40C左右的條件下使用，以防止糖的分解。當在SP0810和SC系列色譜柱之前使用保護柱時，保護柱也必須加熱，否則，可能導致糖的端基差向異構體被分離或產生峰展寬。如果不加熱保護柱，建議選擇SUGARKS-G系列。色譜柱聯用如果不能獲得滿意的分離效果，可使用相同型號或不同型號的幾根色譜柱聯用來提高分離度。目前僅限于SP0810與SC系列和SUGARKS系列聯用，而且必須按以下順序連接。SUGARKS+SC+SP0810如果需要使用保護柱，必須使用與第一根柱子匹配的。

9、參考保護柱與色譜柱的匹配表或其他關于色譜柱聯用的技術文件。樣品的處理通常用流動相來溶解樣品。將溶液用至少045um的微孔濾膜過濾后再注入色譜柱分析。推薦使用Shodex次性濾膜。任何含有蛋白質的樣品必須在過濾前將蛋白質除去。含有重金屬離子、表面活性劑（乳化劑）或油性物質的樣品，可能會在色譜柱上產生吸附，在樣品過濾之前可通過H-型陽離子交換樹脂將其除去。可通過OH-型陰離子交換樹脂除去樣品中的有機酸。SH系列色譜柱是可以分離有機酸的，不需要這步樣品處理，但堿性樣品必須調為中性才能進樣，否則，色譜柱的性能會有損傷。色譜柱的保存完成分析過程后，將流速降低至0.30.5ml/min,關閉柱溫箱，保持泵

10、沖洗色譜柱直到溫度降至室溫。當溫度降至室溫后，停泵，拆下色譜柱并用柱旋塞將色譜柱密封好。將封好的色譜柱放置于沒有陽光直射，溫度波動小的地方保存。色譜柱性能的恢復由于Shodex這個系列的色譜柱填料時不同的抗衡離子交換樹脂，而樣品中所含的離子會與其發生吸附作用和離子交換作用，導致抗衡離子的變化，損害色譜柱性能。因此，有必要對色譜柱進行清洗，恢復其性能。下表中列出了各個型號色譜柱的清洗溶劑和清洗方法，以恢復色譜柱性能。表五色譜柱性能的恢復型號溶劑柱溫（C）操作過程SH系列0.005NH2SO450以0.5ml/min流速沖洗50mlSC1011SC18210.1MCa(NO3)250以0.5ml/

11、min流速沖洗50mlSP08101)0.2MPb(NO3)27095注入50u1,重復34次SC12112)0.1MCa(NO3)250以0.5m1/min流速沖洗30mlSZ55322)0.1MZn(NO3)250以0.5m1/min流速沖洗30ml色譜柱性能測試表列出了色譜柱性能測試的條件。表六測試條件型號流動相流速溫度(C)樣品進樣體積(ml/min)(ul)SH系列0.01NH2SO41.0501%丙三醇5SC1011H2O1.0801%丙三醇5SC1821SP0810H2O1.0801%丙三醇5SC121125%CH3CN/H2O1.0501%丙三醇10SZ553270%CH3CN

12、/H21.0501%丙三醇5O計算公式：NTP=5.54X(Rt/W)2其中NTP：理論塔板數，Rt：保留時間，W：半峰寬。ShodexSUGARSP0810的介紹由于色譜柱采用了比其他型號的SUGAR系列色譜柱更軟的裝填料，使用時要特別注意，尤其是在啟動泵和停泵的時候，緩慢變化流速，不要使壓力驟然變化過大。在使用之前，請在閱讀ShodexSUGAR系列色譜柱說明書的同時熟記以下的介紹。I色譜柱的安裝和拆卸（1）安裝色譜柱，啟動泵：1）設置流速為0.20.3ml/min2）將色譜柱兩端的柱旋塞取下，在連接管路之前，確保流動相事先已充分脫氣，管路已用流動相清洗。確認有液體從可管路流出，保持連接管

13、路的通暢。3）確認流速的設置是正確的，啟動泵，除去管路中的空氣。4）保持泵運行狀態，將色譜柱按標示的正確方向接入系統中。接好之后，確認兩端沒有溶劑泄漏。5）加熱色譜柱至70C.6）溫度達到設定值后，逐步的增加流速直至正常使用值。（2）結束一天的分析過程后，第二天繼續分析時：1）降低泵流速至0.20.3ml/min,保持泵運行。2）關掉柱溫箱。3）到溫度降到室溫時,停泵。4）讓色譜柱連接在色譜系統中。（3）重新開始分析：1）確認泵流速設置在0.20.3ml/min2）打開柱溫箱加熱色譜柱。3）加熱色譜柱到設定溫度。4）當溫度達設置值時啟動泵。5）逐步的增加流速到正常使用值。（4）完成分析后,拆下

14、色譜柱：1）降低流速至0.20.3ml/min,保持泵運行。2）關掉柱溫箱。3）讓柱溫降到室溫。4）到柱溫降到室溫時,停泵,拆下色譜柱。5）將柱旋塞擰緊,密封好色譜柱,保存于溫度波動小的地方。II仔細的使用色譜柱有機溶劑可作為流動相，如乙醇和乙腈，最高濃度不要超過20%。任何情況下都要避免泵壓力或流速的驟然變化，建議使用無脈沖的泵或在泵系統中安裝脈沖阻尼器，以保證流動相無脈動輸出。在使用時保持柱溫在7095C范圍內，否則端基異構體會分離出來導致峰展寬。每根色譜柱的最大工作壓力為3.0MPa。推薦使用壓力限制裝置。最大流速可設置為1.0ml/min,但在柱溫40C條件下，最大流速設置為0.5ml

15、/min。根據I部分的建議設置泵的啟動和停止。建議使用保護柱，保護柱不僅可以有效避免雜質對色譜柱的傷害，也減緩了脈沖和壓力變化對色譜柱的影響。保護柱的選擇，請參考說明書部分。警惕：不要在規定的壓力和流速范圍外使用色譜柱，否則，色譜柱的性能會被損害，通過清洗步驟也不能恢復其性能。13保證說明ShowaDenkoK.K.保證：Shodex色譜柱在送達用戶處時，如果用戶按照使用說明書操作，我們確保色譜柱能達到柱子出廠檢定證書的水平(附在色譜柱包裝盒中)。對于本說明書沒有涉及到的特殊目的的用途，ShowaDenkoK.K不作任何保證。如果柱子的規格與說明書有任何不符之處，請用戶在收到柱子后的10天內告知ShowaDenkoK.K.。ShowaDenkoK.K.有責任為用戶進行柱子的更換。對于任何間接的，或由于和儀器連接而引起的附帶的或相應的破壞，無論這種破壞是在擔保范圍以內，還是由于疏忽引起的，均不在退換柱子的保證范圍內。下列情況不予保修如果沒有按照操作說明書操作2）如果由ShowaDenkoK.K.指定之外的任何個人或公司重裝過柱子3）如果柱子被處理過4）如果柱子由使用者轉售他人，而未預先書面告知ShowaDenkoK.K.5）由于如下原因造成柱子性能和出廠檢定證書的水平不一致：a）電腦病毒b）使用者所用的樣品，試劑，氣體或冷卻水中有不純物c）和柱子連接使用的設備，儀器或部件斷裂或出現