厭氧性細(xì)菌1.闡述沙門菌屬、志賀菌屬的致病物質(zhì)和所致疾病。2.說出霍亂弧菌的致病物質(zhì)和所致疾病。復(fù)習(xí)回顧1.闡述破傷風(fēng)梭菌的致病條件、致病物質(zhì)和所致疾病。2.說出產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌的致病物質(zhì)和所致疾病。3.說出無芽孢厭氧菌的致病條件和感染特征。教學(xué)內(nèi)容和目標(biāo)厭氧性細(xì)菌:一群必須在無氧環(huán)境條件下才能生長繁殖的細(xì)菌。根據(jù)能否形成芽胞，厭氧菌可分為厭氧芽胞梭菌和無芽胞厭氧菌。厭氧芽胞梭菌臨床常見的有破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌及艱難梭菌,主要引起外源性感染。無芽胞厭氧菌則包括多個屬的球菌和桿菌,大多為人體正常菌群的成員,主要引起內(nèi)源性感染。第一節(jié)厭氧芽胞梭菌Clostridium破傷風(fēng)梭菌C.tetani

--------破傷風(fēng)產(chǎn)氣莢膜梭菌C.perfringens-------氣性壞疽肉毒梭菌C.botulinum------------肉毒中毒艱難梭菌C.difficile------------假膜性結(jié)腸炎

1.是一群專性厭氧、能形成芽胞、G＋的粗大桿菌。2.它們廣泛分布于自然界的土壤中，有些可寄生在動物和人體的腸道內(nèi)。形態(tài)：菌體：菌體細(xì)長，周鞭毛，無莢膜芽胞：芽胞正圓，位于菌體頂端，使細(xì)菌呈鼓槌狀菌落：羽毛狀，血平板上見薄膜狀爬行生長染色：革蘭氏陽性破傷風(fēng)梭菌（C.tetani）一、生物學(xué)性狀生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì)。抵抗力:芽胞抵抗力很強(qiáng)100℃1小時才能滅活在干燥的土壤和塵埃中可存活數(shù)年無侵襲力，細(xì)菌在局部繁殖，產(chǎn)生神經(jīng)外毒素而致病傷口需要厭氧環(huán)境：傷口窄而深。新生兒出生時用不潔器具剪斷臍帶（七日風(fēng)）破傷風(fēng)（tetanus）發(fā)病后機(jī)體呈強(qiáng)直性痙攣、抽搐，可因窒息或呼吸衰竭死亡。二、致病性與免疫性1.致病條件：傷口的厭氧微環(huán)境（1）傷口窄而深，如刺傷、槍傷、扎傷；（2）傷口壞死組織多，如大面積燒傷；（3）有其他需氧菌共同感染，如傷口沾有泥土。破傷風(fēng)痙攣毒素（tetanospasmin）一種強(qiáng)毒性蛋白質(zhì)，不耐熱，可被腸道蛋白酶破壞。

由細(xì)菌質(zhì)粒編碼，由兩條肽鏈借二硫鍵聯(lián)結(jié)而成：

α輕鏈：具有毒性作用；

β重鍵：能與神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)結(jié)合；

神經(jīng)毒素，對腦干神經(jīng)和脊髓前角細(xì)胞有高度親合力。

毒性極強(qiáng)，1mg純化的結(jié)晶可殺死3000萬只小鼠。具有免疫原性，經(jīng)0.3%甲醛作用后脫毒成為類毒素。主要致病物質(zhì)

毒素對腦干神經(jīng)和脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞有高度親和力，結(jié)合非常牢固，一旦結(jié)合，抗毒素便不能中和毒素。

阻止抑制性神經(jīng)介質(zhì)γ-氨基丁酸的釋放，使肌肉活動的興奮與抑制失調(diào)，造成強(qiáng)直性痙攣。致病機(jī)制

破傷風(fēng)梭菌及芽胞機(jī)體局部生長外毒素脊髓前角，并可到達(dá)腦干封閉抑制性突觸的介質(zhì)釋放

伸肌、屈肌同時強(qiáng)烈收縮強(qiáng)直痙攣創(chuàng)傷神經(jīng)纖維的間隙淋巴液和血液致病機(jī)理牙關(guān)緊閉苦笑面容臨床表現(xiàn)破傷風(fēng)的臨床診斷主要結(jié)合創(chuàng)傷史和觀察特有的體征。微生物學(xué)檢查對早期診斷意義不大，一般不做。

破傷風(fēng)免疫屬外毒素免疫，主要是抗毒素發(fā)揮中和作用。

一般病后不會獲得牢固免疫力。（抗毒素只能中和游離的外毒素，對迅速與神經(jīng)組織結(jié)合的外毒素?zé)o中和作用。）獲得有效抗毒素的途徑是人工被動免疫。三、微生物學(xué)檢查1.一般不進(jìn)行涂片鏡檢和分離培養(yǎng)。2.典型的癥狀和病史即可作出診斷。四、防治原則1.正確處理創(chuàng)口及清創(chuàng)、擴(kuò)創(chuàng)。用3％過氧化氫或1：400高錳酸鉀溶液沖洗傷口。2.注射白百破三聯(lián)疫苗進(jìn)行人工主動免疫。3.對可疑病人可立即注射破傷風(fēng)抗毒素（tetanusantitoxin,TAT）進(jìn)行緊急預(yù)防。皮膚試驗(yàn)，多部位注射。發(fā)病早期可足量使用抗毒素進(jìn)行特異性治療。4.抗生素、鎮(zhèn)靜劑、肌肉松弛劑等。二、產(chǎn)氣莢膜梭菌C.perfringens菌體：粗大桿菌，有莢膜，無鞭毛芽胞：位于菌體中央或級端，小于菌體染色：革蘭陽性是氣性壞疽的病原體。一、生物學(xué)性狀培養(yǎng)特性厭氧,但不十分嚴(yán)格。20~50℃均能旺盛生長,在其最適生長溫度42℃,此時該菌分裂繁殖周期僅為8分鐘,易于分離培養(yǎng)。

在血瓊脂平板上,多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)。雙層溶血環(huán)“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象產(chǎn)氣莢膜梭菌在牛乳培養(yǎng)基中分解乳糖產(chǎn)酸使酪蛋白凝固，同時產(chǎn)生的大量氣體使凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀，氣勢洶猛，稱為“洶涌發(fā)酵”。二、致病性與免疫性多種外毒素（主要致病物質(zhì)）和侵襲性酶2.莢膜產(chǎn)氣莢膜梭菌主要和次要毒素及其分型致病物質(zhì)：

α毒素等多種毒素分解細(xì)胞膜上磷脂和蛋白形成的復(fù)合物，造成細(xì)胞溶解，引起血管通透性增加伴大量溶血、組織壞死、肝臟、心功能受損。

腸毒素為不耐熱的蛋白質(zhì)，100℃瞬時即被破壞；整段肽鏈嵌入細(xì)胞膜，破壞膜離子運(yùn)輸功能。改變細(xì)胞膜通透性，引起腹瀉。所致疾病1.氣性壞疽：是嚴(yán)重創(chuàng)傷感染性疾病：腫、痛、黑、臭；

該病多見于戰(zhàn)傷和地震災(zāi)害,也可見于平時大面積創(chuàng)傷的工傷、車禍等致病條件與破傷風(fēng)梭菌相似。2.食物中毒：A型產(chǎn)生的腸毒素引起，1-2自愈，難確診三、微生物學(xué)檢查氣性壞疽發(fā)病急，后果嚴(yán)重，需要盡早準(zhǔn)確的作出微生物學(xué)診斷，早期治療：鏡檢：可發(fā)現(xiàn)G＋大桿菌，并伴有其他雜菌和少量形態(tài)不規(guī)則的白細(xì)胞。培養(yǎng)：厭氧培養(yǎng)（皰肉）動物實(shí)驗(yàn)四、防治原則主要是外科手術(shù)處理，去除病變組織，清創(chuàng)，擴(kuò)創(chuàng)、局部用H2O2反復(fù)沖洗使用特異性抗體抗體中和毒素使用抗生素抑制細(xì)菌繁殖對癥治療高壓氧艙由于該菌在環(huán)境中很快形成芽胞，故必須嚴(yán)密隔離病人，并對所用器械及敷料徹底滅菌，避免在醫(yī)院內(nèi)傳播。肉毒梭菌C.botulinum菌體：粗大桿菌，有鞭毛，無莢膜芽胞：位于菌體次級端，大于菌體，呈“網(wǎng)球拍狀”染色：革蘭陽性庖肉培養(yǎng)基上消化肉渣，使肉渣變黑，有腐敗惡臭。芽胞抵抗力強(qiáng)，肉毒毒素不耐熱，煮沸1分鐘即可被破壞。一、生物學(xué)性狀二、致病性與免疫性

1.致病物質(zhì)為肉毒毒素，神經(jīng)外毒素，是已知最劇烈的毒素，對人致死量為0.1μg。2.不耐熱，煮沸1分鐘即被破壞，但對酸和消化酶的抵抗力較弱。3.肉毒毒素作用于外周膽堿能神經(jīng)，抑制神經(jīng)肌肉接點(diǎn)處神經(jīng)介質(zhì)乙酰膽堿的釋放，導(dǎo)致弛緩性麻痹。（眼：復(fù)視、斜視）（咽：聲嘶、吞咽困難）（四肢：癱瘓）（膈?。汉粑ソ撸┧录膊?.肉毒食物中毒：食物污染芽胞，單純性毒素中毒，無細(xì)菌感染（經(jīng)幾小時至3d潛伏期，開始出現(xiàn)惡心、嘔吐（胃腸道癥狀可不明顯）、頭痛、乏力等，繼而出現(xiàn)特有的神經(jīng)麻痹癥狀和體征。（食品：國內(nèi)：發(fā)酵豆制品、面制品；國外：罐頭、香腸、臘肉制品）2.嬰兒肉毒病：6個月內(nèi)嬰兒（腸道缺乏拮抗菌群）。3.創(chuàng)傷肉毒中毒三、微生物學(xué)檢查標(biāo)本：剩余食物，糞便。

標(biāo)本先加熱后培養(yǎng)，糞便、食物等標(biāo)本中的細(xì)菌檢測可先80℃加熱10分鐘,殺死標(biāo)本中所有的細(xì)菌繁殖體，再用加熱標(biāo)本進(jìn)行厭氧培養(yǎng)分離本菌

毒素檢查PCR快速檢測四、防治原則1.加強(qiáng)食品衛(wèi)生管理和監(jiān)督，提高防范意識（低溫保存食物，高溫破壞毒素）。2.盡早根據(jù)癥狀作出診斷，迅速注射A、B、E三型多價抗毒素，同時加強(qiáng)護(hù)理和對癥治療。艱難梭菌C.difficile菌體：粗大桿菌，有鞭毛，無莢膜芽胞：位于菌體次級端染色：革蘭陽性致病性及致病物質(zhì)：抗生素相關(guān)性腹瀉，假膜性腸炎防治：規(guī)范使用抗生素，緊急情況用敏感抗生素口服正常菌群制劑屬人體內(nèi)的正常菌群，包括革蘭陽性和革蘭陰性的球菌和桿菌。在人體正常菌群中占絕大優(yōu)勢。在某些特定狀態(tài)下，這些厭氧菌作為條件致病菌可導(dǎo)致內(nèi)源性感染。無芽胞厭氧菌致病性屬正常菌群，引起內(nèi)源性感染感染條件

寄居部位改變宿主免疫力下降菌群失調(diào)+局部厭氧微環(huán)境與混合感染的需氧菌或兼性厭氧菌協(xié)同作用內(nèi)源性感染，可及全身，多呈慢性。無特定病型，大多為化膿性感染。分泌物或膿液粘稠，有惡臭，有時有氣體。使用氨基糖苷類抗生素長期無效。分泌物直接涂片可見細(xì)菌，普通培養(yǎng)法無細(xì)菌生長。感染特征感染類型1.敗血癥2.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染3.口腔與牙齒感染4.呼吸道感染5.腹部和會陰部感染6.女性生殖道感染標(biāo)本采集從感染中心處采取

無菌切取或活檢得到的組織標(biāo)本從感染深部吸取滲出物或濃汁采取后立刻放入?yún)捬鯓?biāo)本瓶中，迅速送檢直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定三、微生物學(xué)檢查提高機(jī)體的免疫力等，減少條件感染發(fā)生的條件。2.