1、電阻(dinz)抗法白細胞檢測原理美國(mi u)庫爾特原理（coulter principle)共四十頁細胞計數電阻抗(zkng)原理共四十頁把用等滲電解質溶液（稀釋液）稀釋的細胞懸液倒入到一個不導電的容器中，將小孔管，也稱傳感器插到細胞懸液中，小孔是電阻抗法細胞計數的一個重要部分，其內(q ni)充滿了稀釋液，并有一個電極，其外側細胞懸液中有一個外電極。當電流接通后，位于小孔兩側的電極產生穩定的電流，細胞懸液通過有固定直徑和厚度的小孔向小孔內部流動，計數孔直徑一般100um，厚度為75um左右。因為小孔周圍充滿了具有傳導性的液體，其電子脈沖是穩定的。如果供給的電流I和阻抗Z是穩定的，那么根

2、據歐姆定律，通過小孔的電壓E也是不變的。當懸液中一個細胞通過小孔時，由于細胞有極小的傳導性，細胞的導電性質比等滲的稀釋液要低，在電路中小孔感應區內電阻增加，于瞬間引起了電壓變化而出現一個脈沖信號，這被稱為通過脈沖，電壓增加程度取決于細胞體積，細胞體積越大，引起的電壓變化越大，產生的脈沖振幅越高。通過對脈沖大小的測量可以測定出細胞體積，記錄脈沖的數目可以得到細胞計數結果；經過對各種細胞所產生脈沖大小的電子選擇，可以區分不同種類的細胞，并進行分析。共四十頁電阻(dinz)抗法白細胞分群及計算方法根據脈沖的大小，即可人為地將血內的白細胞分成幾群（二分群或三分群）電阻法白細胞“分類”實際上是根據溶血劑

3、作用后的白細胞體積(tj)大小的分群，其測量的標準只是根據白細胞體積(tj)的大小，而體積(tj)大小并不是細胞形態惟一的指標。共四十頁直方圖與脈沖(michng)信號的關系共四十頁白細胞體積(tj)分布直方圖共四十頁經過溶血劑處理后的白細胞根據(gnj)體積大小可以初步確認其相應的種類：第一亞群（小細胞群）是淋巴細胞（LYM);第二個亞群是單個核細胞區（MONO),也被稱為中間細胞（MID)；相當于粒細胞的細胞群（GRAN)位于第三亞群（大細胞群）。例如位于3590fl的顆粒被計數為淋巴細胞，90160fl的顆粒計數為單核細胞，160fl以上的顆粒計數為粒細胞。共四十頁在白細胞計數池中除加入

4、一定量的稀釋液外還加入了溶血劑，此溶血劑一方面使紅細胞迅速溶解；另一方面使白細胞漿經細胞膜滲出，胞膜緊裹在細胞核或存在的顆粒物質周圍。經此處理后的白細胞體積與其自然體積無關，含有顆粒的粒細胞經溶血劑處理后比無顆粒的單核細胞和淋巴細胞體積要大些，但其真實體積與單核細胞相等或更小。白血病細胞、異性淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、漿細胞、嗜堿性粒細胞等多出現在單個核細胞區域，少數也可見于淋巴細胞或粒細胞區。所以白細胞直方圖并不能代表自然狀況，但可以(ky)用于判斷白細胞各體積群分布情況。共四十頁正常(zhngchng)白細胞直方圖共四十頁異常(ychng)白細胞直方圖共四十頁異常(ychng)白細胞直方圖共

5、四十頁異常(ychng)白細胞直方圖共四十頁異常(ychng)白細胞直方圖共四十頁異常(ychng)白細胞直方圖共四十頁異常(ychng)白細胞直方圖共四十頁白細胞直方圖變化(binhu)的意義主要是指導實驗室工作人員如何做好儀器計數的質量控制(kngzh)及判斷是否“涂片復檢”。1.判斷白細胞計數時是否受到其他因素的干擾某些貧血的病理性紅細胞、新生兒紅細胞等，對溶血劑有較強的抵抗力，使之不溶解或不完全溶解而影響白細胞計數；血液內有較多的有核紅細胞，溶解后紅細胞的核當做白細胞計數；血小板聚集成團，誤計數為白細胞等，影響了白細胞計數，此時白細胞直方圖也可發生相應的改變，因而觀察圖形變化可判斷儀器

6、的工作狀態。共四十頁白細胞直方圖變化(binhu)的意義2.判斷直方圖是否符合篩選標準，決定涂片鏡檢電阻抗法儀器白細胞(xbo)“分類”（僅是體積的分群）結果，只是用于健康體檢或無明顯血液學檢查異常結果及白細胞(xbo)各群分布直方圖正常的病人。換言之，在白細胞(xbo)數明顯增高或減低，或末梢血出現形態不典型或幼稚細胞(xbo)時，均可導致直方圖異常，此時細胞(xbo)“分類”結果是不準確的。因此，中華檢驗醫學會專家座談會明確規定，使用血細胞(xbo)分析儀進行白細胞(xbo)“分類”時，必須具備：病人白細胞(xbo)計數、血小板計數、血紅蛋白含量均在正常范圍內白細胞(xbo)體積分布直方圖

7、完全正常的情況下，才能作為白細胞(xbo)分類結果用于臨床，否則必須涂片鏡檢。共四十頁掌握(zhngw)本實驗室血細胞分析儀的白細胞正常直方圖不同廠家(chn ji)、不同型號的儀器白細胞體積分布直方圖是不完全相同的，但電阻法各類儀器白細胞直方圖的病理變化趨勢是一致的。因此，在分析各種病理變化的圖形之前，必須先掌握自己實驗室所擁有的血細胞分析儀的白細胞正常直方圖。共四十頁電阻抗法紅細胞及血小板檢測(jin c)原理紅細胞計數(j sh)和紅細胞比容測定原理紅細胞通過小孔時，形成相應大小的脈沖，脈沖的多少即紅細胞的數目，脈沖的高度代表單個脈沖細胞的體積。脈沖高度疊加，經換算即可得紅細胞數，得出紅

8、細胞比容。共四十頁血紅蛋白測定(cdng)原理共四十頁血紅蛋白測定(cdng)原理被稀釋的血液加入溶血劑后，紅細胞溶解，釋放血紅蛋白，后者與溶血劑中有關成分結合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統，在特定波長（一般530nm550nm)下比色，吸光度的變化與液體中血紅蛋白含量成正比，儀器便可顯示其濃度。國際血液標準委員會（ICSH)推薦的氰化高鐵（HiCN）法，最大吸收在540nm。校正儀器必須以HiCN值為標準。為了減少溶血劑的毒性(d xn)，避免含氰血紅蛋白衍生物檢測后的污物處理，今年來有些血細胞分析儀使用非氰化溶血劑（如SLS）。實驗證明，形成的衍生物（SLS-Hb)與HiCN吸收

9、光譜相似，實驗結果的精確性、準確性達到含有氰化物溶血劑同樣水平。共四十頁正常(zhngchng)紅細胞直方圖共四十頁正常(zhngchng)紅細胞直方圖儀器在36360fl的范圍內分析紅細胞。正常紅細胞主要分布在50200fl范圍內，直方圖上可見兩個細胞群體：從50125fl區域有一個幾乎(jh)兩側對稱、較狹窄的正態分布曲線（紅細胞主群），主峰右側約分布在125200fl區域的細胞，為大紅細胞和網織紅細胞。共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖1.缺鐵性貧血的直方圖：其特點為曲線峰左移，峰底變寬，顯示小細胞不均一性。

10、外周血涂片顯示紅細胞體積(tj)大小不均，中央淡染區明顯增大，小紅細胞明顯增多。2.輕型珠蛋白生成障礙性貧血的直方圖：圖形表現為曲線峰左移，峰底變窄，顯示小細胞均一性。外周血涂片顯示紅細胞體積減小，但大小變化不明顯，有時可見靶形紅細胞。共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖3.鐵粒幼細胞性貧血的直方圖：圖形表現為曲線(qxin)峰左移，可呈“雙峰”形，峰底明顯變寬。外周血涂片顯示紅細胞體積明顯大小不均，存在明顯的小紅細胞和大紅細胞或正常紅細胞兩個細胞群，呈“雙形性”改變，但以小細胞低色素最為突出。缺鐵性貧血經鐵劑治療有效，在3周左右時也可出現類似的“雙峰”狀圖形，但峰底更寬。共四十頁異常(yc

11、hng)紅細胞直方圖4.葉酸或VitB12缺乏引起巨幼紅細胞貧血的直方圖:治療前的直方圖曲線(qxin)峰變低、右移，峰底明顯變寬，顯示明顯的大細胞不均一性，是葉酸或VitB12缺乏引起巨幼細胞性貧血的重要直方圖特征。外周血涂片顯示紅細胞體積大小不均，橢圓形的大紅細胞明顯增多；而且部分中性粒細胞核分葉增多。共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖5.急性失血性貧血的直方圖：直方圖的曲線峰變低，其它(qt)特點與正常紅細胞直方圖一致。共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖共四十頁異常(ychng)紅細胞直方圖共四十頁電阻(

12、dinz)抗法血小板檢測原理血小板隨紅細胞一起在一個系統中進行檢測，由于血小板體積與紅細胞體積有明顯的差異，儀器設定了特定的閾值，將高于閾值者定于紅細胞，反之為血小板，檢測數據經儀器內部的計算機處理后分別給出血小板與紅細胞數目。血小板分別儲存于64個通道(tngdo)內，直方圖范圍為230fl。不過，不同儀器的血小板直方圖范圍不一。MPV就是此平整曲線所含的群體算術平均體積，所以，MPV也就是PLT體積分布直方圖的產物。共四十頁電阻(dinz)抗法血小板計數原理共四十頁正常(zhngchng)血小板直方圖共四十頁各類血小板直方圖共四十頁異常(ychng)血小板直方圖1.巨大(jd)血小板增多的

13、血小板直方圖：與正常直方圖相比，圖形分布峰右移，特別是與橫坐標的接近或重合點明顯右移，同時MPV明顯增高，有時儀器不顯示MPV值；有的儀器在35fl處可見一個小峰。血片上可見較多的大血小板。2.小血小板增多的血小板直方圖：與正常直方圖相比，圖形分布峰左移，特別是與橫坐標的接近或重合點明顯左移，同時MPV值明顯減低。血片上可見較多的小血小板。共四十頁異常(ychng)血小板直方圖3.血小板聚集干擾的血小板直方圖：與正常直方圖相比(xin b)，圖形分布峰明顯右移，也不與橫坐標重合；血小板計數值通常明顯減低，儀器一般也不顯示MPV值。血片上可見較多聚集的血小板。4.小紅細胞或紅細胞碎片干擾的血小板直方圖：與正常直方圖相比，圖形分布峰右側明顯抬高上揚，血小板計數值通常假性增高，儀器一般也不顯示MPV值。血片上可見較多的小紅細胞或紅細胞碎片。共四十頁內容摘要電阻抗法白細胞檢測原理。當電流接通后，位于小孔兩側的電極產生穩定的電流，細胞懸液通過有固定直徑和厚度的小孔向小孔內部流動，計數孔直徑一般100um，厚度為75um左右。因為小孔周圍充滿了具有傳導性的