輸血科紅細(xì)胞意外抗體篩查和鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、目的：規(guī)范實(shí)驗(yàn)室工作人員的操作程序，確保實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)

果的準(zhǔn)確性與可靠性。

2、范圍：本規(guī)程適用于本實(shí)驗(yàn)室紅細(xì)胞意外抗體篩查與鑒定試

驗(yàn)操作。

3、職責(zé)

3.1工作人員進(jìn)行紅細(xì)胞意外抗體篩查和鑒定試驗(yàn)技術(shù)操作應(yīng)

熟練掌握。

4、紅細(xì)胞以外抗體篩查試驗(yàn)

4.1基本原理

受血者有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要大量輸血時(shí)應(yīng)該按照有關(guān)

規(guī)定進(jìn)行抗體的篩查和鑒定。如條件允許抗體篩選試驗(yàn)最好在交叉配

血之前進(jìn)行，以便對患者抗體的早期確認(rèn)及鑒定臨床上有意義的抗體,

避免一些可能的異常情況而造成病情的延誤。

4.1.1紅細(xì)胞意外抗體概念

意外抗體是指抗-A、抗-B以外的紅細(xì)胞血型抗體。意外抗體有

兩種，包括同種抗體和自身抗體。自身抗體是指受血者體內(nèi)產(chǎn)生的抗

體,針對自己本身的紅細(xì)胞抗原.這類抗體不僅僅與自身紅細(xì)胞凝集.

通常也與多數(shù)別人的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)。如果抗體不是針對自身抗

原，而是與同種異基因的紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，即與某些獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞

出現(xiàn)凝集反應(yīng)，為同種抗體。ABO系統(tǒng)中的亞型，變異型的抗-A1和

抗B抗體，也稱為意外抗體。

4.1.2紅細(xì)胞意外抗體篩查方法

所用檢測方法必須能證實(shí)那些具有臨床意義的不規(guī)則抗體。某種

抗體是否具有臨床意義取決于特殊臨床狀況和病人情況。如果某種特

異性抗體能引起新生兒溶血病、明顯的溶血性輸血反應(yīng)或使輸入的紅

細(xì)胞存活時(shí)間縮短，即認(rèn)為這種抗體有臨床意義。在37℃或在抗球

蛋白試驗(yàn)中反應(yīng)的抗體比僅在室溫或室溫以下反應(yīng)的抗體可能更有

意義。

抗體篩選所針對的抗體可以是IgM類，也可以是IgG類。IgG類

抗體主要是經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生，在鹽水介質(zhì)中不能凝集而

只能致敏相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞，必須通過特殊介質(zhì)才能使致敏紅細(xì)胞出

現(xiàn)凝集反應(yīng)。因此檢測的方法必須包括鹽水介質(zhì)檢測法和特殊介質(zhì)檢

測法如：白蛋白介質(zhì)法、低離子強(qiáng)度介質(zhì)法(LISS)、酶技術(shù)、抗球

蛋白試驗(yàn)、聚凝胺(polbrene)促凝技術(shù)和凝膠實(shí)驗(yàn)(Geltest)等。

除鹽水介質(zhì)以外，可按抗體的血清學(xué)特點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)室的具體條件選擇其

中一種方法。

4.2鹽水介質(zhì)法

4.2.1方法原理

IgM類意外抗體可在室溫鹽水介質(zhì)中與具有對應(yīng)抗原的紅細(xì)胞發(fā)

生凝集反應(yīng)，使用鹽水介質(zhì)法可以檢測出受檢者血清中是否存在IgM

類意外抗體。

4.2.2儀器、試劑與耗材

1）儀器；臺(tái)式低速離心機(jī)、血型血清學(xué)專用離心機(jī)、閱片燈箱、

顯微鏡、試管架；

2）試劑：2%-5%意外抗體篩查試劑紅細(xì)胞（2或3組）、生理鹽

水；3.耗材?：硬試管、一次性塑料滴管、記號筆等；

4.2.3標(biāo)本要求

1）推薦使用EDTA抗凝靜脈血，也可以使用不抗凝靜脈血，靜脈

血管條件不好或緊急情況下也可以使用動(dòng)脈血，標(biāo)木采集量23mL；

2）標(biāo)本標(biāo)識清晰、準(zhǔn)確；

3）標(biāo)本質(zhì)量符合要求，無血液稀釋、細(xì)菌污染，離心后無溶血

及明顯乳糜；

4）標(biāo)本原則上在檢測前不保存，收到標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)進(jìn)行相關(guān)檢

測。

4.2.4操作步驟

以使用3組抗體篩查成劑紅細(xì)胞為例：

1）取4支潔凈試管，分別做好I、II、IH和自身對照標(biāo)記;

2）每支試管中分別加入2滴患者血漿（或血清），再分別加入

1滴相應(yīng)2%-5%篩查紅細(xì)胞和自身紅細(xì)胞，混勻；

3）使用血型血清學(xué)專用離心機(jī)1000g,離心15s；

4）觀察有無凝集或溶血，必要時(shí)顯微鏡下觀察，并記錄結(jié)果。

4.2.5結(jié)果判定與解釋

1）結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

陽性結(jié)果：紅細(xì)胞形成凝集或發(fā)生溶血；

陰性結(jié)果：紅細(xì)胞無溶血，肉眼及鏡下均未見凝集。

表1玻片法紅細(xì)胞凝集強(qiáng)度評分標(biāo)準(zhǔn)

凝集強(qiáng)度評分結(jié)果描述

4+12紅細(xì)胞凝集成一大塊，血清清晰透明

3+10紅細(xì)胞凝集成數(shù)大塊，血清尚清晰

2+8紅細(xì)胞凝塊分散成許多小塊，周圍可見到游離紅細(xì)胞

1+5肉眼可見大顆粒，周圍有較多游離紅細(xì)胞

士

3鏡下可見數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周圍有很多游離紅細(xì)胞

00鏡下未見凝集，紅細(xì)胞均勻分布

1）結(jié)果解釋

①自身對照管及I、II、III管均無凝集或溶血，表明未檢出IgM

意外抗體;

②自身對照管無凝集或溶血，I、II、III管中至少有1管出現(xiàn)凝

集或溶血，表明受檢者血清（或血漿）含有IgM同種意外抗體;

③自身對照管及I、II、HI管均凝集，表明受檢者血清（或血漿）

含有自身抗體或同時(shí)伴有IgM同種意外抗體；

④鹽水介質(zhì)試驗(yàn)陰性結(jié)果，不除外IgG類意外抗體存在。

4.2.6注意事項(xiàng)

鹽水介質(zhì)法通常只能檢出IgM類抗體，所以不能常規(guī)單獨(dú)采用鹽

水介質(zhì)法檢測紅細(xì)胞意外抗體；2.抗體篩查為陰性，并不意味著受

檢血清中一定沒有意外抗體，一些低頻抗體或有劑量效應(yīng)的弱抗體可

能會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件和所選譜細(xì)胞不足而漏檢。

4.3凝聚胺法

4.3.1方法原理

紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞間相互排斥，不易凝集。

當(dāng)紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)中時(shí)，陽離子會(huì)被紅細(xì)胞上的負(fù)電荷所吸引，

紅細(xì)胞被擴(kuò)散的雙層離子云圍繞形成Zeta電位，Zeta電位決定紅細(xì)

胞之間的排斥作用。凝聚胺技術(shù)首先利用低離子溶液降低反應(yīng)介質(zhì)的

離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云，促進(jìn)抗原和抗體結(jié)合。然后

加入凝聚胺溶液，它是一種高價(jià)陽離子季鏤鹽多聚物，液相中產(chǎn)生的

正電荷能中和紅細(xì)胞膜表面唾液酸帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞Zeta電

位降低，紅細(xì)胞間距離縮短，在離心力作用下，紅細(xì)胞發(fā)生可逆性、

非特異性聚集。通過加入帶有負(fù)電荷的檸檬酸鹽重懸液，其負(fù)甩荷具

有能中和凝聚胺陽離子的作用，使紅細(xì)胞非特異性聚集散開，結(jié)果為

陰性；當(dāng)紅細(xì)胞上有TgG抗體結(jié)合時(shí)，其特異性凝聚是不可逆的，加

入重懸液后仍呈現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象，即為陽性結(jié)果。

4.3.2儀器、試齊J與耗材

1）儀器：臺(tái)式低速離心機(jī)、血型血清學(xué)專用離心機(jī)、顯微鏡、

閱片燈箱、試管架；

2）試劑：2%-5%意外抗體篩查試劑紅細(xì)胞（2或3組）、低離子

介質(zhì)溶液（LIM）、凝聚胺試劑溶液（PolybreneReagent）＞重懸液、

生理鹽水；

3.耗材：硬試管、一次性塑料滴管、玻片、記號筆等。

4.3.3標(biāo)本要求

同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

4.3.4操作步驟

1）取4支潔凈試管，分別做好I、【I、IH和自身對照標(biāo)記；

2）每支試管中分別加入2滴患者血漿（或血清），再分別加入

1滴相應(yīng)2%-5%篩查紅細(xì)胞和自身紅細(xì)胞，混勻；

3）每管加入低離子介質(zhì)溶液（LIM）0.65mL,混勻（加入量以及

是否需要室溫孵育，請參照試劑使用說明書），室溫孵育Imin；

4）每管再加入凝聚胺溶液2滴,混勻，1000g離心15s,棄上清

液，不要瀝干，讓管底殘留約0.1mL液體，輕搖試管，肉眼觀察有

無凝集，有凝集可進(jìn)行下一步試驗(yàn)，如無凝集可能試劑失效或離心條

件不符合要求，需要查找原因后重做試驗(yàn)；

5）每管中加入2滴重懸液；

6）輕輕混勻，Imin內(nèi)觀察凝集是否消失，有無溶血現(xiàn)象；

7）疑為弱凝集反應(yīng)時(shí)，取潔凈玻片1張，用一次性塑料滴管從

疑似弱凝集反應(yīng)管內(nèi)吸取1滴紅細(xì)胞混懸液，滴放在玻片上，涂成

薄層，在顯微鏡下觀察，記錄結(jié)果。

4.3.5室內(nèi)質(zhì)控

1）基本原則：每次質(zhì)控試驗(yàn)應(yīng)至少選擇一個(gè)陽性對照質(zhì)控品，

一個(gè)陰性對照質(zhì)控品。陽性質(zhì)控品最好選擇2+的反應(yīng)強(qiáng)度；

2）頻次要求：推薦每批次試驗(yàn)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控；至少在每天試驗(yàn)

開始前、試驗(yàn)中途更換試劑批號后應(yīng)重做質(zhì)控實(shí)驗(yàn)；

3）操作要求：受檢標(biāo)本與質(zhì)控品標(biāo)本應(yīng)采用完全相同試驗(yàn)操作

步驟；

4）可以選擇商品化質(zhì)控品，也可以利用實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本資源自制質(zhì)

控品；

5）質(zhì)控結(jié)果分析：質(zhì)控結(jié)果與預(yù)期靶值相符：，結(jié)果在控，受檢

標(biāo)本檢測結(jié)果可用：質(zhì)捽結(jié)果與預(yù)期靶值不相符,結(jié)果失捽,受檢標(biāo)

本檢測結(jié)果不可用，需查找原因、糾正影響因素后，重復(fù)檢測。

4.3.6室間質(zhì)評

按照要求參加國家級或省級輸血相容性檢測室間質(zhì)量評價(jià)活動(dòng)

意外抗體篩查項(xiàng)目，成績至少達(dá)到合格以上。出現(xiàn)成績不合格時(shí)，實(shí)

驗(yàn)室應(yīng)停止該檢測項(xiàng)目，認(rèn)真分析、查找原因，制定并實(shí)施整改、預(yù)

防措施，并在得出滿意評估結(jié)果后，方可重新開展本檢測項(xiàng)目。

4.3.7結(jié)果判斷與解釋

1）結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

2）結(jié)果解釋:

①自身對照管及I、II、山管均無凝集或溶血，表明未檢出IgG

意外抗體；

②自身對照管無凝集或溶血，I、II、HI管中至少有1管出現(xiàn)凝

集或溶血，表明受檢者血清（或血漿）含有同種意外抗體；

③自身對照管及I、1【、in管均凝集者表明受檢者血清（或血漿）

含有自身抗體或同時(shí)伴有同種意外抗體。

4.3.8注意事項(xiàng)

此方法較之鹽水法在靈敏度上有了很大提高，但其根本還是一種

非特異性促凝手段，仍不能使靈敏度達(dá)到最理想的臨床應(yīng)用水平。在

使用該試驗(yàn)方法時(shí)應(yīng)注意以下兒點(diǎn)：

1）凝聚胺法對Kell而型系統(tǒng)的抗體檢測效果不理想，對抗-K

敏感性低，容易發(fā)生漏檢;

2）IgM類意外抗體也可以在凝聚胺法試驗(yàn)中出現(xiàn)陽性結(jié)果，需

要加做鹽水介質(zhì)試驗(yàn)，以區(qū)分陽性結(jié)果是由于單獨(dú)IgG意外抗體所致,

還是由于IgM聯(lián)合IgG意外抗體所致；

3）注意本方法存在的非特異性因素：

①試驗(yàn)過程中加樣不準(zhǔn)、反應(yīng)時(shí)間不夠、離心力不夠及觀察結(jié)果

時(shí)振搖過重或觀察時(shí)間超過Imin都會(huì)造成假陰性結(jié)果；

②部分試驗(yàn)結(jié)果需在顯微鏡下觀察，增加了結(jié)果判斷的不確定性;

③對弱反應(yīng)容易漏檢，但假陽性相對較少。

④某些治療過程、藥物可影響本法抗體篩查試驗(yàn)結(jié)果：

透析、介入、體外循環(huán)等治療后患者血清（漿）中含大量肝素；

消化道出血患者使用的酚磺乙胺（止血敏）：酚磺乙胺在水溶液中帶

負(fù)電荷，能使紅細(xì)胞Zeta電位上升，致可逆凝集反應(yīng)受到抑制，多

加入凝聚胺溶液也無法完全排除干擾，遇到此類患者應(yīng)在使用酚磺乙

胺4-6h后重新抽取血液標(biāo)本進(jìn)行檢測或更換其他試驗(yàn)方法；患者輸

入大量低分子右旋糖酊時(shí)出現(xiàn)緡錢狀凝集。采用等量生理鹽水置換法,

此種凝集即會(huì)消失。

4.4抗人球蛋白法

4.4.1方法原理

在鹽水介質(zhì)中多數(shù)IgG血型抗體與紅細(xì)胞膜上相應(yīng)血型抗原結(jié)

合后，只能發(fā)生致敏反應(yīng)而不能出現(xiàn)肉眼可見的凝集反應(yīng)。當(dāng)加入抗

人球蛋白試劑后，該抗體（二抗）可與多個(gè)包被在紅細(xì)胞膜上的IgG

類抗體（一抗）的Fc段結(jié)合，通過抗人球蛋白的橋聯(lián)作用，使致敏

紅細(xì)胞發(fā)生肉眼可見的凝集反應(yīng)。目前許多商品化血型血清試劑為

IgG型，需要在抗人球蛋白介質(zhì)中鑒定對應(yīng)血型抗原。

4.4.2儀器、試齊J與耗材

1）儀器：臺(tái)式低速離心機(jī)、血型血清學(xué)專用離心機(jī)、水浴箱、

顯微鏡、閱片燈箱、試管架；

2）試劑：2%-5%意外抗體篩查試劑紅細(xì)胞（2或3組）、抗人球

蛋白試劑、生理鹽水；

3）耗材：硬試管、一次性塑料滴管、玻片及記號筆等。

4.4.3標(biāo)本要求同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

4.4.4操作步驟

1）取小試管4只，標(biāo)記并分別加入待檢血漿或血清2滴。

2）以上4管中分別加入抗體篩選細(xì)胞I、II、III以及自身紅細(xì)

胞懸液各1滴，混勻。

3）立即以1000g離心15秒，肉眼觀察結(jié)果。如果陰性則繼續(xù)試

驗(yàn)，如果陽性，則分析原因排除干擾后繼續(xù)后續(xù)試驗(yàn)。

4）置37℃水浴箱孵育30分鐘，或者各管加LTM（lowionic

strengthmedium低離子強(qiáng)度介質(zhì)）各2滴，置37℃水浴箱孵育10T5

分鐘，或者各管加LIM各10滴，置37℃水浴箱孵育1-3分鐘。

5）將各管中紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌三次（紅細(xì)胞洗滌程序見附

件紅細(xì)胞洗滌方法）

6）各管加多特異性抗球蛋白試劑各1滴，混勻，以1000g離心

15秒，肉眼判斷紅細(xì)胞凝集情況。

7）如果紅細(xì)胞均不凝集，則在任一試管中加入直抗陽性紅細(xì)胞

懸液1滴，立即以1000g離心15秒，肉眼判斷紅細(xì)胞凝集，如果紅

細(xì)胞不凝集則該試驗(yàn)無效。（直抗陽性紅細(xì)胞的制備：見附件致敏紅

細(xì)胞的制備方法）

4.4.5室內(nèi)質(zhì)控同本節(jié)凝聚胺法。

4.4.6室間質(zhì)評同本節(jié)凝聚胺法。

4.4.7結(jié)果判斷與解釋

1）結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

2）結(jié)果解釋:

①自身對照管及I、H、m管均無凝集或溶血，表明未檢出igG

意外抗體；

②自身對照管無凝集或溶血，1、II、III管中至少有1管出現(xiàn)凝

集或溶血，表明受檢者血清（或血漿）含有IgG意外抗體；

③自身對照管及I、II、III管均凝集者，表明受檢者血清（或血

漿）含有自身抗體或同時(shí)伴有IgG意外抗體;

④直接離心，自身對照管及I、n、in管均凝集或溶血者，表明

受檢者血清（或血漿）含有自身抗體或同時(shí)伴有IgM類意外抗體的存

在或其它因素干擾試驗(yàn)結(jié)果。

表2意外抗體篩查結(jié)果解釋

篩選細(xì)胞自身細(xì)胞結(jié)果解釋

陽性陰性意外抗體

自身抗體

陰性陽性意外抗體陰性

+DAT陽性

自身抗體

陽性陽性意外抗體+自身抗體

意外抗體:DAT陽性

4.4.8注意事項(xiàng)

1）紅細(xì)胞的洗滌過程需要注意:

①紅細(xì)胞的洗滌應(yīng)充分。抗人球蛋白試劑能與結(jié)合在紅細(xì)胞表面

的IgG抗體反應(yīng)，同時(shí)也能與血清（或血漿）中游離的IgG抗體反應(yīng)。

如果洗滌不充分，殘留的游離球蛋白能中和抗人球蛋白，使試驗(yàn)出現(xiàn)

假陰性結(jié)果；

②在洗滌紅細(xì)胞過程中，每次移除上清液后，都要將壓積在試管

底部的紅細(xì)胞扣充分搖離管壁后再加入生理鹽水，并使其充分混勻，

以盡量去除殘存血漿蛋白；

③如果洗滌紅細(xì)胞過程中斷或推遲，抗體會(huì)從紅細(xì)胞上逐漸脫離

下來成為游離抗體，產(chǎn)生假陰性結(jié)果;

④最后一次洗滌一定要將剩余的生理鹽水吸盡，否則會(huì)稀釋抗人

球蛋白試劑，使較弱抗體不易被檢出。

2）觀察結(jié)果時(shí)，如果振搖的力度過大會(huì)造成結(jié)果誤判，因此應(yīng)

以輕搖結(jié)果為準(zhǔn)。對于弱陽性結(jié)果可通過觀察紅細(xì)胞扣是否出現(xiàn)缺口

或通過顯微鏡鏡下觀察來判讀；

3）離心后應(yīng)立即判讀結(jié)果，如果結(jié)果被放置一段時(shí)間或重復(fù)判

讀，陽性結(jié)果可能減弱甚至變成陰性；

4）注意試驗(yàn)過程中溫度、離心力與離心時(shí)間、紅細(xì)胞濃度與抗

原抗體比例、試管搖動(dòng)力度等因素都會(huì)對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響；

5）抗人球蛋白試劑應(yīng)按說明書的要求使用最適稀釋度，否則會(huì)

因產(chǎn)生前帶或后帶效應(yīng)（鉤狀效應(yīng)）而誤判試驗(yàn)結(jié)果；

6）當(dāng)血液標(biāo)本中含有冷凝集素、臍血標(biāo)本含有Wharton膠、臍

血中有較多網(wǎng)織紅細(xì)胞、抗人球蛋白試劑中含有抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體時(shí),

都可能使紅細(xì)胞發(fā)生凝集，出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

7）操作步驟3發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞凝集或溶血，提示可能有IgM類意外

抗體的存在。

4.5微柱凝集抗人球蛋白法

4.5.1方法原理

應(yīng)用微柱凝集孔代替普通試管，微柱孔內(nèi)注入顆粒介質(zhì)，并在反

應(yīng)介質(zhì)中預(yù)先添加抗人球蛋白抗體。由于顆粒介質(zhì)具有分子篩作用，

紅細(xì)胞抗原與對應(yīng)IgG抗體結(jié)合后，在抗人球蛋白抗體搭橋作用下形

成細(xì)胞凝集團(tuán)塊。通過離心作用，未結(jié)合抗體的紅細(xì)胞穿過介質(zhì)，到

達(dá)底部，即為陰性反應(yīng)；而發(fā)生抗原抗體反應(yīng)出現(xiàn)凝集的紅細(xì)胞被阻

滯在介質(zhì)上層或游離于介質(zhì)中，即為陽性反應(yīng)。

4.5.2儀器、試齊J與耗材

1）儀器：臺(tái)式低速離心機(jī)、微柱凝集卡離心機(jī)、微柱凝集卡孵

育器、閱片燈箱、移液器、全自動(dòng)檢測系統(tǒng)（條件具備時(shí)）；

2）試劑：0.8%-居意外抗體篩查試劑紅細(xì)胞（2或3組）、微柱

凝集抗人球蛋白卡、LISS液、稀釋液（自動(dòng)化檢測時(shí)）；

3）耗材：硬試管、移液器吸頭、一次性塑料滴管、記號筆等。

4.5.3標(biāo)本要求：同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

4.5.4操作程序

1）手工操作：嚴(yán)格按照微柱凝集卡使用說明書的要求進(jìn)行操作。

2）全自動(dòng)檢測：嚴(yán)格按照全自動(dòng)檢測設(shè)備使用說明書的要求進(jìn)

行操作。

4.5.5室內(nèi)質(zhì)控：同本節(jié)凝聚胺法。

4.5.6室間質(zhì)評：同本節(jié)凝聚胺法。

4.5.7結(jié)果判定與解釋

1）結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)（如下圖所示）：

■柱凝膠法?集強(qiáng)度判讀表

外細(xì)胞在凝膠柱內(nèi)：岫況反應(yīng)覆度

紅細(xì)胞復(fù)合物（凝集）清楚的集中在凝膠

“全*T9

載體IS部

凝塊絕大部分集中在凝膠轂體頂部,同時(shí)

QJ4??或3,8

在上1/3也有少量收在凝塊

大部分紅細(xì)胞厘合物位于“股衣面,敬住一

3*3*

凝塊延浮于頂部與中部之間

版塊大部分位「及膠中部.少部分位ftt

2.5*3??或2，6

膠中上部

凝塊大部分集中在核膠載體膠中部,同時(shí)

2>2*5

花上1/2也有少鍛放在凝塊

凝塊大部分集中在凝膠我體中部，同時(shí)在

94*Qx*A

凝集層上、下也有少址放在凝塊

凝塊大部分集中在及收我體中部，同時(shí)在1.54?件~q

凝股卜‘1/2也有少量散在凝塊

凝塊大部分集中在凝膠栽體底端,同時(shí)在

凝膠K1/2有敢在凝塊

凝塊絕大部分集中在凝膠我體底部，但凝

生不平整.在凝膠卜-1/3行少攝做在凝塊

膠衣面和管尖底部的紅細(xì)胞同時(shí)存在混合視野

（Dcp）

凝膠和液體無凝集或未融集的紅細(xì)岫,液完全溶血

體出現(xiàn)透明濟(jì)激紅色

殘留紅細(xì)胞在膠衣面、膠中或膠底部.液不完全

體出現(xiàn)透明清澈紅色溶血

紅細(xì)胞完全沉枳在微柱數(shù)膠管尖底部o-b0

2）結(jié)果解釋

①自身對照孔及I、n、in孔均陰性，表明未檢出igG意外抗體；

②自身對照孔陰性，I、n、n【孔中至少有1孔陽性，表明受檢

者血清（或血漿）含有意外抗體；

③自身對照孔及I、n、ni孔均陽性，表明受檢者血清（或血漿）

含有自身抗體或同時(shí)伴有意外抗體；

④陽性結(jié)果一般需要加做鹽水介質(zhì)法，以確定是否存在IgM意外

抗體。在排除IgM意外抗體的情況下，方可確定存在IgG意外抗體。

4.5.8注意事項(xiàng)

1）如果應(yīng)用不抗凝血標(biāo)本，紅細(xì)胞要充分洗滌，不能有凝塊，

血清析出充分，排除纖維蛋白干擾；

2）離心過程中要防止孔間污染，十?dāng)_結(jié)果的判斷;

3)一些IgM意外抗體也可以在微柱凝集抗人球蛋白試驗(yàn)中表現(xiàn)

為陽性結(jié)果，若要確認(rèn)或區(qū)分抗體類型，還需增加鹽水介質(zhì)試驗(yàn)，或

使用筑基試劑處理受檢血漿(或血清)重復(fù)試驗(yàn)；

4)抗體篩查為陰性，并不意味著受檢血清中一定沒有抗體，一

些低頻抗體或有劑量效應(yīng)的抗體可能會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件和所選譜細(xì)胞不

足而漏檢。

5、紅細(xì)胞意外抗體鑒定方法

紅細(xì)胞意外抗體篩查結(jié)果為陽性，應(yīng)進(jìn)行抗體鑒定試驗(yàn)，以確定

其特異性，便于找到對應(yīng)抗原陰性的獻(xiàn)血者血液，確保輸血療效與安

全。意外抗體鑒定試驗(yàn)原理是讓待檢血清與一組紅細(xì)胞反應(yīng)，該組紅

細(xì)胞上的血型抗原均經(jīng)過了詳細(xì)的檢測，通常稱為“譜細(xì)胞”(Panal

Cell)o通過分析待檢血清與譜細(xì)胞反應(yīng)的格局情況，就可以判斷待

檢血清中存在的意外抗體具有怎樣的特異性。主要介紹常用的鹽水介

質(zhì)法、凝聚胺法、鹽水抗人球蛋白法和微柱凝集抗人球蛋白法。抗體

鑒定試驗(yàn)試劑譜細(xì)胞一般是由8-20單人份的己知血型表型的0型紅

細(xì)胞配套組成，具有各種不同的紅細(xì)胞抗原成分，根據(jù)譜細(xì)胞的反應(yīng)

格局可以鑒定常見抗體特異性。采用一組譜細(xì)胞進(jìn)行抗體鑒定有一定

的局限性，有可能漏檢低頻抗體或無法確定聯(lián)合抗體的特異性。臨床

上很難找到完全覆蓋所有抗原的譜細(xì)胞，試劑選擇時(shí)應(yīng)結(jié)合本地區(qū)意

外抗體分布的特點(diǎn)并盡量滿足以下要求：

1）由8-20人份0型紅細(xì)胞組成一套譜細(xì)咆，應(yīng)包含D、C、c、

E、e、M、N、S、s、Mia、Mur、Jka、Jkb、Dia、K、k、Pl、Fy

a、Fyb、Lea和Leb等抗原，能鑒定Rh、MNS、PIPk、Lewis、

KellsKidd>Duffy、Diego等血型系統(tǒng)的常見抗體;

2）Rh、MNS、Duffy和Kidd系統(tǒng)的多數(shù)抗體均表現(xiàn)有劑量效應(yīng)，

試劑紅細(xì)胞上相應(yīng)的抗原應(yīng)盡量為純合子；

3）能鑒定大多數(shù)單一抗體和多種混合抗體，能區(qū)分復(fù)合抗體和

混合抗體；

4）應(yīng)標(biāo)明Rh基因型如R1R1、R1R2等；

5）注明一些重要的低頻率抗原及高頻率抗原是陰性還是陽性；

6）選擇意外抗體鑒定技術(shù)應(yīng)力求：

①盡可能多地檢測出有臨床意義的抗體；

②盡可能少地檢測出無臨床意義的抗體；

③盡可能快速地完成抗體檢測。

當(dāng)一份待檢血清需要做抗體鑒定試驗(yàn)時(shí)，首先需要確定應(yīng)用怎樣

的介質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)，這通常需要參考抗體篩選試驗(yàn)的結(jié)果。如果在抗體

篩選試驗(yàn)中只有鹽水介質(zhì)出現(xiàn)陽性，則需要用鹽水介質(zhì)進(jìn)行抗體鑒定。

同樣，如果在抗球蛋白介質(zhì)和聚凝胺試驗(yàn)中抗體篩選試驗(yàn)均出現(xiàn)陽性,

則可以選擇一種結(jié)果較明確的方法進(jìn)行抗體鑒定試驗(yàn)。

5.1鹽水介質(zhì)法

5.1.1原理

IgM類意外抗體可在室溫鹽水介質(zhì)中與具有對應(yīng)抗原的紅細(xì)胞發(fā)

生凝集反應(yīng)，使用一組由8-20單人份的己知血型表型的0型紅細(xì)胞

可以在鹽水介質(zhì)條件下鑒別出受檢者血液中TgM類意外抗體特異性。

5.1.2儀器、試劑與耗材

1）儀器：臺(tái)式低速離心機(jī)、血型血清學(xué)專用離心機(jī)、閱片燈箱、

顯微鏡、試管架；

2）試劑：2%-5%抗體鑒定細(xì)胞（譜細(xì)胞）、生理鹽水；3.耗材:

硬試管、一次性塑料滴管、記號筆等。

5.1.3標(biāo)本要求

1）推薦使用EDTA抗凝靜脈血，可以使用不抗凝靜脈血，靜脈血

管條件不好或緊急情況下也可以使用動(dòng)脈血，標(biāo)本采集量23mL；

2）標(biāo)本標(biāo)識清晰、準(zhǔn)確；

3）標(biāo)本質(zhì)量符合要求，無血液稀釋、細(xì)菌污染、離心后無溶血

及明顯乳糜；

4）標(biāo)本原則上在檢測前不保存，收到標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)進(jìn)行相關(guān)檢

測。

5.1.4操作步驟

1）依據(jù)譜細(xì)胞的數(shù)量（n）取相應(yīng)數(shù)目的潔凈試管，分別標(biāo)記序

號1、2、3、…、n,另取一支潔凈試管標(biāo)記為自身對照;

2）每管各加入被檢血清（或血漿）2滴；

3）再分別于1-n號試管內(nèi)對應(yīng)加入2%-5%抗體鑒定細(xì)胞各1滴，

自身對照管加入1滴2%-5%自身紅細(xì)胞懸液；

4）混勻，經(jīng)1000g離心15s,觀察有無凝集和溶血，必要時(shí)顯

微鏡下觀察并記錄結(jié)果。

5.1.5室內(nèi)質(zhì)控：不適用。

5.1.6室間質(zhì)評：不適用。

5.1.7注意事項(xiàng)

1）鹽水介質(zhì)法通常只能檢出IgM類抗體，所以不能常規(guī)單獨(dú)采

用鹽水介質(zhì)法鑒定紅細(xì)胞意外抗體特異性，需要與能夠鑒定出IgG類

抗體的方法組合使用；

2）鹽水介質(zhì)法抗體鑒定為陰性，并不意味著受檢血清中一定沒

有IgM抗體，一些低頻抗體可能會(huì)因所選譜細(xì)胞不足而漏檢，必要時(shí)

可增加譜細(xì)胞數(shù)量；

3）鹽水介質(zhì)法出現(xiàn)弱陽性結(jié)果或無相符反應(yīng)格局時(shí).，可以通過

室溫（或4℃）孵育一定時(shí)間后，離心觀察結(jié)果，提高有劑量效應(yīng)的

弱抗體的檢出效率。

5.2凝聚胺法

5.2.1原理：同本節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)?zāi)郯贩ā?/p>

5.2.2儀器、試齊J與耗材:

1）儀器：臺(tái)式低速離心機(jī)、血型血清學(xué)專用離心機(jī)、閱片燈箱、

顯微鏡、試管架；

2）試劑：2隨5%抗體鑒定細(xì)胞（譜細(xì)胞）、低離子介質(zhì)溶液（LIM）、

凝聚胺試劑溶液（PolybreneReagent）＞重懸液、生理鹽水；3.

耗材：硬試管、滴管、玻片、記號筆等。

5.2.3標(biāo)本耍求：同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

5.2.4操作步驟

1）依據(jù)譜細(xì)胞數(shù)量（n）的多少取相應(yīng)數(shù)目的潔凈試管，分別標(biāo)

記序號1、2、3、…、n,另取一支潔凈試管標(biāo)記為自身對照；

2）每管各加入2滴被檢血清（或血漿）：

3）再分別于l-n號加入1滴2%-5%抗體鑒定譜細(xì)胞，自身對照

管加入1滴2%-5%自身紅細(xì)胞懸液；

4）混勻，各加LIM溶液0.65mL（或參照試劑說明書操作），再

次混勻；

5）各加2滴凝聚胺溶液（參照試劑說明書操作）；

6）用血型血清學(xué)專用離心機(jī)，以1000g離心15s,棄去上清液，

不要瀝干，讓管底殘留約0.1mL液體；

7）輕輕搖動(dòng)試管，目測紅細(xì)胞有無凝集，如無凝集，則必須重

做試驗(yàn)；

8）加入2滴重懸液，輕輕搖動(dòng)試管混勻并同時(shí)觀察結(jié)果;

9）記錄觀察到的凝集強(qiáng)度或溶血程度。

5.2.5室內(nèi)質(zhì)控：同本節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)?zāi)郯贩ā?/p>

5.2.6室間質(zhì)評：不適用。

5.2.7注意事項(xiàng)：同本章笫四節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)?zāi)郯?/p>

法。

5.3鹽水抗人球蛋白法

5.3.1原理：同本節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)鹽水抗人球蛋白法。

5.3.2儀器、試齊J與耗材

1）儀器：臺(tái)式低速離心機(jī)、血型血清學(xué)專用離心機(jī)、水浴箱、

顯微鏡、閱片燈箱、試管架；

2）試劑：2%-5%抗體鑒定細(xì)胞（譜細(xì)胞）、抗球蛋白試劑、生理

鹽水；

3）耗材：硬試管、一次性塑料滴管、載玻片、記號筆等。

5.3.3標(biāo)本要求：同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

5.3.4操作步驟

1）依據(jù)譜細(xì)胞的數(shù)量（n）取相應(yīng)數(shù)目的潔冷試管，標(biāo)記并分別加

入待檢血漿或血清2滴。

2）以上各管中分別加入1?n號2%-5%譜細(xì)胞試劑以及自身紅細(xì)

胞懸液各1滴，混勻。

3）立即以1000g離心15秒，肉眼觀察結(jié)果。如果陰性則繼續(xù)試

驗(yàn)，如果陽性，則分析原因排除干擾后繼續(xù)后續(xù)試驗(yàn)。

4）置37℃水浴箱孵育30分鐘，或者各管加LIM（lowionic

strengthmedium低離子強(qiáng)度介質(zhì)）各4滴，置37℃水浴箱孵育10-15

分鐘，或者各管加LIM各10滴，置37℃水浴箱孵育1-3分鐘。

5）將各管中紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌三次（紅細(xì)胞洗滌程序見附

件紅細(xì)胞洗滌方法）。

6）各管加多特異性抗球蛋白試劑各1滴，混勻，以1000g離心

15秒，肉眼判斷紅細(xì)胞凝集情況。

7）如果紅細(xì)胞均不凝集，則在任一試管中加入直抗陽性紅細(xì)胞

懸液1滴，立即以1000g離心15秒，肉眼判斷紅細(xì)胞凝集，如果紅

細(xì)胞不凝集則該試驗(yàn)無效。（直抗陽性紅細(xì)胞的制備：見附件致敏紅

細(xì)胞的制備方法）

5.3.5室內(nèi)質(zhì)控：同木節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)?zāi)郯贩ā?/p>

5.3.6室間質(zhì)評：不適用。

5.3.7注意事項(xiàng)：同本節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)鹽水抗人球蛋

白法。

5.4微柱凝集抗人球蛋白法

5.4.1原理：同本節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)柱凝集抗人球蛋白

法

5.4.2儀器、試劑與耗材

1）儀器：臺(tái)式低速離心機(jī)、微柱凝集卡離心機(jī)、微柱凝集卡孵

育器、移液器、全自動(dòng)檢測系統(tǒng)（條件具備時(shí)）、稀釋液（自動(dòng)化檢

測時(shí)）；

2）試劑：0.8%-1%抗體鑒定細(xì)胞（譜細(xì)胞）、微柱凝集抗人球蛋

白卡、LISS液；

3）耗材：硬試管、移液器吸頭、一次性塑料滴管、記號筆等。

5.4.3標(biāo)本要求：同本節(jié)鹽水介質(zhì)法。

5.4.4操作步驟

1）手工操作：嚴(yán)格按照微柱凝集抗人球蛋白卡使用說明書的要

求進(jìn)行操作。

2）全自動(dòng)檢測：嚴(yán)格按照全自動(dòng)檢測設(shè)備使用說明書的要求進(jìn)

行操作。

5.4.5室內(nèi)質(zhì)控：同本節(jié)凝聚胺法。

5.4.6室間質(zhì)評：不適用。

5.4.7注意事項(xiàng)：同本節(jié)紅細(xì)胞意外抗體篩查試驗(yàn)柱凝集抗人球

蛋白法

5.5抗體鑒定試驗(yàn)結(jié)果的解釋及處理：

1）與譜細(xì)胞反應(yīng)有明確結(jié)果，并從反應(yīng)格局可確定為單一抗體。

2）與譜細(xì)胞反應(yīng)有明確結(jié)果，反應(yīng)有強(qiáng)弱格局，但無法確定為

單一抗體。可能存在混合抗體、聯(lián)合抗體或類特異性抗體，可用排除

法限定抗體特異性范圍，并用吸收放散方法分離各種特異性抗體。混

合抗體是指存在多種不同特異性抗體，聯(lián)合抗體是指存在一種具有多

特異性的抗體。如果通過吸收放散試驗(yàn)可以分離出不同特異性的抗體,

則證明存在混合抗體。如果通過吸收放散試驗(yàn)無法使抗體的特異性出

現(xiàn)分離，則可能存在聯(lián)合抗體或類特異性抗體。通常可使用與血清反

應(yīng)較弱的紅細(xì)胞可能只和其中一種抗體反應(yīng)，通過吸收和放散，有可

能得到單一特異性的抗體。

3）與譜細(xì)胞呈弱反應(yīng)，結(jié)果不明確。

I、分析結(jié)果：

①是否符合劑量效應(yīng)：

許多血型抗原，如Rh抗原（除D抗原外），純合子的抗原強(qiáng)度

明顯高于雜合子的抗原強(qiáng)度，如ccDEE上E抗原的強(qiáng)度明顯高于CcDEc。

在抗體較弱時(shí)可能只與純合子細(xì)胞反應(yīng)，與雜合子細(xì)胞不反應(yīng)。

②是否可能為某些具有個(gè)體差異抗原的抗體：

某些抗原如：I、P、Lea.Sda等在不同成人紅細(xì)胞上，所表現(xiàn)

的強(qiáng)度不同。這一類弱抗體與譜細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果可能難于分析，如：弱

的抗-P1可能與某些P1型譜細(xì)胞反應(yīng)，與另一些P1型譜細(xì)胞不反應(yīng)。

③譜細(xì)胞是否新維，濃度是否一致:

有些抗原在儲(chǔ)存期的退化比另一些抗原快，且抗原在不同獻(xiàn)血者

紅細(xì)胞上的退化速率也不同，故弱抗體與陳舊譜細(xì)胞反應(yīng)的格局難以

分析。另外不同的譜細(xì)胞濃度可以影響結(jié)果凝集強(qiáng)度的判斷。因此應(yīng)

盡量使用濃度一致的新鮮譜細(xì)胞。

II、改變試驗(yàn)方法：

①使用更靈敏的方法重復(fù)試驗(yàn)：

手工polybrene方法，凝膠方法，酶增強(qiáng)的抗球蛋白方法都是靈

敏度很高的試驗(yàn)，使用這些方法重第試驗(yàn)可能會(huì)得到明確的結(jié)果。

②適當(dāng)增加血清與紅細(xì)胞比例，適當(dāng)增加孵育時(shí)間：

在IgG不規(guī)則抗體的檢測中，將血清、紅細(xì)胞比例增加到4：1；

37℃孵育時(shí)間增加到1小時(shí)會(huì)增強(qiáng)反應(yīng)結(jié)果。

③加添加劑后重復(fù)試驗(yàn)：

有許多增效劑可明顯提高反應(yīng)靈敏度，如一些Liss添加劑、PEG

等。其中PEG可顯著增強(qiáng)抗球蛋白試驗(yàn)的反應(yīng)，其靈敏度可高于手工

polybrene方法。

④待抗體增強(qiáng)后重復(fù)試驗(yàn)：

有時(shí)，病人體內(nèi)的抗體會(huì)逐漸增強(qiáng)，如孕婦、剛剛接受不配合型

輸血的病人,可以過一段時(shí)間后重復(fù)試驗(yàn)c

4）與所有譜細(xì)胞反應(yīng)，自身對照陰性

I、與譜細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)度不一致:

①可能存在混合抗體：可觀察在不同試驗(yàn)方法中是否表現(xiàn)出明顯

不同的反應(yīng)格局。如在酶方法中增強(qiáng)則可能存在Rh抗體或補(bǔ)體結(jié)合

抗體(抗Lea、Jka等)；在酶方法中減弱可能是M、N^S、Fya、Fyb

以及高頻抗體Ch、Rg、或JMH等;在Polybrene試驗(yàn)中減弱則可能

是Kell系統(tǒng)抗體。可以用吸收放散方法分離混合抗體，用與血清反

應(yīng)較弱的紅細(xì)胞吸收試驗(yàn)，測放散液中抗體特異性。

②可能存在聯(lián)合抗體：抗體聯(lián)合常見于Rh系統(tǒng)中，如抗-G(CD),

-f(ce),-Ce,-CDE,-Ec等。聯(lián)合抗體本質(zhì)上是一種抗體，但其

特異性很像是同時(shí)存在著兩種或多種抗體。如果懷疑存在2種或多種

具有明確特異性的抗體，但不能用吸收放散方法使其分開，則證明存

在聯(lián)合抗體。

II、與譜細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)度一致：

①抗體可能為專與。細(xì)胞反應(yīng)的抗體，如抗-1、-H、-HI這些抗

體一般都是所謂的高效價(jià)、低親和力抗體，可通過測定效價(jià)，觀察凝

集強(qiáng)度和效價(jià)的關(guān)系查知。這類患者如需輸血，可檢查與患者有血緣

關(guān)系的個(gè)體的紅細(xì)胞，常能發(fā)現(xiàn)有陰性反應(yīng)者，這些個(gè)體如果AB0血

型與患者相合，可以作為供血者。

②可能是針對高頻抗原的抗體；

③可能是針對譜細(xì)胞的抗體。

由于市售譜細(xì)胞均貯存于保存液中，保存液中的氯霉素、硫酸新

霉素、四環(huán)素、氫化可的松、乳糖及EDTA均可吸附于譜細(xì)胞，如果

患者體內(nèi)有上述藥物的抗體，可能特異性的造成譜細(xì)胞凝集。可在實(shí)

驗(yàn)前用鹽水洗滌紅細(xì)胞加以解決。

5）與所有譜細(xì)胞反應(yīng)，自身對照陽性

I、存在自身抗體

譜細(xì)胞與血清的反應(yīng)強(qiáng)度一致，可在自身細(xì)胞上放散出同樣的抗

體。這種情況較少見，因?yàn)橐话阕陨砜贵w會(huì)全部吸附到自身紅細(xì)胞上。

為了證明血清中確實(shí)還存在未被吸收的自身抗體，必須將患者紅細(xì)胞

放散至直抗陰性，然后與自身血清反應(yīng)，其結(jié)果才是可靠的自身對照。

1【、同種和自身抗體同時(shí)存在

同種抗體和自身抗體可以同時(shí)存在。同種抗體的存在一般可使譜

細(xì)胞反應(yīng)出強(qiáng)弱不一的格局，可借以判斷同種抗體的特異性。有時(shí)自

身抗體會(huì)掩蓋了同種抗體的存在，由于同種抗體引起輸血反應(yīng)的強(qiáng)度

往往遠(yuǎn)高于自身抗體，所以排除可能存在的同種抗體很重要。通常可

用自身細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)吸收放散的方法除去自身抗體來查知是否存在

同種抗體。

III、冷凝集

一般冷凝集素在室溫（25℃）下即失去活性，但有些冷凝集素可

在32℃時(shí)凝集紅細(xì)胞，更有些極高效價(jià)的冷凝集素引起的紅細(xì)胞凝

集在37℃孵育仍不散開。這時(shí)可在37℃和4℃分別作抗體效價(jià)，以

確認(rèn)冷凝集素的存在。可用自身或免紅細(xì)胞反復(fù)吸收放散的方法除去

血清中的冷凝集素，用45c溫鹽水反復(fù)洗滌紅細(xì)胞來去除紅細(xì)胞上

的冷抗體。或使用2-me處理血清或紅細(xì)胞以排除IgM性質(zhì)冷凝集素

的干擾。

IV、假凝集

某些高分子物質(zhì)、血清蛋白異常、低離子強(qiáng)度及酸性環(huán)境等均可

造成紅細(xì)胞假凝集。

V、酶引起的多凝集

約有1%左右個(gè)體的血清中，存在和酶處理紅細(xì)胞反應(yīng)的抗體，

這些抗體和未經(jīng)酶處理的紅細(xì)胞不反應(yīng)，在鹽水、抗球蛋白試驗(yàn)及其

他方法的試驗(yàn)中均不能凝集。可用未經(jīng)酶處理過的紅細(xì)胞在37c吸

收該血清，然后用酶方法檢測放散液中的抗體。由于酶多凝集抗體不

能被普通紅細(xì)胞吸收，因此放散液在酶介質(zhì)中不能凝集紅細(xì)胞。

VI、補(bǔ)體的影響

在極少見的情況下，患者血清和譜細(xì)胞或獻(xiàn)血者細(xì)胞混合孵育的

過程中，可將少量補(bǔ)體致敏到紅細(xì)胞上，造成抗球蛋白試驗(yàn)的弱陽性

結(jié)果。特別在配血過程中出現(xiàn)這種情況，常令人十分困惑。只要在患

者血清的抗體鑒定中，確認(rèn)這種抗補(bǔ)體陽性不是由補(bǔ)體依賴性抗體造

成的（與一組譜細(xì)胞呈一致性的弱反應(yīng)，沒有特異性抗體特有的反應(yīng)

格局）。則可以用抗-IgG代替多特異性抗球蛋白試劑加以解決。另

外試驗(yàn)前將被檢血清56℃孵育3分鐘可滅活補(bǔ)體。

VII、類抗體

某些抗體具有相對的抗體特異性，如某些Rh抗體。相對特異性

抗-E可與含E抗原的紅細(xì)胞呈強(qiáng)反應(yīng)，與不含E抗原的細(xì)胞呈弱反

應(yīng)。這時(shí)用不含E抗原的紅細(xì)胞吸收血清抗體，會(huì)發(fā)現(xiàn)抗-E同時(shí)被

吸收而減弱。這類抗體也出現(xiàn)于直抗陽性紅細(xì)胞的放散液中。

6)與譜細(xì)胞不反應(yīng)，自身對照呈陽性：

I、自身抗體：存在自身抗體的病人，血清中常沒有可檢出的自

身抗體，幾乎所有抗體都吸收到了自身紅細(xì)胞上，造成自身紅細(xì)胞直

抗陽性。

1【、輸血反應(yīng)：血型不合造成的輸血反應(yīng)，病人的抗體可能被完

全吸收到輸入的紅細(xì)胞上，造成血清中沒有可檢出的抗體，而“自身

細(xì)胞”表現(xiàn)出直抗陽性。其實(shí)真正的直抗陽性的細(xì)胞是輸入的紅細(xì)胞。

III、多凝集紅細(xì)胞：病人紅細(xì)胞可能是多凝集紅細(xì)胞。多凝集有

細(xì)菌污染和遺傳性兩種。

IV、C3陽性：病人的紅細(xì)胞可能在體內(nèi)或體外被C3致敏，這種

致敏常由IgM性質(zhì)的冷抗體造成，因此在血清中沒有可檢出的抗體。

6、抗體篩查和鑒定的影響因素