1、結核分枝桿菌耐藥檢測技術選擇結核分枝桿菌耐藥檢測技術選擇分子線形探針方法分子線形探針方法 2 結核病患者感染的結核分枝桿菌體外被證實至少對異煙肼/利福平耐藥MDR-TB 耐藥型TB的特殊形式，由于結核分枝桿菌對異煙肼、利福平、任何氟喹諾酮類，以及可注射的抗TB藥物卡那霉素、卷曲霉素、阿米卡星、鏈霉素中的至少1種有耐藥性XDR-TB3耐藥結核分枝桿菌機制耐藥結核分枝桿菌機制基因突變結核分枝桿菌產生耐藥性的主要原因藥物外排泵的影響結核分枝桿菌細胞壁結構的改變4耐藥產生的主要原因耐藥產生的主要原因微生物上，耐藥性是基因突變引起藥物對突變株的效力降低造成的。臨床及管理上，不足夠的或不恰當的治療導致結核

2、病患者體內的耐藥突變株變成優勢株。520122012年年TBTB流行情況流行情況 全球（Global Tuberculosis Report 2013） TB約有860萬 MDR-TB：45萬 3.6%新發結核病，20%復治結核病患者 XDR-TB：約有9.6%MDR-TB 中國（Tuberculosis profile in China, 2013） TB：90萬 MDR-TB：6萬620122012中國中國MDR-TBMDR-TB流行情況流行情況Tuberculosis Profile in China, 2012/sree/Reports?o

3、p=Replet&name=%2FWHO_HQ_Reports%2FG2%2FPROD%2FEXT%2FTBCountryProfile&ISO2=CN&LAN=EN&outtype=pdf7中國耐藥流行情況中國耐藥流行情況 中國，異煙肼耐藥率位居第一。中國，異煙肼耐藥率位居第一。全國第五次結核病流行病學抽樣調查資料匯編8中國耐藥流行情況中國耐藥流行情況中國單耐藥中，單耐異煙肼的患者最多中國單耐藥中，單耐異煙肼的患者最多910中國衛生部中國衛生部1. 2009年，中國衛生部疾病預防控制局和梅里埃基金會在京聯合舉辦了“耐多藥結核病診斷技術研討會” (主要邀請各地疾

4、病預防控制中心)2.2. 分別于分別于20072007年和年和20122012年年與衛生部簽署了結核病防控項目11中蓋項目中蓋項目12耐多藥結核鑒定藥敏分子檢測系統的選擇耐多藥結核鑒定藥敏分子檢測系統的選擇利福平檢測不能替代MDR檢測中國是TB和MDR-TB高負擔國家；異煙肼耐藥率居首耐多藥快速診斷需要同時對異煙肼和利福平進行耐藥檢測WHO 政策聲明政策聲明有充分的總括性證據證明關于在國家特定情況下快速有充分的總括性證據證明關于在國家特定情況下快速篩查篩查MDR-TB使用線性探針方法的建議的合理性。使用線性探針方法的建議的合理性。“14耐多藥結核分枝桿菌快速藥敏檢測耐多藥結核分枝桿菌快速藥敏檢

5、測HAINHAIN GenoTypeGenoType MTBDR MTBDRplusplusGenoType MTBDRplus：一種基于：一種基于DNA STRIP 技術的線性探針方法。技術的線性探針方法。WHO推薦：參比級和地方級選擇線性探針方推薦：參比級和地方級選擇線性探針方法應用于較高級別的專業實驗室。法應用于較高級別的專業實驗室。2021-12-11151617LPA基本原理基本原理 預先標記的擴增產物被固定在硝化纖維試紙條上的DNA探針所捕獲，并使用比色法檢測后，結果以線性條帶形式顯現18耐多藥結核分枝桿菌快速藥敏檢測耐多藥結核分枝桿菌快速藥敏檢測GenoGenoType MTBD

6、R MTBDRplusplus 基于線形探針技術 （2008年WHO認可） 簡便快捷，6小時得到結果 樣本要求: 固體或液體培養物; 臨床痰標本 與傳統藥敏檢測結果相比，符合率較高2021-12-1119GenoType MTBDRplus 檢測結果檢測結果 快速檢測結核分枝桿菌復合群（MTBC） 檢測利福平和/或異煙肼的耐藥性（單耐或MDR） 檢測異質性耐藥20 HAIN 試劑盒試劑盒21GenoType - DNA STRIP 技術技術2021-12-112122 雜交儀（手工雜交儀（手工,12條）條）TwinCubator TwinCubator （可做（可做1212個條）個條）23 雜

7、交儀（全自動雜交儀（全自動,48條）條）24GenoType 系列產品可在同一平臺（基于同一種技術DNASTRIP 技術）完成：6種MTBC和30種NTM鑒定，MDR-TB和XDR-TB藥敏檢測。GenoType MTBDRplus是Genotype系列產品之一，是一種可同時鑒定MTBC和檢測RFP和/或INH耐藥情況的分子遺傳學方法。2021-12-112425 世界衛生組織在南非、印度及俄羅斯這些結核病高發區，對比評估分子線性探針與傳統方法 結果顯示分子線性探針對涂陽標本的靈敏度和特異性高于97%和98%，肯定了快速檢測對控制耐多藥結核傳播的價值。 分子線性探針雖然未能完全取代傳統培養，特

8、別涂陰標本必須做培養，但這種新技術大縮短等候的時間、省略繁瑣的操作流程，并提高了檢測中的生物安全性。26快速檢測方法與傳統方法對比快速檢測方法與傳統方法對比傳統法快速法實驗方法PNB/TCH鑒別比例法/絕對濃度法藥敏實驗GenoType MTBDRplus樣本要求固體培養物固體培養物涂陽標本或培養物（固體/液體）功 能鑒別MTB、M.bovis和NTM一二線藥物耐藥情況同時鑒定MTBC和利福平和/或異煙肼耐藥情況，可確定是否為單耐或MDR時 間4-8周4-8周6小時工作強度較大大，一般8種藥物最多可以完成30個樣本/人/天小，Twincubator是12份樣本規格，全自動GT Blot48是48跟樣品規格結果判讀BSL3/2，肉眼讀取菌落數BSL3/2，肉