1、回憶植物體細(xì)回憶植物體細(xì)胞雜交過程：胞雜交過程：植物細(xì)胞植物細(xì)胞A A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B原生質(zhì)原生質(zhì)體融合體融合雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)雜種植株雜種植株去壁去壁纖維素酶、纖維素酶、果膠酶果膠酶化學(xué)法化學(xué)法物理法物理法人工誘導(dǎo)人工誘導(dǎo)1.概念：動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩概念：動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。一、動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。信息的

2、單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。2 2、動(dòng)物細(xì)胞融合基本原理：、動(dòng)物細(xì)胞融合基本原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)方式、誘導(dǎo)方式滅活的病毒滅活的病毒物理法：物理法：化學(xué)法：化學(xué)法：生物法：生物法：4 4、過程、過程動(dòng)物細(xì)胞A 動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)融合2個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合、 核融合）單核細(xì)胞5 5、意義、意義打破生殖隔離，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能；打破生殖隔離，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能；重要用途：重要用途：形成雜種細(xì)胞形成雜種細(xì)胞獲得雜種植株獲得雜種植株結(jié)果結(jié)果物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振物理（離心、振蕩、電刺激）蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二

3、醇）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性原原 理理動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目融合前處理融合前處理用纖維素酶、用纖維素酶、果膠酶去壁果膠酶去壁用胰蛋白酶用胰蛋白酶使細(xì)胞分散使細(xì)胞分散6、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較1.1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？主要分布在什么地方？抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？主要分布在什么地方？ B B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后（漿細(xì)胞），可以產(chǎn)生抗體。主要分淋巴細(xì)胞受抗原刺激后（漿細(xì)胞），可以產(chǎn)生抗體。主要分布在血清中。

4、布在血清中。2. 2. 簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？這種方法獲得的抗體有什么缺陷？簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？這種方法獲得的抗體有什么缺陷？ 二、單克隆抗體二、單克隆抗體產(chǎn)量低，純度低，特異性差產(chǎn)量低，純度低，特異性差3.3.如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？每一個(gè)每一個(gè)B B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。體外培養(yǎng)單個(gè)淋巴細(xì)胞，體外培養(yǎng)單個(gè)淋巴細(xì)胞，提取分泌的抗體。提取分泌的抗體。4.4.體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)B B淋巴細(xì)胞能無限增殖嗎淋巴細(xì)胞能無限增殖嗎? ?怎樣解決這個(gè)問題？怎樣解決這個(gè)問題？一個(gè)一個(gè)B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)

5、胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合融合（只考慮兩兩融合）（只考慮兩兩融合）培養(yǎng)液中細(xì)胞有幾培養(yǎng)液中細(xì)胞有幾種類型？融合細(xì)胞種類型？融合細(xì)胞幾種幾種類型類型？骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞- B- B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞多種多種雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞在具有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)在具有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽性專一抗體檢驗(yàn)陽性克隆上述雜交細(xì)胞克隆上述雜交細(xì)胞分

6、開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，檢驗(yàn)陽性細(xì)胞檢驗(yàn)陽性細(xì)胞單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠體內(nèi)注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)特異性強(qiáng)，靈敏度高特異性強(qiáng)，靈敏度高5 5、過程、過程注意：該細(xì)胞繼承該細(xì)胞繼承雙親細(xì)胞雙親細(xì)胞的遺傳特性，既能的遺傳特性，既能產(chǎn)生專一抗產(chǎn)生專一抗體體又能又能無限增殖無限增殖。雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？特異性強(qiáng)，靈敏度高特異性強(qiáng)，靈敏度高單克隆抗體有何特點(diǎn)？單克隆抗體有何特點(diǎn)？6.6.單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用作為診斷試劑（作為診斷試劑（最廣泛的用途最廣泛的用途）：準(zhǔn)確識(shí)別各）：準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，并與一定抗原特異性結(jié)合。

7、種抗原物質(zhì)，并與一定抗原特異性結(jié)合。 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡易、快速準(zhǔn)確、高效、簡易、快速用于用于運(yùn)載藥物：制成運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療疾病：主要用于癌癥治療治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療注意：利用單克隆抗體制成的注意：利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”, ,其選擇性其選擇性是由抗體決定的是由抗體決定的, ,與藥物無關(guān)與藥物無關(guān), ,藥物的作用是殺死癌細(xì)胞。藥物的作用是殺死癌細(xì)胞。兩個(gè)過程兩個(gè)過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程三個(gè)三個(gè)“一一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一個(gè)新細(xì)胞一個(gè)新細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢一個(gè)優(yōu)勢課堂小結(jié)課堂

8、小結(jié)滅活的病毒滅活的病毒雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體：特異性單克隆抗體：特異性 強(qiáng)、靈敏度高強(qiáng)、靈敏度高單克隆抗體制備過程：單克隆抗體制備過程：B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)誘導(dǎo)融合融合B-BB-B細(xì)胞細(xì)胞B-B-瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞瘤瘤- -瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞（ B-B-瘤細(xì)胞）瘤細(xì)胞）克隆化培養(yǎng)克隆化培養(yǎng)抗體檢測抗體檢測產(chǎn)生所需產(chǎn)生所需抗體的雜抗體的雜交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體單克隆抗體B B體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔

9、A AC C 1.1.右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案的實(shí)驗(yàn)方案制備單克隆抗體制備單克隆抗體不能，沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無不能，沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的法獲得產(chǎn)生單一抗體的B B淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。(1).(1).該實(shí)驗(yàn)方案的目的是：該實(shí)驗(yàn)方案的目的是： _(2).(2).該方案能達(dá)到預(yù)期效果該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？嗎？為什么？B B體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C (3)A(3)A是從小鼠的脾臟中取是從小鼠的脾臟中取得得_ _ 該細(xì)胞能該細(xì)胞能夠產(chǎn)生夠產(chǎn)生_ _ 。(4)(4)圖中圖中B B為為_過程，過程，常用常用_作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承_的遺傳特性，的遺傳特性，既能既能_ ,_ ,又能又能_。B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞抗體抗體細(xì)胞融合細(xì)胞融合滅活的病毒滅活的病毒雙親細(xì)胞雙親細(xì)胞產(chǎn)生專一抗體產(chǎn)生專一抗體無限增殖無限增殖B B體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜