1、不同蒸制時間制首烏對亞急性衰老大鼠抗衰老作用的影響                 作者：陳正愛，李貴鈴，尹大維 【摘要】  目的探討不同蒸制時間黑豆汁制首烏對亞急性衰老大鼠抗衰老作用及機制，從而尋找何首烏對抗衰老作用的最佳蒸制時間。方法Wistar系大鼠隨機分正常組、模型組（D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1）、人參皂苷組（100 mg?kg-1， D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1）、生首烏組（4.5 g?kg

2、-1，D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1）、黑豆汁制首烏（以下簡稱黑豆汁制）0，2，4，6，8，10 h組（各組給予制首烏4.5 g?kg-1?d-1， D?舶肴樘?50 mg?kg-1?d-1），連續42 d。末次給藥后，同時取血、腦、肝，測定超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。結果注射D?舶肴樘嗆螅?不同蒸制時間黑豆汁制首烏與模型組相比，均不同程度地提高血清及組織中SOD活性，降低血清及組織中MDA含量。結論 黑豆汁制首烏均可延緩D?舶肴樘撬?致的大鼠衰老，其中以黑豆汁制10 h為抗衰老最佳作用時間。論文論文參考網 【關鍵詞】  制首烏；蒸制時間； 抗衰老A

3、bstract：ObjectiveTo investigate the anti?senile effect of  Polygonum miltiflorum Thunb. of different steamed times in subacute senile rats.MethodsWistar rats were randomly divided into ten groups: normal group，model group (D?galactose，50 mg?kg-1?d-1), ginsenoside group (100 mg?kg-1?d-1D?galacto

4、se, 50 mg?kg-1?d-1)， Polygonum miltiflorum Thunb. by steamed without adjuvant group and 0，2，4，6， 8，10 h of Polygonum miltiflorum Thunb. by steamed with bean groups, contineously 42 days, after the last time, SOD activity and MDA content in serum, liver or brain were assayed. ResultsThe activity of S

5、OD were reduced by Polygonum miltiflorum Thunb. of different steamed time with bean groups compared with model group,at the meantime,the contents of  MDA decreased. ConclusionPolygonum miltiflorum Thunb. of different steamed times has a obvious anti-senile effect. However, 10 h of Polygonum mil

6、tiflorum Thunb. by steamed with bean is the best steamed time.Key words：Polygonum miltiflorum Thunb. with bean；  Steamed times；  Anti?senile    何首烏，又稱首烏、赤首烏、烏肝石等，是蓼科植物何首烏（Polygonum miltiflorum Thunb.）的干燥塊根。根據其炮制方法不同可分為生首烏和制首烏兩種。將原藥洗凈切片或切成塊狀，曬干為生首烏，其味苦、澀、性平；若將生品以黑豆汁拌蒸者或其它炮制法炮

7、制者稱為制首烏，其味苦、甘、澀，性溫。何首烏主要含有蒽醌類、磷脂類和二苯乙烯苷類等化學成分1，2，具有抗衰老、降血脂和抗動脈粥樣硬化、增強免疫功能、抗炎鎮痛等多方面作用,但尚未見不同蒸制時間的黑豆汁制首烏對抗衰老作用的研究報道。本次實驗研究不同蒸制時間的黑豆汁制首烏對抗衰老作用的影響。1  材料1.1  藥品與試劑 實驗所用各何首烏制品（干品）由吉林敖東藥業集團股份有限公司提供；D?舶肴樘竅瞪蝦約煉?廠出品，批號：F20050422；人參（總）皂苷為市售品；SOD、MDA試劑盒購自南京建成生物工程研究所。1.2  動物 Wistar大鼠，雌雄各

8、半，體重為180220 g，由延邊大學醫學部實驗動物科提供。論文論文參考網 2  方法與結果2.1  對亞急性衰老大鼠血清、肝組織、腦組織SOD活性的影響取體重（180220）g  Wistar大鼠100只，雌雄各半，隨機分為8組。正常組、D?舶肴樘悄妥椋?簡稱模型組）、人參皂苷組、生首烏組、黑豆汁制首烏（簡稱黑豆汁制）0，2，4，6，8，10 h組。除正常組外，各組均于頸背部皮下注射D?舶肴樘牽?3，4，劑量為50 mg?kg-1?d-1，制成亞急性衰老模型。人參皂苷組灌胃人參皂苷混懸液100 mg?kg-1?d-1，何首烏各組灌胃各濃縮液4.5 g?kg-1?

9、d-1。連續42 d，每周稱重一次調整注射和灌胃劑量。實驗前禁食不禁水12 h，腹腔注射10%水合氯醛（1 ml/100 g）麻醉下固定，開胸心臟采血，并迅速取出肝臟、腦。分離血清，用SOD試劑盒測定其活性；肝臟、腦組織用冰生理鹽水沖洗后，制成5%勻漿液，離心（3000 r/min）15 min，取上清液，用試劑盒測定SOD活性。對8組數據用SPSS11.0軟件進行單因素方差分析處理，結果見表1。表1  不同蒸制時間黑豆汁制首烏對亞急性衰老大鼠血清、（略）2.2 對亞急性衰老大鼠血清、肝組織、腦組織MDA含量的影響取體重（180220）g  Wistar大鼠100只，雌雄各

10、半，隨機分為8組。設正常組、D-半乳糖模型組（簡稱模型組）、人參皂苷組、生首烏組、黑豆汁制首烏（簡稱黑豆汁制）0，2，4，6，8，10 h組。除正常組外，各組均于頸背部皮下注射D-半乳糖3，4，劑量為50 mg?kg-1?d-1，制成亞急性衰老模型。人參皂苷組灌胃人參皂苷混懸液100 mg?kg-1?d-1，何首烏各組灌胃各濃縮液4.5 g?kg-1?d-1。連續42 d，每周稱重一次調整注射和灌胃劑量。實驗前禁食不禁水12h，腹腔注射10%水合氯醛（1 ml/100 g）麻醉下固定，開胸心臟采血，并迅速取出肝臟、腦。分離血清，用MDA試劑盒測定其含量；肝臟、腦組織用冰生理鹽水沖洗后，制成5%

11、勻漿液，離心（3000 r/min）15 min，取上清液，用試劑盒測定MDA含量。對8組數據用SPSS11.0軟件進行單因素方差分析處理。結果見表2。表2  不同蒸制時間黑豆汁制首烏對亞急性（略）3  討  論    機體的衰老過程是一個隨年齡變化的復雜的生理與病理性過程。自從1956年Denham Harman 提出衰老的自由基學說，在眾多有關衰老的學說中，由于自由基學說的特點在于它與其他學說有直接或間接的關系，受到廣泛的重視并得到眾多實驗的支持。衰老的自由基學說認為，隨著年齡增大的退行性變化，是由自由基的副作用引起的。機體自由基

12、的產生與消失在正常情況下處于動態平衡，衰老時這種平衡消失。過剩的自由基除引起大分子交聯阻礙營養物質的擴散外，還損傷組織。許多報道表明不飽和脂類過氧化作用的特征產物MDA的生成量反應體內細胞受自由基氧化的程度，在衰老過程中起重要的作用。    在一定時間內連續給動物注射D-半乳糖，使機體細胞內半乳糖濃度增高，在醛糖還原酶催化下，還原成半乳糖醇，這種物質不能被細胞進一步代謝而堆積在細胞內，影響正常滲透壓，導致細胞腫脹，功能障礙，代謝紊亂，破壞并消耗機體抗氧化防御系統，使自由基積聚。同時在半乳糖還原成半乳糖醇的過程中又產生O2,這樣使細胞膜受損，而過氧化脂質等增高出現衰

13、老5。SOD是體內重要的抗氧化酶，它的活性下降使自由基產生過量，引起不飽和脂肪酸氧化生成過氧化物，形成脂褐素和使DNA、蛋白質和酶等改變、破壞，從而加速衰老6。SOD活性間接反應機體清除氧自由基的能力。MDA是自由基對不飽和脂肪酸引發的脂質過氧化物的最終產物，MDA水平高低間接反映細胞受自由基攻擊的嚴重程度7。衰老時，脂質過氧化作用增強，MDA產生增多，SOD活性降低。本實驗結果提示， 黑豆汁制首烏各組血清、肝、腦中的MDA含量均低于模型組，提示黑豆汁制首烏抗衰老作用與降低體內脂質過氧化產物MDA含量有關；而黑豆汁制首烏各組血清、肝、腦中的SOD活性均高于模型組，提示黑豆汁制首烏抗衰老作用與提

14、高機體抗氧化能力有關。    總之，何首烏具有抗衰老作用，而且其抗衰老作用是多個因素綜合作用的結果。何首烏作為傳統的延年益壽之佳品，具有廣泛的開發前景，對其不同炮制方法及炮制時間的研究，有利于今后更合理科學地利用并發揮它的藥用價值。 【參考文獻】  1劉惠茹，羅選剛.清蒸豆制何首烏主要成分比較研究J.基層中藥雜志，2000，14（1）：39.2廖海民，胡正海.何首烏的生物學及化學成分研究進展J.中草藥，2005，36（2）：311.3趙 鵬，楊玉英.半乳糖制備亞急性衰老動物模型的可行性J.中國食品衛生雜志，1999，11（1）：52.4徐 智，吳國明，錢桂生，等.大鼠衰老模型的初步建立J.第三軍醫大學學報，2003，25（4）：312.5石根勇，呂中明，陳新霞，等.建立衰老模型的實驗研究J.江蘇預防醫學，2003，14（2）：63.6Tamai KT,Gralla EB,Ellerby LM,et al.Yesst and mammaliam metallothioneins functionally substitute for yeast copper z