1、4.4.青霉素鈉鉀的吸收度檢查：青霉素鈉鉀的吸收度檢查： 供試液供試液 1.80mg/ml1.80mg/ml， 結(jié)果判別：結(jié)果判別：A280A280不得大于不得大于0.100.10- -8 8I2 24 4I H碘量法碘量法一一1. 原理原理水解產(chǎn)物水解產(chǎn)物 4 42 2 2 22 22 22 2OSNaNaIOSNaI定量過量定量過量剩余剩余ChP四、含量測定四、含量測定水解水解NaOH頭孢菌素族頭孢菌素族青霉素族青霉素族反響分兩步進(jìn)展：反響分兩步進(jìn)展：1. 1. 水解反響水解反響( (按化學(xué)計算量進(jìn)展按化學(xué)計算量進(jìn)展) )2. 2. 氧化氧化- -復(fù)原反響復(fù)原反響( (無固定的量關(guān)無固定的

2、量關(guān)系，受溫度、系，受溫度、PHPH值和時間等要素值和時間等要素影響，應(yīng)嚴(yán)厲控制反響條件并采影響，應(yīng)嚴(yán)厲控制反響條件并采用規(guī)范品平行對照測定用規(guī)范品平行對照測定) )NSCH3CH3COOHOHNRCORCOHHNCOONaCH3CH3SNCOONaI24+ 5H2O+ 2HClNaOHCCH3CH3SO3HCHNH2COOHCHNHCORCOOH2+2NaCl+8HI第一步第一步第二步第二步V樣樣空空V樣樣對照液對照液+緩沖液緩沖液+碘液碘液+回滴回滴+堿堿+酸酸+緩沖液緩沖液+碘液碘液+回滴回滴 V對空對空V對對2. 方法方法供試液供試液+緩沖液緩沖液+碘液碘液+回滴回滴+堿堿+酸酸+緩沖

3、液緩沖液+碘液碘液+回滴回滴 空白實驗空白實驗A、消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾、消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾B、消除樣品中其他耗費碘的雜、消除樣品中其他耗費碘的雜 質(zhì)的干擾質(zhì)的干擾C、消除碘揮發(fā)呵斥的誤差、消除碘揮發(fā)呵斥的誤差 以未經(jīng)水解的樣品作空白測定以未經(jīng)水解的樣品作空白測定空白空白樣品樣品I2Na2S2O3I-I2 采用規(guī)范品平行對照測定采用規(guī)范品平行對照測定A、可消除溫度、可消除溫度、pH、操作、環(huán)、操作、環(huán) 境等條件的影響境等條件的影響B(tài)、使本法測定結(jié)果與微生物檢定、使本法測定結(jié)果與微生物檢定 法一致法一致3. 條件條件1弱酸性弱酸性 pH4.5堿堿 I2 IO3- + I-酸酸 普魯卡因與

4、碘在酸性條件普魯卡因與碘在酸性條件 下會產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀下會產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀2溫度溫度 2426溫度溫度38 未水解的供試品亦耗費碘未水解的供試品亦耗費碘3水解時間水解時間以水解以水解2020分鐘后的耗碘量最大分鐘后的耗碘量最大4反響時間反響時間反響反響2020分鐘后，耗碘量隨時間的分鐘后，耗碘量隨時間的變化較小，可減小含量測定的誤變化較小，可減小含量測定的誤差。差。4. 特點特點1靈敏度高靈敏度高樣品樣品 : 碘碘 = 1 : 82反響條件、實驗操作要求高反響條件、實驗操作要求高V對、對、V對空對空V樣、樣、V樣空樣空1份含量份含量加試劑次序、反響時間、滴定速度一樣加試劑次序、反響時間、滴定速度一樣

5、4I28I-5. 計算計算原料原料%WWVVVV對對照照品品）（）（含含量量樣樣對對對對對對空空樣樣樣樣空空 - - -相當(dāng)于標(biāo)示量%=S0 -SR0 -RCUWU0D平均裝量 100%制劑制劑電位配位滴定法汞量法電位配位滴定法汞量法二二1. 原理原理SHROH- - -青霉素族青霉素族水解水解HgRS2 2）（青霉素族青霉素族ChP 2 2Hg 4 4.pH2. 方法方法 總總樣樣VNOHgHNONaOH2 2 醋酸鹽緩沖液醋酸鹽緩沖液pH4.6滴定滴定水解水解( (降降) )空空醋酸鹽緩沖液醋酸鹽緩沖液V(NO3)2HgpH4.6滴定滴定樣樣品品 以未經(jīng)水解的樣品作空白測定以未經(jīng)水解的樣品

6、作空白測定3、 討論討論1水解必需完全水解必需完全2汞鹽滴定液用汞鹽滴定液用EDTA標(biāo)定標(biāo)定3空白實驗空白實驗 消除已降解產(chǎn)物干擾消除已降解產(chǎn)物干擾4優(yōu)點優(yōu)點 不需規(guī)范品不需規(guī)范品%WFTV%WFTV% - - 空空空空樣樣樣樣含含量量4、 計算計算%FTWVWV% - - ）（含量含量空空空空樣樣樣樣可見可見- -紫外分光光度法紫外分光光度法三三1、 酸水解酸水解-銅鹽法銅鹽法穩(wěn)定劑穩(wěn)定劑nmCupHpHA224 4 2 2青霉烯酸青霉烯酸青霉素族青霉素族水解水解CH2COCONHHCCH3CH3CCOOHCCNHSHCONSOHNCOOHCH3CH3CH24 4pHACu 2 22、 硫醇

7、汞鹽法硫醇汞鹽法1原理原理青霉烯酸硫醇汞鹽青霉烯酸硫醇汞鹽青霉素族青霉素族HgCl2咪唑咪唑nmmax 4 4 2 2 HgClCH3CH3COONaSNHCONCH2NHCOCH3NSOHNCOONaCH3CH3OCCH2NHCOCH32 2HgCl咪唑咪唑nmmax 4 4 2 2 2方法方法對照品法對照品法%WWAA%對對照照品品樣樣標(biāo)標(biāo)標(biāo)標(biāo)樣樣 計算計算標(biāo)標(biāo)樣樣咪咪唑唑硼硼酸酸緩緩沖沖液液標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液供供試試液液AAHgCl- -2pH 93留意留意 側(cè)鏈有側(cè)鏈有-NH2時，需加醋酐先時，需加醋酐先 將其乙?；蟛鸥砂l(fā)生上述將其乙?；蟛鸥砂l(fā)生上述 反響反響NSOHNCOOCH3CH3

8、OCCH2NH2NaNSOHNCOONaCH3CH3OCCH2NHCOCH3 OCHCH2 22 2 pH93、 羥肟酸比色法羥肟酸比色法Fe3+/3H+紅色紅色NaOHHClNOHH2- -b b內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類羥肟酸衍生物羥肟酸衍生物HPLCHPLC法法ChP ChP 內(nèi)標(biāo)法校正因子內(nèi)標(biāo)法校正因子外標(biāo)法外標(biāo)法特點特點 快速、高效、靈敏快速、高效、靈敏 專屬性強、重現(xiàn)性好專屬性強、重現(xiàn)性好 一法多用鑒別、檢查、含測一法多用鑒別、檢查、含測第三節(jié)第三節(jié) 氨基糖苷類抗生素氨基糖苷類抗生素苷苷苷苷元元糖糖縮縮合合 氨氨基基糖糖苷苷苷苷元元氨氨基基糖糖縮縮合合 鏈霉素鏈霉素 雙氫鏈霉素雙氫鏈霉素新霉

9、素新霉素 卡那霉素卡那霉素慶大霉素慶大霉素 巴龍霉素巴龍霉素鏈霉素鏈霉素苷元苷元糖糖鏈霉雙糖胺鏈霉雙糖胺NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3鏈霉胍鏈霉胍鏈霉糖鏈霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3鏈霉胍鏈霉胍鏈霉糖鏈霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺巴龍霉素巴龍霉素D-D-葡萄糖胺葡萄糖胺+ +脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺+D-+D-核糖核糖+ +巴龍霉糖巴龍霉糖巴龍胺巴龍胺苷元苷元巴龍二糖胺巴龍二糖胺 糖糖 D-D-葡萄糖胺葡萄糖胺脫氧

10、鏈霉胺脫氧鏈霉胺D-D-核糖核糖巴龍霉糖巴龍霉糖OOOOHOCH2OHHONH2HOOOHNH2NH2OHOOHR2NH2CH2OH*R1慶大霉素慶大霉素 糖糖 苷元苷元絳紅糖胺絳紅糖胺 + 脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺 + 加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 ROC R1R2HNNH2OOHH2NNH2OOOHNHCH3OHCH3絳紅糖胺絳紅糖胺紫素胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-甲基甲基-3-去氧去氧-4-甲甲基戊糖胺基戊糖胺ROC R1R2HNNH2OOHH2NNH2OOOHNHCH3OHCH3絳紅糖胺絳紅糖胺紫素胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-甲基甲基-3-去氧去氧

11、-4-甲甲基戊糖胺基戊糖胺構(gòu)造與性質(zhì)構(gòu)造與性質(zhì)多與硫酸成鹽多與硫酸成鹽鏈霉素鏈霉素 3個個慶大霉素慶大霉素 5 5個個堿性中心堿性中心堿性堿性一一水溶性水溶性溶解性溶解性二二鏈霉素鏈霉素 pH5 pH57.57.5慶大霉素慶大霉素 pH2 pH212 12 穩(wěn)定穩(wěn)定穩(wěn)定性穩(wěn)定性四四UV三三NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3坂口反響坂口反響N-甲基葡萄甲基葡萄糖胺反響糖胺反響麥芽酚反響麥芽酚反響鑒別鑒別 茚三酮反響茚三酮反響一一藍(lán)藍(lán)紫紫色色慶慶大大霉霉素素鏈鏈霉霉素素茚茚三三酮酮羥基胺構(gòu)造羥基胺構(gòu)造 Molisch 實驗實驗二二氨基

12、糖苷類氨基糖苷類H+ 糠醛糠醛羥甲基糠醛羥甲基糠醛 -萘萘酚酚 蒽酮蒽酮呈色呈色OHOH2CCHOOHOH2CCHOHOHOH紅紫色紅紫色N-N-甲基葡萄糖胺反響甲基葡萄糖胺反響三三甲基葡萄糖胺甲基葡萄糖胺巴龍霉素巴龍霉素鏈霉素鏈霉素水解水解- -N乙酰丙酮乙酰丙酮 OH-吡咯衍生物吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛對二甲氨基苯甲醛H+紅色紅色Elson-Morgan反響反響慶大霉素慶大霉素NHCH3NHNHNH C NH2HOOHOHNHCH2NOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNCH3COCH3HHOCH2CHOH3(縮合縮合)323COCHCOCHCH- -OHHHH3CH3CCHNNC

13、OCH3CH3COCH3CH3N紅色紅色對二甲氨基苯甲醛對二甲氨基苯甲醛H+NCH3COCH3HHOCH2CHOH3 麥芽酚反響麥芽酚反響四四 鏈霉素特征反鏈霉素特征反響響鏈鏈霉霉糖糖鏈鏈霉霉素素- -OH麥麥芽芽酚酚紫紫紅紅色色 3FeH+分子重排分子重排NH C NH2HOOHOHNHCH2NOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHNHNHCH3H2O NaOHOOOHCH3OOCH3Fe3+H+OFe33+/紫紅紫紅麥芽酚麥芽酚橙紅橙紅羥基喹啉羥基喹啉鏈霉胍鏈霉胍鏈霉素鏈霉素次溴酸鈉次溴酸鈉- - -8OH或或-萘酚萘酚NOH8-8-羥基喹啉羥基喹啉坂口反響坂口反響五五-萘酚萘酚OHONBrRNHCO NH六六- -24SO反響反響白白 4 4- -2 24 4 2 2BaSOSOBaH+UV法法七七慶大霉素?zé)o慶大霉素?zé)oUVUV吸收吸收nmmax22 鏈霉素鏈霉素八色譜法八色譜法1 1TLCTLC法：硫酸慶大霉素的鑒別法：硫