1、2022-2-61第九章 動物實驗基本操作技術(shù)本章主要內(nèi)容本章主要內(nèi)容常規(guī)采血方法給藥途徑與方法麻醉方法處死方法2022-2-62第一節(jié) 實驗動物的抓取與固定2022-2-63小鼠固定盒固定2022-2-64大鼠固定盒固定2022-2-65二、豚鼠的抓取固定法2022-2-66三、家兔的抓取固定法2022-2-672022-2-68第二節(jié) 性別鑒定2022-2-69Female Male 2022-2-610第三節(jié) 年齡的大致判斷2022-2-6112022-2-6122022-2-6132022-2-6142022-2-6152022-2-6162022-2-6172022-2-618202

2、2-2-6192022-2-6202022-2-621 三、家兔 家兔的門齒和爪隨年齡增長而增長，是年齡鑒別的重要標(biāo)志。青年兔門齒潔白，短小，排列整齊；老年兔門齒暗黃，厚而長，排列不整齊，有時破損。白色家兔趾小基本呈紅色，尖端呈白色。1歲家兔紅色與白色長度相等；1歲以下，紅多于白；1歲以上，白多于紅。還可根據(jù)趾爪的長度與彎曲度來區(qū)別。青年兔趾爪較短，直平，隱在腳毛中，隨年齡的增長，趾爪露出于腳毛之外，而且爪尖鉤曲。另外，家兔皮薄而緊，眼神明亮，行動活潑的為青年兔；皮厚而松，眼神頹廢，行動遲緩的為老年兔。2022-2-622 五、犬 犬的年齡主要以牙齒的生長情況、磨損程度、外形顏色等情況綜合判定

3、。仔犬在出生后十幾天即開始生出乳齒，2個月以后開始由門齒犬齒臼齒順序逐漸更換為恒齒，8l0個月齒換齊。但犬齒需要1歲半以后才能長堅實。飼養(yǎng)場飼養(yǎng)的品種犬，可以根據(jù)記錄，明確了解年齡，而收購的雜種犬就無法知道確切年齡。實際中，可根據(jù)犬齒更換和磨損情況，估計犬的年齡。 2022-2-6232022-2-624第四節(jié) 妊娠檢查 雌性動物妊娠后會發(fā)生一系列的復(fù)雜變化。為了在配種以后能及時掌握雌性動物是否妊娠、妊娠的時間及胎兒和生殖器官的異常情況，采用臨床和實驗室的方法進(jìn)行檢查，稱為妊娠檢查，又稱妊娠診斷(pregnancy diagnosis)。通過妊娠檢查，可以及時地對雌性動物加強護(hù)理或再次配種，以

4、保護(hù)母體和胎兒的正常發(fā)育，避免胎兒早期死亡和流產(chǎn)及減少繁育時間的損失。妊娠檢查不但要求準(zhǔn)確，且及早確診更為重要。2022-2-6252022-2-626第五節(jié) 分組與編號 動物實驗之前，必須對實驗動物進(jìn)行隨機分組和編號標(biāo)記，這是做好實驗和實驗記錄的前提。 一、隨機分組 （一） 當(dāng)分為二組時 例：設(shè)有雄性Wistar大鼠12只，按體重大小依次編為1，2，3，12號，試用完全隨機的方法，分為甲、乙兩組。 分組方法：假設(shè)所產(chǎn)生的點是隨機數(shù)字表上第21行第31列的78，則從78開始，由上向下抄12個隨機數(shù)字，如下：2022-2-627 動物編號： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

5、隨機數(shù)字：78 38 69 57 91 0 37 45 66 82 65 41 組 別：乙 乙 甲 甲 甲 乙 甲 甲 乙 乙 甲 甲 現(xiàn)在以隨機數(shù)字的奇數(shù)代表甲組，偶數(shù)代表乙組，則編號為3、4、5、7、8、11、12號分入甲組，而1、2、6、9、10號分人乙組。因兩組數(shù)字不等，繼續(xù)用隨機方法將甲組多余的一只調(diào)整給乙組，從上面最后一隨機數(shù)字41，接下去抄一個數(shù)為62，以7除之(因甲組原分配7只)得6，即把原分配在甲組的第6個甲(即11號大鼠)調(diào)入乙組。2022-2-628 如果甲組多兩個，則接下去抄兩個數(shù)。分別以8，7除之，余數(shù)即指要調(diào)入乙組的第幾個甲，余此類推。最后各組的鼠數(shù)就相等了。調(diào)整后

6、各組鼠的編號為： 組別 鼠的編號 甲組 3 4 5 7 8 12 乙組 1 2 6 9 10 112022-2-629 (二)當(dāng)分為三組時 例：設(shè)有雄性的SD大鼠12只，按體重大小依次編為1，2，3，12號，試用完全隨機的方法，分為A、B、C三組。 分組方法：假設(shè)所定的點是隨機數(shù)字表第40行17列的08，則從08開始，自左到右抄12個隨機數(shù)字： 動物編號： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 隨機數(shù)字：08 27 01 50 15 29 39 39 43 79 69 10 除 3 余數(shù)： 2 0 1 2 0 2 0 0 1 1 0 1 組 別： B C A B C B C C

7、 A A C A 調(diào)整組別：B2022-2-6302022-2-631 （三） 當(dāng)每個動物一組時： 例：設(shè)有A，B，C，D，E，F(xiàn)代表的6只家兔，試用完全隨機法將其每只分為一組。 分組方法：從隨機數(shù)字表上用鉛筆任指一點，若為第21行第17列的33，則從33向左抄用6個數(shù)字，然后分別以6，5，4，3，2，l除之。凡除不盡的，即將余數(shù)寫下。除盡的，寫余數(shù)時即將其除數(shù)寫下。如下： 2022-2-632 隨機數(shù)字 33 46 9 52 68 7 除 數(shù) 6 5 4 3 2 1 余 數(shù) 3 1 1 1 2 1 隨機排列 C A B D F E 上列第一個隨機數(shù)字余數(shù)為3，意即將6個字母中列在第三位的字母

8、C寫在該數(shù)下，第二個數(shù)宇的余數(shù)為1，即在剩下的5個字母列在第一位的A寫在該數(shù)字下面，余此類推。2022-2-6332022-2-634 右側(cè)從前至后依次為7、8、9。用黃色表示個位數(shù)，紅色表示十位數(shù)。2022-2-6352022-2-636第六節(jié) 常規(guī)采血方法 一、大、小鼠的采血方法 1頸靜脈或頸動脈采血 2股靜脈或股動脈采血 3心臟采血 4尾部采血 5眼眶采血 6斷頭取血2022-2-637頸靜脈或頸動脈采血尾部采血2022-2-638心臟采血2022-2-639二、豚鼠的采血方法 1耳緣剪口采血 2心臟采血方法同大、小鼠。 3股動脈采血方法同大、小鼠。 4后肢背中足靜脈采血2022-2-6

9、40三、家兔的采血方法 1心臟采血 2耳中央動脈采血 3耳靜脈采血2022-2-641 四、狗、貓的采血方法 1后肢外側(cè)跗外靜脈、內(nèi)側(cè)隱靜脈、前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈采血 2股動脈采血 3. 心臟采血同大、小鼠心臟采血 4耳緣靜脈采血同兔耳緣靜脈采血2022-2-6422022-2-6432022-2-644取少量血2022-2-645取中量血2022-2-646取大量血2022-2-6474. 最大安全采血量與最小致死采血量2022-2-648第七節(jié) 給藥途徑與方法 在動物實驗過程中，應(yīng)根據(jù)不同的實驗?zāi)康摹游锓N類、藥物類型來決定動物的給藥途徑與方法。動物的給藥方法主要分為注射法和投入法兩種，不同

10、方法按給藥途徑又分為很多具體類型。注射法分為：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、腦膜下注射、腦內(nèi)注射、胸腔內(nèi)注射、腰椎內(nèi)注射、靜脈注射、關(guān)節(jié)腔注射和心內(nèi)注射。投入法可分為：鼻腔內(nèi)投入、胃腔內(nèi)投入、腸管內(nèi)投入、氣管內(nèi)投入和經(jīng)口腔投入。以下將各種動物的主要給藥途徑和方法做一介紹。2022-2-6492022-2-650為避免傷及內(nèi)臟，可使動物處于頭低位，使內(nèi)臟移向上腹。若實驗動物為家兔，進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。2022-2-6512022-2-6522022-2-6532022-2-654幾種動物不同給藥途徑的常用注射量（毫升） 2022-2-6552022-2-6562022-2-65

11、72022-2-6582022-2-6592022-2-6602022-2-6612022-2-6622022-2-6632022-2-664第八節(jié) 麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任務(wù)是消除實驗過程中所至的疼痛和不適感覺，保障實驗動物的安全，使動物在實驗中服從操作，確保實驗順利進(jìn)行。 一、常用的麻醉劑 動物實驗中常用的麻醉劑分為三類，即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā) 性 麻 醉 劑 和 中 藥 麻 醉 劑 。2022-2-6652022-2-6662022-2-6672022-2-6682022-2-6692022-2-6702022-2-6712022-2-6722022-2-6732022-2-674第九節(jié) 處死方法 當(dāng)實驗中途停止或結(jié)束時，實驗者應(yīng)站在實驗動物的立場上以人道的原則去處置動物，原則上不給實驗動物任何恐怖和痛苦，