1、22/22第一章 緒論遺傳學：研究動物遺傳與變異與其規律的一門學科。在遺傳學建立與發展領域起到重大作用的人物與代表作、年代 達爾文 物種起源 1859 孟德爾 植物雜交論文 1866 摩爾根 基因論 1910 Watson和crick DNA的雙螺旋結構 1953第二章 遺傳物質的基礎1.DNA作為遺傳物質的直接證據（1）肺炎雙球菌的轉化實驗（2）噬菌體的侵染實驗 (3)煙草花葉病毒的重建實驗（RNA為遺傳物質的證據）作為遺傳物質的幾個條件精確復制，確保遺傳的世代遺傳儲備，傳遞信息的潛在能力時間，空間的穩定性能夠變異DNA的一級結構：4種核苷酸的排列順序 二級結構：雙螺旋 直徑是2nm 螺距3

2、.4nm基因：是有功能的DNA片段，含有合成有功能的蛋白質多肽鏈或RNA所必需的全部核苷酸序列，是遺傳物質的結構和功能單位。外顯子：把斷裂基因中的編碼序列叫為外顯子含子：把斷裂基因中的非編碼區叫為含子啟動子：準確而有效的起始基因轉錄所特需的核苷酸序列C值矛盾：C值得大小與物種的結構組成和功能的復雜性沒有嚴格的對應關系的現象?；蚪M：一個物種單倍體染色體所攜帶的一整套基因。染色質由核酸和蛋白質組成（或者為DNA RNA 和蛋白質）染色質的分類與區別常染色質 螺旋度低染色淺位于核中央有活性異染色質螺旋度高 染色深位于核周邊無活性12.端粒：染色體末端的特化結構。功能：防止染色體末端被酶酶切；防止染

3、色體末端與其他粘連；防止染色體在DNA復制時保持完整。染色體的幾個參數：臂比著絲粒指數相對長度14著絲點位置：中著絲粒染色體；近著絲粒染色體；近中著絲粒染色體；端著絲粒染色體。15.同源染色體：在體細胞中成對存在的染色體中有一對來自父方一對來自母方，大小一樣、結構形狀功能相似的一對染色體。16聯會：同源染色體彼此靠攏并精確配對的過程。染色體的核型分析：根據各個細胞中染色體的長度、大小、著絲粒位置，隨體有無等因素把他們排列起來研究的過程。染色體異常引起的遺傳疾病動物育種，鑒定遠緣雜交研究物種間的親緣關系，物種進化機制追蹤鑒別外源染色體或染色體片段有絲分裂與減數分裂的區別有絲分裂發生在體細胞中染色

4、體復制一次細胞分裂一次子母細胞具有同樣的質量與數量的染色體和遺傳物質 減數分裂發生在性細胞中染色體復制一次細胞連續分裂兩次子細胞染色體減半遺傳物質減半第一次減數分裂前期的五期：細線期；偶線期；粗線期；雙線期；終變期第三章 遺傳物質的基礎DNA的復制：以親代DNA為模板合成一個新的與親代一樣的子代DNA的過程半保留復制：一個雙鏈DNA分子合成一個雙鏈子代DNA分子，一條是新和成的一條是原來的。岡崎片段：以5-3合成的不連續的片段DNA合成所要的幾種物質DNA聚合酶主要為酶三DNA連接酶連接岡崎片段拓撲異構酶消除正超螺旋解旋酶解開雙鏈單鏈結合蛋白防止單練水解引發酶引物合成環狀DNA復制的方式：8型

5、；滾環形；D型原核與真核復制的區別原核真核DNA合成時期整個過程間期的S期起點數目一個多個引物長度10-16個10個岡崎片段長度長短前導鏈、后隨鏈的合成酶三聚合酶。聚合酶真核生物DNA復制依靠端粒與端粒酶。DNA復制與轉錄的異同兩者均在酶的催化作用下，以DNA為模板，按堿基互補配對的原則，沿5-3方向合成與模板互補的新鏈轉錄時只有一條鏈為模板；復制兩條鏈作為模板；轉錄起始不需要引物參與；復制需引物；轉錄時DNA與RNA雜合雙鏈是不穩定的；復制時，復制叉一直打開，不斷向兩側延伸；轉錄的底物是4種核糖核苷酸，配對關系是A-U,C-G;復制的底物是4種脫氧核糖核苷酸，配對關系是A-T,C-G;兩種酶

6、系不同：轉錄為RNA聚合酶；復制為DNA聚合酶；復制時整條鏈進行，轉錄只發生在一部分區域真核生物轉錄生成的初級產物需要加工RNA聚合酶有核心酶與全酶組成：后者包括核心酶與亞基終止子分為強終止子與弱終止子 功能mRNA加工的方式5端加帽有助于mRNA穿過核膜進入胞質；保護5端不被酶降解翻譯時供IF3和核糖體結合3端加尾增加mRNA的穩定性有助于成熟的mRNA進入胞質增強翻譯效率mRNA的剪接翻譯：從DNA到mRNA的核苷酸到多肽鏈上的氨基酸最后合成蛋白質的過程遺傳密碼的特性三聯子密碼無逗號不重疊通用性兼并性擺動簡并性：由一種以上密碼子編碼同一種氨基酸的現象蛋白質的生物合成：（1）起始 （2）延伸

7、：分為三個階段：進位，肽鍵合成，移位 （3）終止TU-TS循環：EF-TU-GTP氨基酰tRNA三元復合物進入核糖體，GTP被水解為GDP，EF-TU-GDP無活性從核糖體解離下來，在另一延伸因子EF-TS的作用下形成EF-TU-TS復合物，釋放GDP，EF-TS被GTP取代形成EF-TU-GTP復合物，復合物再次被利用，協助下一個氨基酰進入A位。17.中心法則的容 （也可以文字表達） DNA 復制 反轉錄 轉錄 蛋白質 翻譯 RNA 復制 基因表達：基因轉錄與翻譯的過程。操縱子：由調節基因、操縱基因、和有關生物活性的結構基因組成，結構基因排列成簇，協同履行精巧的生命活動。負調控：當調節蛋白缺

8、乏時基因表達，反之關閉的過程正調控：當調節蛋白存在時基因關閉，加入后基因表達開啟的過程第四章 染色體畸變:在自然突變或人工誘變的條件下使染色體的某區段發生改變，從而改變基因的數目、位置與順序類型：缺失；重復；倒位；易位缺失的類型：中間缺失；末端缺失；缺失的表型與遺傳效應：a.致死或出現異常 B.假顯性或擬顯性重復：染色體多了自己的一段，形成重復環。位置效應：一個基因隨著染色體畸變而改變它與鄰近基因的位置關系所引起的表型改變的現象劑量效應：因基因數目的不同，表現出的不同表型差異現象倒位類型：臂倒位，臂間倒位；并且形成倒位圈。缺失環、重復環與倒位圈的區別缺失環發生在正常鏈上；重復環發生在異常鏈上；

9、倒位圈是在區段合適的位置形成易位的類型：相互易位；單向易位。羅伯遜易位：兩條非同源的端著絲點發生著絲點融合，從而形成一條中或者近中著絲點染色體易位的遺傳與表型效應 改變正常的連鎖群 位置效應 假連鎖現象：（1）交互分離 配子可育 （2）相鄰分離 配子不可育 染色體數目的變異：是指染色體數目發生發生不正常的改變。整倍體：含有一個或若干個染色體組的細胞或生物。整倍體變異：整套染色體組的增加或減少。整倍體變異（符號表示）：單倍體 n;二倍體 2n;三倍體 3n；四倍體 4n；非整倍體：細胞中含有不完整的染色體組的生物。非整倍體變異（符號表示）：單體 （2n-1）;雙單體 (2n-11);缺體 2n-

10、2;三體 2n+1;雙三體 2n+1+1;四體 2n+2；基因突變：基因水平上遺傳物質可檢測、能遺傳的改變，不包括遺傳重組（由理化因素引起的DNA分子的成分和結構的變化）。類型：（1）自發與誘發突變 （2）顯性與隱形突變正向與回復突變基因突變的一般特性多向性可逆性重演與平行性突變的有利與有害性復等位基因：在群體不同個體中位于同一座位的多個基因 基因型的種類N(n+1)/2等位基因：位于同源染色體上同一座位上控制一對相對性狀的基因。突變為何害大于利？ 因為在進化的過程中，它們的遺傳物質與基因調控下的代過程與環境都達到了相對平衡和高度的協調統一，一旦基因發生突變，往往便不可避免地造成整個代的過程破

11、壞，從而變現為生活力降低，生育反常，極端的會造成當代致死。突變的分子機制：堿基替代；移碼突變轉換：在堿基替代中，一個嘌呤被另一嘌呤替代的現象顛換：在堿基替代中，一個堿基被一個嘧啶或者一個嘧啶被一個堿基取代的現象堿基替代的遺傳效應：（1）錯義突變 （2）無義突變 形成終止密碼子 UAA UAG UGA （3）同義突變17.突變抑制的途徑：1.密碼子的兼并性 2.基因突變的抑制 3.基因間突變的抑制18DNA的修復方式 ：（復制的修復） 1.DNA聚合酶的修復 2.錯配修復系統 3.尿嘧啶糖基酶修復系統 （損傷的修復） 1.sos修復系統 2.二聚體糖基酶修復 3.光修復 4.暗修復 5.重組修復

12、19.重組的類型：同源重組；位點專一性重組；轉座重組；20.溶菌狀態：噬菌體在宿主細菌中獨立存在的狀態21熔源狀態：噬菌體通過重組作用整合進入宿主細菌染色體的特異位點22.轉座子的特點：（1）其末端有20-30bp的反向重復序列； （2）轉座子編碼轉座酶23.轉座的遺傳效應：eq oac(,1)轉座引起插入效應eq oac(,2)引起插入位置產生新基因 eq oac(,3)引起插入位置少數堿基對重復eq oac(,4)引起染色體畸變eq oac(,5)導致生物進化第五章 1.性狀： 生物表現出來的形態特征和生理特征得總稱2相對性狀:同一單位性狀的相對差異3.基因型:生物個體的遺傳組成4.表現型

13、：特定的基因型在一定環境條件下表現出的性狀5.基因座:基因處在染色體上的固定位置6.測交：F1代雜合子與隱性純合體親本雜交，驗證F1的遺傳組成的方法7.孟德爾自由組合遺傳定律的意義提示了位于非同源染色體上基因間的相互關系不同對基因自由組合產生的基因重組是生物發生變異的一個重要來源，也是生物出現多樣性的一個重要原因在雜交育種中，可以按照人們的意愿組合兩個親本的優良性狀，培育新品種預測測交后代中出現優良性狀組合的大致比例8.實現自由組合的條件二倍體完全顯性控制不同性狀的基因位于不同的同源染色體上不同對基因無互作，一種基因，一種效應F1產生的配子比例相等，生活力一樣，F2代個體成活率一樣實驗群體足夠

14、大9.不完全顯性：介于親本之間的表型10.共顯性：雙親性狀同時在后代的同一個體表現出來的顯性11.致死基因可發生在不同的發育階段12基因互作的類型與其比例互補作用 9:7積加作用 9:6:1重疊作用 15:1上位作用 顯性上位 12:3：1 隱性上位 9:3:413.連鎖遺傳：原來在親本中組合在一起的兩個性狀在F2中有連在一起的傾向14.交換率（重組率）：重組型配字數占總數的百分比。 圍是0-50% 1%的交換率為一個遺傳單位15.連鎖群：位于同一染色體上的所有基因的集合16.基因定位：把染色體上的多種基因間的相互之間的排列順序確定下來又稱染色體作圖17.作圖的方法：兩點測交 三點測交 三點測

15、交的計算步驟：找出親本性與雙交換性； 確定中間位置基因 計算雙單交換率干涉：染色體上某兩個基因座的單交換減少，鄰近基因座位單交換發生的可能性的現象并發系數=實際雙交換率除以理論雙交換率干涉率=1-并發系數性染色體的構型有哪些？XY XO ZW ZO性反轉：生物個體在發育過程中，由一個性別轉變成另一個性別的現象伴性遺傳：性染色體上的基因所控制的某些性狀總是伴隨著性別而遺傳的現象伴性遺傳的特點：eq oac(,1)正反交結果不同eq oac(,2)性狀的分離比數在兩性比例不一致eq oac(,3)有交叉遺傳與個貸遺傳eq oac(,4)出現假顯性現象從性遺傳：性狀的表現受個體性別的影響，顛倒了性狀

16、的顯隱性性狀，控制從性性狀的基因位于常染色體上限性性狀：只在一個性別表現的性狀。三種遺傳的區別：（1）伴性遺傳 正反交結果不同；從性遺傳 正交結果一樣；限性遺傳 無固定的遺傳模式；（2）伴性遺傳 有交叉遺傳與隔代遺傳現象；從性遺傳 基因一般位于常染色體上；限性遺傳 有遺傳基礎無性狀表現；（3）伴性遺傳 出現假顯性現象；限性遺傳 位于性染色體上基因控制的限性性狀只在雄性個體表達；第七章：數量遺傳學基礎1.數量性狀（quantitative character）：表現連續變異的性狀稱為數量性狀，如產蛋量、產奶量。數量性狀的特點：變異的連續性對環境的敏感性分布正態性多基因控制（無顯隱性、效應可加性、

17、微效性）2.數量性狀和質量性狀的區別數量性狀 多基因 正態分布 連續 大 群體 質量性狀 單基因 二項分布 分散 小 個體和群體 3.數量性狀表型值的剖分表型值 P個體表型值，G基因型值，E環境效應值，則：P=G+E。群體均值 在一個群體中，某一性狀的表型值應以群體均值來表示，即：P=G4.基因型值剖分 G=A+D+IA加性效應；D顯性效應；I上位效應5.通徑系數：表示相關變量間因果關系的一個統計量6.決定系數：表示一個變量對另一個變量的決定程度7.一自變量到依變量的通徑系數的平方稱為該自變量對依變量的決定系數。8.兩自變量間相關系數與它們各自到依變量的通徑系數乘積的2倍稱為該兩自變量共同對依

18、變量的決定系數。決定系數的符號用d來表示，9.通徑系數的定理：(自己看書在178頁，五個定理)10.通徑鏈的追溯規則A、進退原則。一條通徑鏈必需要“先退后進”。B、換向原則。 C、相關線原則。D.避免重復11.隨機交配下親屬間的通徑與相關 父子或母子,父女或母女 rxy=1/2祖關系 與叔侄關系一樣 rxy=1/4半同胞關系 rxy=1/21/2=1/4 全同胞關系 rxy=1/212.重復力的概念 重復力在統計學上的意義就是同一個體同一性狀不同次生產記錄的組相關系數，它是以個體間方差為組間方差，以個體方差為組方差的組相關系數13.重復的用途：1.作為判斷遺傳力估計是否正確的參考。2.確定性狀

19、需要度量的次數。重復力愈小，準確度隨度量次數增長愈快，接近最大準確度所需的度量次數也愈多。14.遺傳力：廣義：數量性狀基因型方差占表型方差的比例 狹義：數量性狀基因型占育種值方差的比例15.遺傳力的應用：（一）預估選擇進展。子代群體均值與親代群體均值之差稱為遺傳進展或選擇反應，用R表示：R=SH2（二）確定繁育方法。遺傳率高的性狀宜采用本品種選育，對遺傳率低的性狀則宜采用雜交育種。（三）確定選擇方法。h2高者，采用個體表型選擇效果好。h2低者采用家系或家系選擇。（四）估計個體育種值。 h2=VA/VP（五）制訂選擇指數。選種時往往需要同時選擇多個性狀，就需要制訂一個綜合選擇指數，h2是選擇指數

20、制訂過程中不可缺少的遺傳參數。16.遺傳相關（genetic correlation）：指生物個體或性狀育種值之間的相關程度。17.遺傳相關的類型： 親屬間的遺傳相關：指有親緣關系的兩個體同一性狀育種值之間的相關程度，用相關系數rA表示。 性狀間的遺傳相關：指同一個體兩個不同性狀育種值之間的相關程度，也用相關系數(RA(XY)表示.性狀間相關原因的剖分： Ax rA RX AY RY rE hx ex hy ey PX PYr =hxhyrA+exeyrEh2+e2=1 e=1-h2 遺傳相關的估計方法（一）親子協方差法18. 性狀 遺傳相關牛 產奶量與乳脂率（%）-0.07-0.67產奶量與

21、非脂干物質（）-0.02-0.2 產奶量與泌乳速度0.200.30 產奶量與前乳房泌乳率（%）-0.200.90 產奶量與提高0.300.70 產奶量與胸圍 00.40 乳脂量與非脂干物質量0.300.70 乳脂量與總蛋白質0.400.70綿羊 污毛量與凈毛量0.650.76 污毛量與毛從長度-0.020.17 污毛量與體重-0.10-0.03 第九章 動物基因組學基礎1.遺傳標記：指能夠用以區分生物個體或群體極其特定基因并能穩定遺傳的物質標記。2.傳統遺傳標記（形態遺傳標記、細胞遺傳標記、生化遺傳標記和免疫遺傳標記）分子遺傳標記（RFLP、RAPD、AFLP、VNTR、SNP）。 3.RFL

22、P（restriction fragment length polymorphism 限制性片斷長度多態）4.串聯重復序列標記（tandem repeated sequence，TRS）或可變串聯重復序列（variable mumber trandem repeated sequence ，VNTR）5.RAPD（random amplified polymorphism DNA 隨機擴增多態DNA）6.AFLP（amlified fragment length polymorphism 擴增片段長度多態）7.SNP（single nucleoide polymorphisms，單核苷酸多態）

23、8.分子遺傳標記在動物育種中的應用 個體與親緣關系的鑒定種質資源的遺傳評估、檢測、保護和利用基因定位與遺傳圖譜的構建:如豬的蘭尼定受體基因(RYR1)，酸肉基因（PRKAG3），影響產仔數的ESR和FSH基因，綿羊高繁殖率FecB位點等標記輔助選擇9.動物的標記輔助選擇應用 1 豬的應激基因檢測；2 豬的ESR基因與多仔 性狀；3 雞的羽速、鵪鶉羽色 自別雌雄4 矮小基因與矮小雞5 肌肉生長抑制素Myostatin基因與肉牛生產10.基因圖譜描述了基因位點在染色體上的線性排列與它們之間的相對距離。 廣義：包括物理圖譜、遺傳圖譜、表達圖譜和轉錄圖譜。 狹義：物理圖譜和遺傳圖譜11.遺傳圖譜：又稱

24、連鎖圖譜(linkage map)，它是以具有遺傳多態性（在一個遺傳位點上具有一個以上的等位基因，在群體中的出現頻率皆高于1%）的遺傳標記為“路標”，以遺傳學距離（在減數分裂事件中兩個位點之間進行交換、重組的百分率，1%的重組率稱為1cM）為圖距的基因組圖。物理圖譜：物理圖譜是指有關構成基因組的全部基因的排列和間距的信息，它是通過原位雜交和體細胞雜交對構成基因組的DNA分子進行測定而繪制的。繪制物理圖譜的目的是把有關基因的遺傳信息與其在每條染色體上的相對位置線性而系統地排列出來。1cM大致相當于11063106bp的DNA.12.雜合度（H）：表示該群體中雜合子個體比例13.多態信息含量（PI

25、C）:值給出在平衡群體與隨機交配的情況下，根據后代遺傳標記，判斷出來自父親遺傳標記的交配類型占所有交配類型的比例。14.摩爾根圖距函數 X=（ 為重組率）Haldane圖距函數(當基因位點間有多重交換時)Kosambi圖距函數（邊際干擾）Karlin圖距函數（兩位點間有N次交換）15.似然的概念：指特定觀測表型出現的可能性。假定有A和a一對等位基因，A對a為顯性，人群中有3種基因型AA、Aa和aa，2種表型A_和aa（如白化），一對夫婦基因型為Aa，則其后代表型正常的概率為3/4，白化的概率為1/4。如果這對夫婦有3個孩子，前兩個孩子表型正常，第三個孩子為白化，出現這種表型的總概率（即似然率）

26、為（3/4）（3/4）（1/4）=9/6416.物理圖譜：用細胞核遺傳分子學原位雜交的方法和體細胞雜交與基因標記的方法來構建的圖譜。17.選擇定位：是通過特定的培養基選擇雜種細胞來進行定位的方法。易位定位和缺失定位的原理基本一樣，當雜種細胞丟失了易位染色體和缺失染色體后，分析雜種細胞能夠表達的基因與不能表達的情況來判斷該基因可能位于的染色體。 第六章 群體遺傳學基礎1.群體：一個亞種，一個變種，一個品種或一個其他同種生物類群的所有成員的總和。2.孟德爾群體：具有共同的基因庫，并由有性交配個體所組成的繁殖群體3.基因庫：一個孟德爾群體所包含的所有個體擁有的基因的總數4.遺傳平衡定律的要點：在隨機

27、交配的大群體中，沒有其他因素的影響基因頻率世代不變任何一個大群體中，無論基因頻率如何，只要經過一代交配，一對常染色體基因型不變在平衡群體中，基因頻率與基因型頻率關系有：D=P2 H=2Pq R=q25.遺傳平衡群體成立的條件必須為大群體隨機交配無遷移現象無突變無選擇包括人工和自然選擇6.應用：育種上 通過選擇改變基因頻率和基因型頻率。從根本上打破舊平衡建立新平衡，以達到提高畜群品質的目的； 家畜保種上 克服突變、遷移與遺傳漂變的影響，保持現有品種或品系的基因始終處于平衡狀態7.影響遺傳平衡定律的因素突變 選擇 淘汰率：某一基因型個體在下一代淘汰的個體數占后代總數的比率 適應度：在選擇中某一基因

28、型個體在下一代平均保留后代的比率遺傳漂變：由于樣本機誤造成基因頻率的隨機波動，可發生于任何群體中。遷移8.同質交配：表型相似或一樣的個體間的交配9.異質交配：不同表型個體間的交配第十章 非孟德爾遺傳非孟德爾遺傳包括：母體效應，劑量補償效應，基因組印跡，核外遺傳母體效應：子體的遺傳物質來自母方，但其表型不受本身基因型作用，與母體基因型一樣，表型不同母體效應的特點：自己的基因型推遲一代表達；子一代表型受母體基因型的影響，表型不與母體一樣，不按自己的基因型發育，而按母本的基因型。巴氏小體：將XX個體中失活的那條染色體命名為巴氏小體劑量補償效應：在哺乳動物中，只有一條X染色體具有活性，雌雄動物之間雖然

29、X染色體的數量不同，但X染色體上基因產物的劑量是平衡的萊昂假說的要點巴氏小體是一個失活的X染色體，失活的過程稱為萊昂化X染色體的失活是隨機的在哺乳動物中，雌雄個體細胞中的兩個X染色體中有一個在受精后失活在失活后，失活的染色體在細胞分裂過程中，一直失活在生殖細胞形成后，失活的染色體復活X染色體失活的三步：起始；擴散；維持基因組印跡：源自雙親的兩個等位基因，在遺傳后代時一方不表達或很少表達，依靠單親的性狀傳遞某種遺傳性狀的現象印跡的特點正反交結果不一致印跡即為抑制，母本印跡父本表達；父本印跡母本表達印跡可發生在一個基因上，一條染色體區段上，整條染色體上甚至全部來源的單條染色體印跡的階段：建立階段；

30、維持階段；重建階段核外遺傳的特點：子代獲得母體基因，表現與母體一樣的性狀核外遺傳：研究的是細胞核染色體以外的遺傳物質的結構，功能與遺傳信息傳遞的知識體系核外基因遺傳的特征：a.無組織特異性 B.為多拷貝基因組 C.結構一般為共價，閉合，環狀分子，分子量小 D.呈現嚴格的母系遺傳特征第十一章 基因工程是指在分子水平上采取工程建設方式，按照預先設計的藍圖，借助于實驗室技術 將某種生物的基因或基因組轉移到另一種生物中去，使后者獲得新遺傳性狀的一門技術。2.基因操作中的工具酶:手術刀限制性核酸切酶、核酸外切酶;縫紉機連接酶;復印機 DNA聚合酶、逆轉錄酶3.基因工程的容：目的基因的獲得;目的基因與載體

31、的連接成重組DNA分子;重組DNA分子導入受體細胞;篩選重組克隆 ;基因表達與產物分離4.限制性核酸切酶簡稱限制性切酶，是一類能識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列并具有專一切割位點的脫氧核糖核酸水解酶。5.限制性切酶分類 類別反應必須因子專一性 活性 I型S-腺苷基蛋氨酸，ATP，Mg2+識別部位和切點不同，無特定切割位點切甲基化 II型Mg2+特定識別、特定切割、切點在識別序列部只有限制酶活性III型ATP，Mg2+特定識別，切割隨機，切點在識別序列一側一定距離（3，端7-26bp）切甲基化II 型限制性切酶的特性 1）II型限制酶的識別特異性 回文識別序列 II型限制酶的識別序列大多是具有雙重

32、對稱結構，或稱回文序列 (Palindromic Sequence) 2）識別特定的核苷酸序列，其長度一般為48個核苷酸。 3）具有特定的酶切位點和酶切末端。切割方式有兩種：平頭末端；粘性末端7載體：.將外源 DNA 或基因攜帶入宿主細胞（host cell）的工具稱為載體?；蚬こ梯d體的分類：（1）質粒載體（2）噬菌體載體（3）病毒載體（4）人工構建 合載 體理想質粒載體的基本要求：1）能夠在宿主細胞量復制。（2）具有一種或多種限制酶的單一切割位點，并在此位點插入外源DNA片段。（3）分子量盡量小。（4）應包含一個可供選擇的標記基因，這個基因中間可插入一段外源DNA 而失活，導致表型改變。（

33、5）還應包含一個標記基因（性狀），以區別轉化細胞和未轉化細胞。一般質粒的性質：質粒的復制；質粒的拷貝；質粒的不相容性；質粒的宿主圍；轉移性；遺傳標記； 兩個質粒在同一宿主中不能共存的現象稱質粒的不相容性，它是指在第二個質粒導入后，在不涉與 DNA 限制系統時出現的現象。12.質粒的類型：松馳型質粒: 分子量較小，不具傳遞能力，復制不需要質粒編碼的功能蛋白，完全依賴于宿主提供的半衰期較長的酶(如DNA聚合酶、，依賴于DNA和RNA聚合酶等)來進行。 嚴緊型質粒: 復制要求同時表達一個由質粒編碼的蛋白質。多半是一些具有自身傳遞能力的質粒，分子量較大，其DNA復制與宿主染色體復制相偶聯。獲得目的基因的方法：PCR法；分離；化學合成PCR與大腸桿菌復制不同之處類別大腸桿菌復制PCR引物RNA單鏈DNA聚