1、生物實驗總結·必修一必修一一、用高倍顯微鏡觀察幾種細胞l 目的要求1.使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞，比較不同細胞的異同點.2.運用制作臨時裝片的方法.l 材料用具1.可選用的觀察材料：真菌（如酵母菌）細胞，低等植物（如水綿等絲狀綠藻）細胞，高等植物細胞（如葉的保衛細胞），動物細胞（如魚的紅細胞或蛙的皮膚上皮細胞）等.2.用具：顯微鏡，載玻片，蓋玻片，鑷子，滴管，清水，染色液.l 方法步驟1.取鏡.右手握鏡臂，左手托鏡座，將顯微鏡放置在距離桌邊10cm，實驗者身體的偏左側.2.對光.轉動轉換器，用低倍物鏡正對通光孔，轉動遮光器用最大光圈正對通光孔.左眼注視目鏡，雙手轉動反光鏡（強光下用平

2、面鏡，弱光下用凹面鏡），至看到圓形白亮視野為止.3.放置裝片.將玻片標本中有顏色的部分正對通光孔放正.用壓片夾壓住.4.低倍鏡觀察.雙手向外轉動粗準焦螺旋使鏡筒下降至接近裝片為止，此時眼睛從側面觀察物鏡的下邊緣注意不要砸到裝片；左眼注視目鏡雙手緩慢向內轉動粗準焦螺旋，到視野中出現物像，調節細準焦螺旋使物像更加清晰.將要觀察的物像移動至視野中央.5.高倍鏡觀察.轉動轉換器用高倍物鏡正對通光孔，雙手調節細準焦螺旋使物像更清晰.如果光線較暗可以調節光圈或反光鏡，使視野變明亮.6.收鏡.取下裝片，轉動轉換器使物鏡偏離通光孔，雙手轉動粗準焦螺旋使鏡筒降到最低，轉動遮光器用最小光圈正對通光孔，轉動反光鏡使

3、鏡面向左右兩側.右手握鏡臂，左手托鏡座，將顯微鏡放回原處.l 注意事項1.必須先用低倍物鏡找到物像在換用高倍物鏡.2.換上高倍物鏡后，必須使用細準焦螺旋（防止壓壞裝片或找不到物像）.3.光線強時，使用平面鏡和小光圈；光線弱時，使用凹面鏡和大光圈.4.由于顯微鏡成倒像，在觀察時若物像不在視野中央，視野中物像偏向哪個方向，就向哪個方向移動裝片.l 相關知識1.目鏡、物鏡的長短和放大倍數之間的關系（1）目鏡越長，放大倍數越小，反之則越大（2）物鏡越長，放大倍數越大，反之則越小2.顯微鏡的放大倍數（1）一行（列）細胞數量變化可根數放大倍數n與視野范圍m成反比來計算（m/n）.如目鏡為5×,物

4、鏡為4×,視野中中央有一排細胞共12個,若把物鏡換成10×,則細胞數目變為6個. （2）圓形視野范圍內，細胞數量變化可根據視野范圍放大倍數的平方成反比計算 （m/n2）. 目鏡為5×,物鏡為4×,視野中共有細胞64個, 若把物鏡換成10×,則細胞數目變為16個.3.污物位置的判斷（目鏡，物鏡，或裝片上） 污物移動在裝片上移動裝片 污物移動在目鏡上 污物不動轉動目鏡 污物不動在物鏡上4.低倍物鏡與高倍物鏡觀察的比較低倍鏡時高倍鏡時鏡頭與裝片的距離遠近所看到的細胞數目多少所看到的細胞大小小大視野的明暗明暗視野的廣度寬廣狹窄二、檢測生物組織中的糖類、

5、脂肪和蛋白質l 目的要求及原理1.目的：檢測生物組織中的糖類,脂肪,蛋白質的存在.2.原理：糖類,脂肪,蛋白質遇特定溶液變色：糖類中的還原糖（如葡萄糖，果糖，麥芽糖等）與斐林試劑發生反應，產生磚紅色沉淀；脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色（或被蘇丹染液染成紅色）；淀粉遇碘變藍色；蛋白質與雙縮脲反應變紫色。l 材料用具1.實驗材料：蘋果或梨勻漿（白色或接近白色的組織），馬鈴薯勻漿，花生種子，花生種子勻漿，豆漿，鮮肝研磨液2.用具：雙面刀片，試管，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒，滴管，酒精燈，三腳架，石棉網，火柴，載玻片，蓋玻片，顯微鏡，毛筆，吸水紙3.試劑；斐林試劑（甲液：質量濃度為0.1g/mL的

6、NaOH溶液，乙液：質量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液），蘇丹或蘇丹染液，雙縮脲試劑（A液：質量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液，B液：質量濃度為0.01g/mL的CuSO4溶液），體積分數為50%的酒精溶液，碘液，蒸餾水l 方法步驟² 實驗一 還原糖的檢測和觀察（1）向試管內注入2mL待測組織樣液.（取勻漿）（2）向試管內注入1mL斐林試劑（甲乙液等量混合均勻后再注入）（3）將試管放在盛有50-65溫水的大燒杯中加熱約2min（4）待一段時間后觀察其現象（試管中溶液形成磚紅色沉淀）² 實驗二 脂肪的檢測與觀察方法一（1）向試管內注入2mL待測組織樣液.（2）向試

7、管內滴加3滴蘇丹溶液.（3）待一段時間后觀察其現象.（試管中溶液被染成橘黃色）方法二（制作臨時切片）（1）取材 取一粒浸泡過的花生種子，去掉種皮（2）切片 用刀片在花生橫斷面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培養皿中待用（3）制片 從培養皿中選取最薄的切片，用毛筆蘸取放在載玻片中央；在花生子葉薄片上滴2-3滴蘇丹染液，染色3min（蘇丹染色1min）；用吸水紙吸去染液，再滴加體積分數為50%的酒精溶液，洗去浮色；用吸水紙吸去花生子葉周圍的酒精，滴一滴蒸餾水，蓋上蓋玻片,制成臨時裝片（4）觀察 可觀察到橘黃色的脂肪顆粒² 實驗三 蛋白質的檢測和觀察（1）向試管內注入2mL待測組織樣液.

8、（2）向試管內注入雙縮脲試劑A液1mL，搖勻.（提供堿性環境）（3）向試管內注入雙縮脲試劑B液4滴，搖勻.（顯色）（4）待一段時間后觀察其現象（試管中產生紫色反應肽鍵顯色）² 實驗四 淀粉的檢測和觀察（1）向試管中注入2mL待測組織樣液（2）向試管中滴加2滴碘液（3）待一段時間后觀察現象（溶液變藍）三、觀察DNA和RNA在細胞中的分布l 目的要求初步掌握觀察DNA和RNA在細胞中分布的方法。原理：甲基綠使DNA呈現綠色；吡羅紅使RNA呈現紅色l 材料用具人的口腔上皮細胞也可以用其他動物或植物細胞（植物細胞不宜選用綠色植物的葉肉細胞）代替。大燒杯，小燒杯，溫度計，滴管，消毒牙簽，載玻片

9、，蓋玻片，鐵架臺，石棉網，火柴，酒精燈，吸水紙，顯微鏡。質量分數為0.9%的NaCl溶液，質量分數為8%的鹽酸，吡羅紅甲基綠染色劑（現用現配），蒸餾水。l 方法步驟一、取口腔上皮細胞制片 1.在潔凈的載玻片上，滴一滴質量分數為0.9%的NaCl溶液（生理鹽水）。 2.用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內壁上側輕輕刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一段，放在上述載玻片上的液滴中涂抹幾下。 3.點燃酒精燈，將涂有口腔上皮細胞的載玻片烘干。二、水解 1.在小燒杯中加入30mL質量分數為8%的鹽酸，將烘干的載玻片放入小燒杯中。 2.在大燒杯中加入30溫水。 3.將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放在大燒杯中保溫5min。三、

10、沖洗涂片 用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s。四、染色 1.用吸水紙吸去載玻片的水分。 2.將吡羅紅甲基綠染色劑各滴2滴在載玻片上，染色5min。 3.吸去多余染色劑，蓋上蓋玻片。五、觀察 1.用低倍顯微鏡觀察：選擇染色均勻、色澤淺的區域移至視野中央，將物象調節清晰。 2.換用高倍顯微鏡觀察：細胞核染為綠色（DNA），細胞質染為紅色（RNA）l 注意事項1.滴生理鹽水：保持細胞滲透壓（生理活性）2.烘干載玻片：固定標本3.質量分數為8%的鹽酸：改變細胞通透性，加速染色劑進入細胞內部，使染色體的DNA與蛋白質分離（破壞細胞結構）4.保溫5min：使受熱均勻，便于觀察5.水解：固定并殺死細胞，以防止

11、細胞死亡時溶酶體對核酸的破壞6.沖洗涂片：沖稀鹽酸四、體驗制備細胞膜的方法l 目的要求體驗哺乳動物紅細胞制備的方法和過程l 材料用具哺乳動物的新鮮紅細胞稀釋液（血液加生理鹽水）。蒸餾水，滴管，吸水紙，載玻片，蓋玻片，顯微鏡。l 方法步驟1.用滴管吸取少量紅細胞稀釋液，滴一小滴在載玻片上，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片。2.在高倍顯微鏡下觀察，待觀察清晰時，在蓋玻片的一側滴一滴蒸餾水，同時在另一側用吸水紙小心吸引（不要吸走細胞）。3.觀察現象：紅細胞凹陷消失，細胞體積增大，細胞破裂，內容物流出。l 注意事項1.哺乳動物紅細胞：無細胞核及其他細胞器（卵生動物紅細胞有細胞核），可以得到純凈的細胞膜；數量大

12、且材料易得。2.稀釋液中加生理鹽水：使紅細胞分開，不易凝結成塊；使紅細胞暫時維持原始形態。五、用高倍顯微鏡觀察葉綠體及線粒體l 目的要求使用高倍顯微鏡觀察葉綠體、線粒體的形態和分布。葉綠體形態：呈綠色，扁平的橢球形或球形線粒體形態；短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形l 材料用具新鮮的蘚類的葉（或菠菜葉、黑藻葉等）（單層細胞）新配制的質量分數為1%的健那綠染液（染線粒體）顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，消毒牙簽l 方法步驟一、觀察葉綠體 1.制作蘚類葉片臨時裝片 在潔凈的載玻片中央滴一滴清水。用鑷子取一片蘚類的小葉，或者取菠菜葉少帶些葉肉的下表皮（葉綠體形態大），放入水滴中，蓋上蓋玻片。（要隨時保

13、持有水的狀態） 2.觀察葉綠體 二、觀察線粒體 1.制作人的口腔上皮細胞臨時裝片 在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液。用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內壁上側輕輕刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一段，放在上述載玻片上的液滴中涂抹幾下，蓋上蓋玻片。 2.觀察線粒體 （線粒體被染成藍綠色，細胞質接近無色）l 注意事項1.選取藻類葉片：葉片薄，葉綠體少而大；選取菠菜葉片下表皮：易撕取，易觀察。2.保持蘚類葉片臨時裝片的水分：防止葉綠體失水而導致葉綠體縮成一團，無法觀察其形態分布。3.觀察線粒體應選用無色的細胞。六、過氧化氫在不同條件下的分解l 目的要求比較過氧化氫不同條件下分解的快慢，了解過氧化氫酶的作用和意義

14、，驗證酶的高效性。l 材料用具新鮮的質量分數為20%的肝臟研磨液量筒，試管，試管架，衛生香，火柴，酒精燈，試管夾，大燒杯，三腳架，石棉網，溫度計新配制的體積番數為3%的過氧化氫溶液，質量分數為3.5%的FeCl3溶液l 方法步驟1.取4支潔凈的試管，分別編上序號1、2、3、4，向各試管分別加入2mL 3%的過氧化氫溶液，按序號依次放置在試管架上。2.將2號試管放在90左右的水域中加熱，觀察氣泡冒出情況，并與1號試管比較。3.向3號試管內滴入2滴3.5%的FeCl3溶液，向4號試管內滴入2滴20%的肝臟研磨液，仔細觀察兩支試管冒出氣泡的情況。4.2-3min后，將點燃的衛生香分別放入3號和4號試

15、管內頁面的上方，觀察比較兩支試管中衛生香的燃燒情況。實驗結果：2.2號試管中氣泡冒的快 3.4號試管中氣泡更多 4.4號試管中衛生香燃燒更劇烈試管編號第一步第二步觀察現象點燃衛生香檢測結果分析1每支試管中分別加入2mL 3%的過氧化氫溶液無氣泡無變化沒有氧氣生成290水浴加熱很少氣泡微亮生成微量氧氣3滴加3.5%的FeCl3溶液2滴較多氣泡發亮生成少量氧氣4滴加20%的肝臟研磨液2滴很多氣泡復燃生成大量氧氣實驗結論：與無機催化劑相比，酶的催化效率要高得多。l 注意事項1.要使用新鮮的肝臟：新鮮的肝臟中過氧化氫酶的含量多，且活性較高。（原理同使用新制的H2O2溶液）2.將肝臟研磨成液：增大接粗面

16、積。3.試管中插入帶火星的衛生香時，不能與氣泡直接接觸，以免衛生香因潮濕而熄滅。七、綠葉中色素的提取和分離l 目的要求1.進行綠葉中色素的提取和分離。2.探究綠葉中含有幾種色素。原理：綠葉中不止一種色素，且這些色素能溶解在有機溶劑無水乙醇中。但它們在層析液中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散的更快；反之則慢。l 材料用具新鮮的綠葉（如菠菜的綠葉）干燥的定性濾紙，試管，棉塞，試管架，研缽，玻璃漏斗，尼龍布，毛細吸管，剪刀，藥勺，量筒（10mL），天平無水乙醇，層析液，二氧化硅，碳酸鈣l 方法步驟1.提取綠葉中的色素（1）稱取5g綠葉，剪碎，放入研缽中。（2）向研缽中放入少許二氧化硅和碳

17、酸鈣，再加入10mL無水乙醇，進行迅速、充分的研磨。（3）將研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一塊單層尼龍布）中進行過濾。將濾液收集到試管中，及使用棉塞將試管口塞嚴1。2.制備濾紙條將干燥定性濾紙剪成略小于試管長和直徑的濾紙條將濾紙條的一端剪去兩角，并在距這一段1cm處用鉛筆劃一條細的橫線。3.畫濾液細線用毛細吸管取少量濾液，沿鉛筆線均勻的畫出一條細線。待濾液干后，再畫一兩次。4.分離綠葉中的色素將適量層析液倒入試管中，將濾紙條（有細線的一端朝下）輕輕插入層析液中，隨后用棉塞塞緊試管口2。5.觀察與記錄色素種類顏色含量溶解度含量胡蘿卜素橙黃色最少最高最快葉黃素黃色較少較高較快葉綠素a藍綠色最多

18、較低較慢葉綠素b黃綠色較多最低最慢幾種材料的作用：1.二氧化硅：有助于研磨充分。 碳酸鈣：防止研磨中色素被破壞。2.單層尼龍布：吸附色素。3.層析液：分離色素4.用棉塞塞緊試管口：1防止乙醇揮發 2防止吸入有毒氣體5.剪去兩角：減少邊緣效應，使色素在濾紙上擴散得更均勻l 注意事項1.要選用新鮮、顏色深綠的葉片，保證色素含量。2.研磨要充分、迅速，減少無水乙醇的揮發。3.濾液細線要細、直、均勻，并含有較多色素。4.向層析液中插入濾紙條時，不能讓濾液細線觸及層析液，否則色素會溶解到層析液中，從而得不到清晰的色素帶。5.若提取到的色素溶液為淡綠色：（1）研磨不充分，色素未能提取出來（2）無水乙醇的加

19、入量太多，稀釋了色素提取液（3）未加入碳酸鈣，葉綠素分子被破壞八、觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂l 目的要求1.制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片。2.觀察植物細胞有絲分裂的過程，識別有絲分裂的不同時期，比較細胞周期不同時期的時間長短。3.繪制植物細胞有絲分裂簡圖。l 材料用具洋蔥（可用蔥，蒜代替）顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，剪子，鑷子，滴管質量分數為15%的鹽酸溶液，體積分數為95%的酒精溶液，質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液，洋蔥根尖細胞有絲分裂固定裝片l 方法步驟一、洋蔥根尖的培養實驗前3-4d，取洋蔥一個，放在廣口瓶上。瓶內裝滿清水，讓洋蔥的底部接觸到瓶內的水面。把這個裝置放在問你安的地方培養。待根長約5cm時，取生長健壯的根尖制成臨時裝片觀察。二、