江蘇省揚州市廣陵區(qū)揚州中學2025年高三三模考試生物試題試卷注意事項1．考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下圖為某哺乳動物處于不同分裂時期細胞中染色體及基因示意圖。下列敘述正確的是（）A．細胞①中有2個染色體組 B．細胞②表明曾發(fā)生過基因突變C．細胞③是第一極體 D．細胞④有兩對同源染色體2．血管緊張素轉換酶2（簡稱ACE2）是一種由805個氨基酸構成的跨膜蛋白，其編碼基因位于X染色體，在心臟、腎臟、肺、消化道等部位的細胞中廣泛表達。新冠病毒的S蛋白與肺部細胞表面的受體-ACE2結合，從而入侵細胞。下列說法正確的是（）A．ACE2的單體是以若干個碳原子構成的碳鏈為基本骨架B．ACE2與S蛋白結合體現(xiàn)了細胞膜的選擇透過性C．ACE2的編碼基因位于X染色體，因此男性體內(nèi)無ACE2D．人類基因組包含ACE2的編碼基因，該基因由2415個脫氧核苷酸聚合而成3．PIN蛋白是生長素進行極性運輸時的輸出載體，其合成過程及位置如圖所示，以下說法不正確的是（）A．PIN基因經(jīng)轉錄、翻譯過程合成PIN蛋白B．PIN蛋白在核糖體上合成后需經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工C．生長素經(jīng)PIN蛋白輸出細胞時不需要消耗ATP并可原路返回D．PIN基因表達異常時，植物可能會失去頂端優(yōu)勢4．某種昆蟲長翅(A)對殘翅(a)、直翅(B)對彎翅(b)、有刺剛毛(D)對無刺剛毛(d)為顯性，控制這三對性狀的基因位于常染色體上。如圖表示某一個體的基因組成，若不考慮交叉互換，以下判斷正確的是A．圖中A與B互為等位基因，A與D互為非等位基因B．該個體的一個初級精母細胞所產(chǎn)生的精細胞基因型有四種C．控制翅長與翅形的兩對等位基因遺傳時遵循自由組合定律D．若該個體與隱性個體測交，后代基因型比例為l：1：1：15．圖表示中心法則，下列敘述錯誤的是（）A．核苷酸序列不同的基因可表達出相同的蛋白質(zhì)B．遺傳信息傳遞到蛋白質(zhì)是表現(xiàn)型實現(xiàn)的基礎C．生物的遺傳信息儲存在DNA或RNA的核苷酸序列中D．編碼蛋白質(zhì)的基因含遺傳信息相同的兩條單鏈6．下列有關厭氧呼吸的敘述，錯誤的是（）A．產(chǎn)生少量ATP B．可產(chǎn)生水C．可釋放二氧化碳 D．在細胞溶膠中進行二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）現(xiàn)有某濕地生態(tài)系統(tǒng)，圖1表示能量流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)某一營養(yǎng)級的變化示意圖，其中a~g表示能量值的多少。請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖1中，若A表示第二營養(yǎng)級所攝入的全部能量，則B表示______，C表示________。若該生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者所固定的太陽能總量為y，則該系統(tǒng)第一營養(yǎng)級和第二營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率是_______（用圖中所給字母的表達式表示）。（2）圖1中有兩處不同的能量散失途徑，其中E處散失的能量是通過______實現(xiàn)的。（3）若該生態(tài)系統(tǒng)存在如圖2所示的食物網(wǎng)。若A能量的1/4直接提供給C，則要使C能量增加8kJ，至少需要消耗A的能量是___kJ。若將C的食物比例由A：B=1：1調(diào)整為1：2，能量傳遞效率按10%計算，該生態(tài)系統(tǒng)能承載C的數(shù)量約是原來的________倍（精確到百分位）。8．（10分）谷氨酸是一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，但是過量堆積在神經(jīng)元之間又會成為神經(jīng)毒素，引起神經(jīng)元的損傷、衰老及死亡。請回答下列問題：（1）興奮傳來時，突觸前神經(jīng)元會釋放谷氨酸，谷氨酸經(jīng)擴散通過突觸間隙，與突觸后膜的受體結合，使突觸后膜電位變?yōu)開___________（填內(nèi)正外負、內(nèi)負外正）。上述過程體現(xiàn)細胞膜的功能有__________________________________________________（請答出兩點）。（2）當突觸間隙中谷氨酸積累過多時，持續(xù)作用會導致______________過度內(nèi)流，使突觸后神經(jīng)元因滲透壓__________________而膨脹損傷甚至漲破。（3）研究發(fā)現(xiàn)，雌性激素等甾體類激素可以防護某些神經(jīng)毒素的毒性，從而發(fā)揮對神經(jīng)元的保護作用。雌性激素的化學本質(zhì)屬于脂質(zhì)中的___________________，它在人體中可以通過_______________運輸來發(fā)揮保護神經(jīng)元的作用。9．（10分）胚胎干細胞的分離、培養(yǎng)體系的研究是當前生命科學的熱門課題之一。下圖表示分離小鼠胚胎干細胞的簡要過程，請回答下列問題。（1）從妊娠3?5天的雌鼠輸卵管中沖出胚胎的實驗操作，叫做_________。此時期，之所以能沖出胚胎，是因為早期胚胎是_________。（2）上圖所示的胚胎是_________，分離的胚胎干細胞來源于結構_________（填“①”或“②”）。分離胚胎干細胞群后應用_________處理，以分散細胞。（3）圖中加入的細胞A是_________，加入的藥劑B是_________。（4）胚胎干細胞應用廣泛，因為其具有_________，即能分化成成體動物的各種組織細胞。10．（10分）回答下列（一）、（二）小題：（一）開發(fā)山楂果醋恰好讓山楂中的有機酸豐富了果醋的酸味，同時也彌補生食山楂酸味大的缺陷，具體釀制山楂果醋分為以下三個階段，請將具體過程補充完整。（1）制備山楂果原汁：選成熟的山楂果，在清水沖洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。將山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵：由于山楂果原汁_______，故發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以獲得酒精含量較高的果酒。果汁中加入活化的________后，在適宜環(huán)境下發(fā)酵一段時間，當發(fā)酵液中停止_______，發(fā)酵完畢待過濾，或發(fā)酵至_______，上清液即為果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸發(fā)酵：將醋化醋桿菌進行擴大培養(yǎng)后，經(jīng)檢查菌體生長正常并無雜菌污染后接種于山楂酒-水中進行發(fā)酵，整個發(fā)酵過程需要通入_______。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，其目的是調(diào)味和_______，以防止果醋被發(fā)酵分解。（二）下圖為轉基因抗蟲煙草的培育流程，①②③④表示過程，其中②表示利用農(nóng)桿菌轉入受體細胞。回答下列相關問題：（1）在①過程構建重組質(zhì)粒時，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使兩者形成粘性末端用于拼接，這種方法的明顯缺點是目的基因和質(zhì)粒________（答出2點即可）。另外，影響拼接效率的主要因素，除以上缺點和鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素外，還有_______（答出2點即可）。（2）在②過程中，將圖示重組Ti質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌時可用______處理農(nóng)桿菌，以提高轉化效率。操作之后，需要特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進行篩選，其原因是_______，最終篩選到的對象在相應選擇培養(yǎng)基上的存活情況是________。（3）在③過程常通過調(diào)節(jié)_______的適當配比，從愈傷組織誘導出芽和根的_____，并由此再生出新植株。獲得轉基因煙草后，再通過[④]_______過程實現(xiàn)多個世代組織培養(yǎng)。11．（15分）如圖是江蘇某農(nóng)村因地制宜建設的生態(tài)農(nóng)業(yè)園示意圖，請分析回答：（1）該生態(tài)農(nóng)業(yè)園建設主要依據(jù)的生態(tài)工程原理有____________（至少2個）。（2）池塘養(yǎng)魚時，通常采用多魚種混合放養(yǎng)模式（上層為食浮游生物的鳙魚，中層為食草的草魚，下層為雜食性的鯽魚等）。從群落結構分析，這種養(yǎng)殖模式的優(yōu)點是____________。（3）防治果樹蟲害時，常利用性引誘劑來誘捕害蟲或干擾其交配，從而降低害蟲的種群密度。這屬于生態(tài)系統(tǒng)中的________（信息類型）傳遞在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應用。（4）流入該生態(tài)農(nóng)業(yè)園的總能量有_______________和____________的能量。該生態(tài)農(nóng)業(yè)園增加了“蠅蛆養(yǎng)殖、食用菌種植”等項目，其意義是____________。（5）根據(jù)圖示，用箭頭表示生態(tài)系統(tǒng)的三種生物成分之間的能量流動關系___________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：①細胞中含有同源染色體，且著絲點分裂，處于有絲分裂后期；②染色體發(fā)生了復制，但沒有出現(xiàn)聯(lián)會現(xiàn)象，處于有絲分裂前期；③細胞中不含同源染色體，處于減數(shù)第二次分裂前期；④細胞中不含同源染色體，且著絲點已分裂，處于減數(shù)第二次分裂后期。【詳解】A、細胞①中含有同源染色體，且著絲點分裂，處于有絲分裂后期，有四對同源染色體，四個染色體組，A錯誤；B、細胞②一條染色體的姐妹染色單體上有A、a基因，而其同源染色體上只有a基因，表明曾發(fā)生過基因突變，B正確；C、根據(jù)細胞④的細胞質(zhì)不均等分裂，該動物為雌性，而細胞③處于減數(shù)第二次分裂前期，所以細胞③是次級卵母細胞或極體，C錯誤；D、細胞④中不含同源染色體，D錯誤。故選B。2、A【解析】

蛋白質(zhì)、多糖和核酸等生物大分子的單體是以若干個碳原子構成的碳鏈為基本骨架；細胞膜有三大功能，將細胞與外界隔開、控制物質(zhì)進出細胞、進行細胞間的信息交流；氨基酸數(shù)∶mRNA核苷酸數(shù)∶基因中脫氧核苷酸數(shù)=1∶3∶6。【詳解】A、ACE2的單體是氨基酸，氨基酸等分子是以碳鏈為基本骨架的，A正確；B、ACE2與S蛋白結合體現(xiàn)了細胞膜信息傳遞的功能，B錯誤；C、ACE2的編碼基因位于X染色體，男性也有X染色體，在其體內(nèi)心臟、腎臟、肺部、消化道等部位的細胞也會選擇性表達產(chǎn)生ACE2，C錯誤；D、ACE2是一種由805個氨基酸構成的跨膜蛋白，故ACE2的編碼基因由至少805×3×2=4830個脫氧核苷酸聚合而成的，D錯誤。故選A。3、C【解析】

1、生長素的運輸方向有三種：極性運輸、非極性運輸和橫向運輸。其中極性運輸是一種主動運輸。2、頂端優(yōu)勢是頂芽優(yōu)先生長而側芽受到抑制的現(xiàn)象。原因是頂芽產(chǎn)生的生長素向下運輸，使近頂端的側芽部位生長素濃度較高，從而抑制了該部位側芽的生長。【詳解】A、PIN基因經(jīng)轉錄、翻譯過程合成PIN蛋白，A正確；B、由圖分析可知，PIN蛋白在核糖體上合成后需經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工，B正確；C、生長素經(jīng)PIN蛋白輸出細胞屬于主動運輸，需要消耗ATP，C錯誤；D、PIN基因表達異常時，會影響生長素的極性運輸，而植物的頂端優(yōu)勢與生長素的極性運輸有關，D正確。故選C。4、D【解析】

依題文可知，等位基因是指同源染色體同一位置控制相對性狀的一對基因，一對等位基因減數(shù)分裂時遵循基因分離定律，以此相關知識做出判斷。【詳解】A、圖中A與B沒有在同源染色體的同一位置，不屬于等位基因，A錯誤；B、由于是該個體的一個初級精母細胞所產(chǎn)生的精細胞，所以精細胞有4個，其基因型有二種，B錯誤；C、控制翅長與翅形的兩對等位基因在一對同源染色體上，所以其遺傳時遵循分離定律，C錯誤；D、若該個體與隱性個體測交，由于該個體產(chǎn)生4種比例相等的配子，所以后代基因型比例為l：1：1：1，D正確。故選D。5、D【解析】

中心法則：（1）遺傳信息可以從DNA流向DNA，即DNA的復制；（2）遺傳信息可以從DNA流向RNA，進而流向蛋白質(zhì)，即遺傳信息的轉錄和翻譯。后來中心法則又補充了遺傳信息從RNA流向RNA以及從RNA流向DNA兩條途徑。【詳解】A、由于密碼子具有簡并性，因此核苷酸序列不同的基因可表達出相同的蛋白質(zhì)，A正確；B、蛋白質(zhì)是生命活動的主要承擔者，因此遺傳信息傳遞到蛋白質(zhì)是表現(xiàn)型實現(xiàn)的基礎，B正確；C、生物的遺傳物質(zhì)是DNA或RNA，因此生物的遺傳信息儲存在DNA或RNA的核苷酸序列中，C正確；D、編碼蛋白質(zhì)的基因含兩條單鏈，但其堿基序列互補，因而遺傳信息不同，D錯誤。故選D。6、B【解析】

厭氧呼吸是在無氧的條件下發(fā)生的，在細胞溶膠中進行，厭氧呼吸的過程可以劃分為兩個階段：第一階段與需氧呼吸的第一階段一樣，進行糖酵解；第二階段中，丙酮酸在不同酶的催化作用下，形成乳酸或乙醇和CO2。【詳解】A、厭氧呼吸是不徹底的氧化分解，產(chǎn)生少量的ATP，A正確；B、厭氧呼吸過程中，葡萄糖只能分解形成乳酸或酒精和二氧化碳，不產(chǎn)生水，B錯誤；C、厭氧呼吸過程中，葡萄糖能分解形成酒精和二氧化碳，C正確；D、厭氧呼吸在細胞溶膠中進行，D正確。故選B。本題考查細胞呼吸相關知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度。二、綜合題：本大題共4小題7、第二營養(yǎng)級所同化固定的能量第二營養(yǎng)級用于生長、發(fā)育和繁殖的能量b/y×111%分解者的分解（或呼吸）作用1111．79【解析】

圖1表示能量流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)某一營養(yǎng)級的變化示意圖，其中a~g表示能量值的多少，A表示該營養(yǎng)級所攝入的全部能量，則B表示其同化量，能量值可用b(或d+e)表示；D表示其呼吸量，C表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量，E表示糞便量，F(xiàn)為流向下一營養(yǎng)級的量。【詳解】（1）圖1中，若A表示第二營養(yǎng)級所攝入的全部能量，則B表示第二營養(yǎng)級所同化的能量，C表示第二營養(yǎng)級用于生長、發(fā)育和繁殖的能量。若該生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者所固定的太陽能總量為y，則該系統(tǒng)第一營養(yǎng)級和第二營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率=第二營養(yǎng)級同化的能量/第一營養(yǎng)級固定的能量=b/y×111%。（2）圖1中有兩處不同的能量散失途徑，其中D是通過呼吸作用以熱能的形式散失，E是糞便量，糞便中的能量是通過分解者的分解（或呼吸）作用散失。（3）若該生態(tài)系統(tǒng)存在如圖2所示的食物網(wǎng)，食物鏈有2條：A→C、A→B→C。若A能量的1/4直接提供給C，假設至少需要消耗A的能量為y，其中有y/4的能量直接提供給C，有3y/4的能量間接提供給C；要使消耗A最少則用21%的能量傳遞率，即y/4×21%+3y/4×21%×21%=8，則計算可得y=111kJ，故至少需要消耗A的能量是111kJ。若將C的食物比例由A：B=1：1調(diào)整為1：2，能量傳遞效率為11%，解題時應該從C出發(fā)，設當食物由A：B為1：1時，C的能量為x，需要的A為x/2÷11%+x/2÷11%÷11%=55x；設當食物由A：B為1：2時，C的能量為y，需要的A的量為y/3÷11%+2y/3÷11%÷11%=71y，由于A固定的能量不變，即55x=71y，因此y/x=1．79，即該生態(tài)系統(tǒng)能承載C的數(shù)量約是原來的1.79倍。本題考查生態(tài)系統(tǒng)中能量流動，要求學生能根據(jù)能量流動的傳遞過程進行計算，尤其是第（3）小題相對較難，注重學生的分析能力和計算能力的培養(yǎng)。8、內(nèi)正外負控制物質(zhì)進出細胞、進行細胞間的交流鈉離子升高固醇體液【解析】

興奮在神經(jīng)元之間需要通過突觸結構進行傳遞，突觸包括突觸前膜、突觸間隙、突觸后膜，其具體的傳遞過程為：興奮以電流的形式傳導到軸突末梢時，突觸小泡釋放遞質(zhì)（化學信號），遞質(zhì)作用于突觸后膜，引起突觸后膜產(chǎn)生膜電位（電信號），從而將興奮傳遞到下一個神經(jīng)元。根據(jù)題干信息分析可知，谷氨酸是一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，可以使得突觸后神經(jīng)元興奮，但是過量堆積在神經(jīng)元之間又會成為神經(jīng)毒素，引起神經(jīng)元的損傷、衰老及死亡。【詳解】（1）當谷氨酸與突觸后膜上的受體結合后使突觸后神經(jīng)元的膜電位由靜息電位變成動作電位，即膜內(nèi)外電位由外正內(nèi)負變成外負內(nèi)正；該過程涉及到了鈉離子內(nèi)流，因此體現(xiàn)了細胞膜具有控制物質(zhì)進出細胞和進行細胞間信息交流的作用。（2）當谷氨酸在突觸間隙中過度積累時，會不斷作用于突觸后膜上的受體，導致鈉離子過度內(nèi)流，導致突觸后神經(jīng)元的細胞內(nèi)滲透壓升高，進而導致突觸后神經(jīng)元吸水膨脹損傷甚至漲破。（3）脂質(zhì)包括脂肪、磷脂和固醇，雌性激素屬于脂質(zhì)中的固醇；雌性激素是一種人體激素，在人體中可以通過體液運輸來發(fā)揮保護神經(jīng)元的作用。解答本題的關鍵是掌握興奮在神經(jīng)元之間傳遞的相關知識點，了解突觸的結構以及興奮傳遞的機理，并能夠根據(jù)題干信息和提示分析谷氨酸過度積累導致神經(jīng)元的損傷、衰老及死亡的原因。9、沖卵游離的囊胚②胰蛋白酶（膠原蛋白酶）飼養(yǎng)層細胞牛磺酸（丁酰環(huán)腺苷酸）發(fā)育的全能性【解析】

1、干細胞分為全能干細胞（如胚胎干細胞）、多能干細胞（如造血干細胞）和專能干細胞。其中全能干細胞的全能性最高，可被誘導分化為多種細胞和組織；其次是多能干細胞，如造血干細胞可以分化形成各種細胞；最后是專能干細胞。細胞具有全能性，原因是細胞中含有該生物全套的遺傳物質(zhì)。2、胚胎干細胞的主要用途是：（1）可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；（2）是在體外條件下研究細胞分化的理想材料。ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質(zhì)時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段；（3）可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各種組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。3、胚胎發(fā)育過程：（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂，數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎；（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔；（4）原腸胚：內(nèi)細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。【詳解】（1）沖卵是指將供體雌性輸卵管或者子宮內(nèi)的胚胎沖出來；沖卵的生理基礎是早期胚胎形成后，處于游離狀態(tài)，未與母體子宮建立組織上的聯(lián)系。（2）圖中所示胚胎為囊胚，此時細胞開始分化形成①滋養(yǎng)層細胞和②內(nèi)細胞團細胞。其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔。內(nèi)細胞團（②）和原始性腺中含有胚胎干細胞。動物細胞培養(yǎng)過程中，常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶消化組織細胞間的蛋白質(zhì)，使動物細胞分散開來，以得到單個細胞進行培養(yǎng)。（3）胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性，可被誘導分化為多種細胞和組織。一般在培養(yǎng)胚胎干細胞時可以采用胚胎成纖維細胞作為飼養(yǎng)層細胞來實現(xiàn)ES細胞分化。在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質(zhì)時，就可以誘導ES細胞向分化。所以圖中加入的細胞A是飼養(yǎng)層細胞，藥劑B是牛黃酸或丁酰環(huán)腺苷酸等。（4）胚胎干細胞的特點：在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物的各種組織。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。本題結合圖解，綜合考查細胞工程和胚胎工程等知識，要求考生識記動物細胞培養(yǎng)的條件，識記胚胎干細胞的特點和運用，結合所學知識答題。特別要區(qū)分“沖卵”、“排卵”、“滋養(yǎng)層”、“飼養(yǎng)層”幾組相近名稱的內(nèi)涵，避免混淆。10、之后果膠酶（和果膠甲酯酶）含糖量較低干酵母（懸液）出現(xiàn)氣泡酵母下沉無菌空氣/氧氣抑制雜菌反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度、反應時間氯化鈣CaCl2不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活，在含青霉素培養(yǎng)基上死亡營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑/植物激素項端分生組織繼代培養(yǎng)【解析】

1.釀酒和制醋是最古老的生物技術。與酒和醋的生產(chǎn)有關的微生物分別是酵母菌和醋桿菌，它們各有不同的菌種。菌種的不同，所產(chǎn)生的酒和醋的風味也不同。本實驗的內(nèi)容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖進行酒精發(fā)酵(乙醇發(fā)酵)的產(chǎn)物。酵母菌只有在無氧條件下才能進行酒精發(fā)酵，即將葡萄糖氧化成乙醇，而且當培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應式如下。醋桿菌在有氧條件下才能將乙醇氧化為醋酸，醋桿菌所產(chǎn)生的醋酸可使培養(yǎng)液中醋酸的含量高達13%。2.基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法．（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．【詳解】（一）（1）制備山楂果原汁通常選成熟的山楂果，為了避免雜菌污染，通常在用清水沖洗山楂果之后去梗。將山楂果切片并去籽，為了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果膠酶（和果膠甲酯酶）處理，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵時通常需要在發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以彌補山楂果原汁含糖量較低的不足，同時也是為了滿足酵母菌發(fā)酵需要的底物量，從而獲得酒精含量較高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（懸液）后，置于適宜環(huán)境下進行發(fā)酵，由于酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，所以在發(fā)酵過程中會有氣泡產(chǎn)生，當發(fā)酵液中不再出現(xiàn)氣泡時，意味著發(fā)酵完成，然后過濾獲得果酒；也可發(fā)酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即為果酒。（3）醋酸發(fā)酵中，由于醋化醋桿菌在有氧氣的條件下將酒精變?yōu)闉橐胰M而變?yōu)橐掖迹哉麄€發(fā)酵過程需要通入無菌空氣/氧氣。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，食鹽起到了調(diào)味和抑制雜菌的作用，進而防止果醋被其他微生物發(fā)酵分解。（二）（1）①為構建基因表達載體的過程，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，則兩者會出現(xiàn)相同的粘性末端從而使得拼接變得容易，但這種方法存在明顯的缺點是在拼接時會出現(xiàn)反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化等情況。影響拼接效率的因素主要有鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素，除此外，還有且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度和反應時間也會影響拼接的效率。（2）②過程為將目的基因?qū)胧荏w細胞的過程，將圖示重組Ti質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌時，為了提高導入的成功率，可用氯化鈣CaCl2處理農(nóng)桿菌，以提高轉化效率。因為導入的成功率較低，也就是說，并不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒，可能有的導入的是普通質(zhì)粒，或者沒有導入成功，所以需要在特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進行篩選，由于圖中重組質(zhì)粒上含有標記基因四環(huán)素抗性基因，而抗青霉素