1、編輯ppt1水生生態(tài)系統(tǒng)藻類毒性試驗編輯ppt2不常用詞解釋 半對數(shù)坐標紙:橫坐標或縱坐標軸是按照相等的指數(shù)變化來增加的，（距離來說：如果每1cm代表10的1次方增加，則坐標軸刻度依次為0，10，100，1000，10000。） 內(nèi)插法:一般是指數(shù)學上的直線內(nèi)插，利用等比關系，是用一組已知的未知函數(shù)的自變量的值和與它對應的函數(shù)值來求一種求未知函數(shù)其它值的近似計算方法，是一種未知函數(shù)，數(shù)值逼近求法 。 編輯ppt3實驗原理 生物測試能夠彌補化學和物理的檢驗的不足，目前水生生態(tài)系統(tǒng)藻類毒理試驗已經(jīng)成為許多國家對環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測的標準方法之一而得到廣泛應用，影響藻類生長的主要因子包括陽光、二氧化碳、溫度

2、、PH及氮、磷、微量元素等營養(yǎng)成分。水環(huán)境中的這些生態(tài)因子的變化會刺激或抑制藻類的生長，而導致水體初級生產(chǎn)力的變化。如果外來有毒有害化學物質(zhì)進入水體，藻類的生命活動就會受到影響，生物量也隨之發(fā)生變化。編輯ppt4試驗方法1 水樣的加工制備 利用濾膜在減壓條件下過濾，以除去水樣中原有的藻類生物，在108kPa和121oC之下持續(xù)30min，高壓處理水樣，殺滅水樣中所有生物，以便測定水樣中的全部營養(yǎng)。2 藻類培養(yǎng)基的配制 分別取常量營養(yǎng)鹽的每一種化合物儲備液1mL和微量元素-EDTA的混合液1mL加入去離子水中，定容至1000mL得標準培養(yǎng)基，高壓滅菌后分裝三角瓶中備用。3 藻類預培養(yǎng) 將事先準備

3、的藻種移種至盛有培養(yǎng)基的三角瓶中，在試驗確定的溫度和光強條件以及無菌條件下，培養(yǎng)2-3周，使藻類達到同步生長階段。用離心機離心收集培養(yǎng)物中的藻細胞，去除上清液，在沉積的藻細胞中加入10mLNaHCO3溶液（15g/L）使藻細胞懸浮于此溶液中，再次離心，懸浮，再離心，懸浮，經(jīng)此處理的藻懸浮物作為試驗藻接中原。編輯ppt54 預備試驗 目的在于探明毒物對藻類影響的半數(shù)有效濃度（EC50）的范圍，為正式試驗打基礎。5 正式試驗 (1) 試驗濃度的選擇 按等對數(shù)間距取5-7個毒物濃度，其中必須包括EC50并在此濃度上下至少各設2個濃度，另設一個不含毒物的空白對照。各濃度組均設3個平行樣。（2）種的制備

4、和接種量 取上述達到同步生長的藻類培養(yǎng)液充分搖勻，取樣計數(shù)細胞密度后，用吸管轉(zhuǎn)移相應體積的細胞懸浮液到受試水樣中。（3）生物量的測定測定藻類生長的指標有多種，要考慮所有相關的環(huán)境因素以及自己試驗的目的和條件來選擇指標 編輯ppt6 常用的測試指標有：干重、光密度、細胞計數(shù)、葉綠素a含量的測定（減壓過濾一定體積的藻類培養(yǎng)液到玻璃纖維濾片上，加入1mL的MgCO3懸浮液后將水抽濾干凈，把濾片放到一個組織研磨管內(nèi)的底部，加入2mL的90%的丙酮，弱光下淹沒1-2min，再用5mL的90%的丙酮把殘留的樣品洗入15mL的有螺旋蓋的離心管中，離心（2000g）1-5min，靜置于暗處1-2h，是色素充分被抽提，離心，將上清液在分光光度計上，用1cm的比色皿分別讀取750、663、645和630波長處的吸收率，并以90%的丙酮作對照校正吸光度，依據(jù)P298的公式計算得葉綠素的濃度。） 編輯ppt7實驗結(jié)果與報告 計算EC50設各組平行樣品生物量的平均值分別為V空白,，V1，V2，V3，V4,，Vn，在半對數(shù)坐標紙上以受試毒物濃度為縱坐標y，以（ V空白- Vn ）/ V空白為橫坐標x，用內(nèi)插法計算生物量下降50%的毒物