1、1享學課堂享學課堂234C/N:一般指元素一般指元素C/N的比值，也指培養基中還原糖的的比值，也指培養基中還原糖的含量與粗蛋白質含量的比值。含量與粗蛋白質含量的比值。不同微生物所需的不同微生物所需的C/N不同：不同： 細菌細菌 5/1、酵母菌、酵母菌 5/1、霉菌霉菌 10/1；C/N小，小，若碳源不足，易引起菌體衰老和自溶；若碳源不足，易引起菌體衰老和自溶； 氮源氮源過多，會使菌體生長過于旺盛，過多，會使菌體生長過于旺盛，pH偏高，不利于代謝偏高，不利于代謝產物的積累。產物的積累。C/N大大 ，若，若碳源過多，則容易形成較低的碳源過多，則容易形成較低的pH；氮源不；氮源不足，則菌體繁殖量少，

2、從而影響產量。足，則菌體繁殖量少，從而影響產量。56培養基是與微生物細胞滲透壓相等的等滲溶液；培養基是與微生物細胞滲透壓相等的等滲溶液；微生物生長環境中水的有效性常以微生物生長環境中水的有效性常以水活度水活度（aw）：同溫同壓下，某溶液的蒸汽壓與純水）：同溫同壓下，某溶液的蒸汽壓與純水蒸汽壓之比。蒸汽壓之比。純水純水aw為為1.00，溶液中溶質越多，溶液中溶質越多， aw越小。越小。 7 幾類微生物生長最適幾類微生物生長最適 w89101112 到綠色金屬閃光。到綠色金屬閃光。13 培養基的配置實驗培養基的配置實驗14實驗目的實驗目的明確培養基的配制原理。每個小組配制200ml的牛肉膏蛋白胨固

3、體培養基通過對牛肉膏蛋白胨培養基的配制，掌握配制培養基的一般方法和步驟。儀器和試劑儀器和試劑燒杯（500ml、50ml）、三角燒瓶（250ml）、量筒、玻璃棒、玻璃漏斗、酒精燈、培養皿、牛皮紙、紗繩、托盤天平、滅菌鍋、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、10%NaOH、10%鹽酸、精密PH試紙、超凈工作臺15實驗步驟實驗步驟1、稱量按培養基配方比例依次準確地稱取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。牛肉膏用玻璃棒挑取，放入小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯。蛋白胨很易吸潮，在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴防藥品混雜。162、熔化在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石

4、棉網上加熱使其溶解。待藥品完全溶解后，補充水分到所需的總體積，得到液體培養基。配制固體培養基，將稱好的瓊脂放入已熔化的藥品中，再加熱熔化，在瓊脂熔化的過程中，需不斷攪拌。最后補充損失的水分，熱水定容至200ml。173、調PH在未調PH前，先用精密PH試紙測量培養基的原始PH值，而后加入10%NaOH或10%鹽酸調節PH達7.27.4。微生物的生長繁殖除需要一定的營養物質外，還要求適當的PH范圍。不同微生物對PH要求不同，霉菌和酵母菌的培養基PH是偏酸性的，而細菌和放線菌的培養基PH為中性或微堿性。所以配制培養基時，要根據不同微生物對象將PH值調到合適的范圍。184、滅菌用漏斗將完全熔化的上述

5、培養基趁熱倒入 250ml的三角燒瓶加塞后，外包兩層牛皮紙（用紗繩以活結形式扎好），置于滅菌鍋中以1.05kg/cm2、121,1530分鐘高壓蒸汽滅菌。同時還須將洗凈、干燥的培養皿套上牛皮紙包扎后一起滅菌。195、分裝待滅菌好的培養基冷卻到50左右，在啟動的超凈工作臺上打開牛皮紙，用酒精燈火焰燒瓶口后，分裝于滅過菌的培養皿中備用。20實驗注意事項實驗注意事項注意PH值不要調過頭，以避免回調，將會影響培養基內各離子的濃度。分裝過程中注意不要使培養基沾在管口或瓶口，以免沾污棉塞而引起污染。分裝時，若培養皿出現冷凝水，需倒置在恒溫箱中干燥，防止雜菌污染。21下表是某微生物培養基成分，請根據表回答： （1）此表培養基可培養的微生物同化作用類型是 自養型 。（2）若除去成分，加入(CH2O)，該培養基可用于培養 自生固氮菌 。（3）表中營養成分共有 3 類。（4）不論何種培養基，在各種成分都溶化后分裝前，要進行的是 調整PH。（5）表中各成分重量確定原則是依據微生物生長需要 。 （6）若表中培養基用于菌種鑒定，應