吉林省長春市朝陽區名校2022-2023學年高二下學期期中考試生物學試題姓名：__________班級：__________考號：__________題號一二總分評分一、選擇題（1-20單選，21-25不定項選擇每小題2分共50分。）1．下圖表示利用葡萄汁進行發酵時可能發生的物質變化。下列有關敘述錯誤的是（）A．過程③④⑤都需要O2參與B．當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌可以直接發生過程⑤C．過程②④所需要的最適溫度相同D．酵母菌發生過程①②的場所相同2．下圖為實驗室培養和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是（）A．①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行B．步驟①中，待倒入的培養基冷卻后蓋上培養Ⅲ的Ⅲ蓋C．步驟③中，每次劃線前后都需對接種環進行灼燒處理D．劃線接種結束后，將圖④平板倒置后放入培養箱中培養3．分離土壤中分解尿素的細菌，對培養基的要求是

①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂

⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦4．甜瓣子是豆瓣醬的重要成分，風味受蠶豆蛋白分解產生的氨基酸影響，也受發酵過程中不同微生物的多種代謝產物影響。其生產工藝如下圖所示。某研究團隊對加鹽水后的發酵階段的傳統工藝（鹽度15%，溫度37℃，發酵30天）進行了改良，改良后甜瓣子風味得以提升。兩種工藝的結果比較如下圖。下列關于本研究的描述，錯誤的是（）A．蠶豆瓣可提供微生物生長繁殖所需的碳源和氮源B．溫度與鹽度都影響微生物的生長繁殖C．定期取樣，使用平板劃線法統計活細菌總數D．新工藝中甜瓣子風味提升，與前、中期活微生物總數高和氨基酸終產量高均有關5．2020年初，荷蘭某研究所利用蛇干細胞培養出可分泌毒液的蛇毒腺微型組織，使獲取毒素的途徑更加安全和簡單。下列敘述正確的是（）A．培養蛇干細胞時，所需的營養物質與植物細胞培養相同B．蛇毒腺微型組織中的細胞基因的表達與蛇胚胎干細胞不完全相同C．人工誘導蛇胚胎干細胞大量增殖即可直接獲得大量分泌毒液的細胞D．培養蛇毒腺微型組織與培養哺乳動物細胞的條件完全相同6．如圖為植物細胞A、B融合后再生出新植株的部分過程示意圖，請據圖分析，以下敘述錯誤的是（）A．植物體細胞雜交技術的目的是獲得雜種細胞B．在形成再生植株的過程中與植物組織培養相似的步驟是④⑤C．原生質體融合成為一個新的雜種細胞的標志是出現新的細胞壁D．親本植物A的細胞與親本植物B的細胞誘導融合后，形成的雜種細胞中兩兩融合的細胞類型有3種7．細胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關鍵。下列選擇不合理的是（）A．選擇幼齡動物的組織進行細胞培養，有利于獲得大量細胞B．選擇胚胎細胞作為核供體進行核移植，可提高克隆動物的成功率C．選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養，可獲得脫毒苗D．選擇植物的愈傷組織進行誘變處理，一定可獲得優質的突變體8．為研究治療性克隆技術能否用于帕金森病的治療，科研人員利用帕金森病模型鼠進行如下圖所示實驗，下列相關敘述不正確的是（）A．過程①中選擇MⅡ期的卵母細胞有利于細胞核全能性恢復B．過程②重組細胞培養依次經歷了桑葚胚、原腸胚和囊胚等過程C．過程③的關鍵是利用特定條件誘導胚胎干細胞相關基因表達D．過程④對受體小鼠無需注射免疫抑制劑以抑制其細胞免疫功能9．下列關于動物細胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是()A．受精過程中防止多精入卵的屏障就是卵細胞膜反應B．卵裂期細胞數目增多，體積變小，有機物含量和種類不斷減少C．囊胚期的細胞出現了細胞分化，但遺傳物質未發生改變D．體外培養的動物細胞均表現出細胞貼壁生長現象10．有關植物細胞工程應用的敘述，錯誤的是()A．利用組織培養技術培養脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種B．利用組織培養技術獲得的名貴蘭花的種苗，能保持親本的優良性狀C．利用細胞培養技術獲得紫草寧，實現了細胞產物的工廠化生產D．利用體細胞雜交技術獲得“白菜-甘藍”，克服了生物遠緣雜交不親和的障礙11．如圖所示為早期胚胎發育過程。下列敘述錯誤的是（）A．從a到e中，適宜于牛的胚胎移植的時期有d、eB．可從圖e的①中分離出胚胎干細胞C．圖e的③將來可發育成胎膜和胎盤D．圖中各階段的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能12．動物細胞培養是動物細胞工程的基礎，圖中a、b、c表示現代工程技術，①②③分別表示其結果。下列說法正確的是（）A．若a是體細胞核移植技術，則①反映了動物體細胞也具有全能性B．若c是胚胎分割技術，則③中個體的基因型和表型一定相同C．若b是體外受精技術，則②為良種家畜快速大量繁殖提供了可能D．①②③中作為受體的動物品種是珍稀的或存量少的雌性動物13．下列關于限制酶和DNA連接酶的敘述，正確的是（）A．兩者都是從原核生物中分離純化出來的B．兩者的催化都會導致磷酸二酯鍵數目的改變C．限制酶都能在特定位點切割產生黏性末端D．DNA連接酶與DNA聚合酶作用的底物是相同的14．限制酶a和b的識別序列和切割位點如圖所示，下列有關說法正確的是（）A．一個DNA分子中，酶a與酶b的識別序列可能有多個B．酶a與酶b切出的黏性末端不能相互連接C．酶a與酶b切斷的化學鍵不完全相同D．用酶a切割有3個識別位點的質粒，得到4種切割產物15．下列有關DNA連接酶的敘述，正確的是（）A．T4DNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間連接起來B．E.coliDNA連接酶能將雙鏈DNA片段平末端之間進行連接C．DNA連接酶能恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵D．DNA連接酶可連接DNA雙鏈的氫鍵，使雙鏈延伸16．為使玉米獲得抗除草劑性狀，需進行如圖所示的操作。報告基因的產物能催化無色物質K呈現藍色。轉化過程中，愈傷組織表面常殘留農桿菌，導致未轉化的愈傷組織也可能在選擇培養基上生長。下列敘述不正確的是（）A．篩選1需要用含有氨芐青霉素的培養基篩選出成功導入表達載體的農桿菌B．篩選2需要用無色物質K處理愈傷組織并篩選出呈現藍色的組織C．為使除草劑抗性基因G在農桿菌中高效表達，需要把目的基因片段插入到表達載體的復制原點和啟動子之間D．為從個體水平上檢測圖中玉米植株A是否具有抗除草劑性狀，可采用的方法是用相應除草劑噴灑待測玉米植株17．PCR（聚合酶鏈式反應）是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術，下圖表示合成過程。下列說法錯誤的是（）A．a過程高溫使DNA變性解旋，該過程不需要解旋酶的作用B．c過程要用到的酶在高溫下失活，因此在PCR擴增時需要再添加C．如果把模板DNA的兩條鏈用15N標記，游離的脫氧核苷酸不標記，控制“94℃～55℃～72℃”溫度循環3次，則在形成的子代DNA中含有15N標記的DNA占25%D．PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變18．如圖是科學家新研發的制備單克隆抗體的過程，相關敘述錯誤的是（）A．若供體DNA提供了prG基因（無限增殖調控基因），則該過程中Ⅱ是已免疫B細胞B．經酶A處理后的Ⅰ與質粒具有相同的黏性末端C．該過程涉及基因工程和動物細胞融合技術D．需對Ⅱ進行克隆化培養和抗體檢測19．原位PCR技術是利用原位PCR儀，在組織或細胞中靶DNA所在的位置上進行的PCR循環擴增，通過摻入標記基因直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。進行擴增時，反應體系中的反應成分需滲透到組織或細胞的靶DNA處才能進行擴增。PCR反應體系中需要添加一定濃度的Mg2+，而組織細胞間的物質會吸附Mg2+，使進入細胞的Mg2+減少。下列說法正確的是（）A．PCR技術中復性是當溫度下降到65℃時，兩種引物與兩條DNA單鏈結合的過程B．反應體系中擴增的原料會依次連接到子鏈的5端C．反應體系中引物的G，C堿基含量越高越好，因為越高引物結合的特異性越強D．原位PCR反應體系中使用的Mg2+濃度要比常規PCR高20．（不定項）如圖表示果酒和果醋生產過程中的物質變化情況，相關敘述正確的是（）A．果醋發酵所需的最適溫度高于果酒B．過程①②在酵母菌細胞中發生的場所相同C．過程⑤需要氧氣而過程④不需要氧氣D．進行果醋發酵的微生物細胞不具有線粒體21．（不定項）生長圖形法是一種測定微生物營養需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養物質的培養基混合后倒成平板，然后在平板上劃分數區，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區域，培養結果如圖所示，下列說法正確的是（）A．倒成平板后直接培養可判斷有無污染B．倒成平板后需要進行滅菌處理C．圖示結果表明該菌需要生長因子乙或丙D．生長圖形法還可用于某些菌種的篩選22．（不定項）一種雜交瘤細胞只能產生一種抗體，抗體由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈構成。科學家通過動物細胞融合技術，將兩株不同的雜交瘤細胞（A和B）融合形成雙雜交瘤細胞AB。雙雜交瘤細胞能夠懸浮在培養基中生長繁殖，可以產生雙特異性抗體AB。過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）A．雜交瘤細胞A，B混合并誘導融合后，利用選擇培養基可以篩選出雙雜交瘤細胞ABB．雙雜交瘤細胞同時識別α、β抗原后，才能產生雙特異性抗體C．對培養到一定密度的雙雜交瘤細胞進行傳代培養時，無需使用胰蛋白酶處理D．將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔，腹水能為細胞提供所需的營養條件23．（不定項）胚胎工程技術能夠充分挖掘動物的繁殖潛力，為優良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法。下圖是育種工作者采用不同方法培育良種牛的過程（a～h為操作過程），下列敘述正確的是（）A．為獲得大量的卵母細胞，需用促性腺激素處理良種母牛B．采集的精子必須置于ATP溶液中進行獲能處理C．若要生產高產奶牛，可?、偬幖毎鯠NA分析性別鑒定D．轉基因牛D的培育可以經過b→f→g過程24．（不定項）20世紀70年代，Fredsanger發明了雙脫氧終止法對DNA進行測序。其原理如圖，在4個試管中分別加入4種脫氧核苷三磷酸（dNTP）和1種雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）；ddNTP可以與dNTP競爭核苷酸鏈延長位點，并終止DNA片段的延伸。在4個試管中DNA鏈將會分別在A、C、G及T位置中止，并形成不同長度的DNA片段。這些片段隨后可被電泳分開并顯示出來。下列說法錯誤的是（）A．這種測序方法需要引物和耐高溫的DNA連接酶B．電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥嘌呤結尾C．測得未知DNA的序列為5'-GATTCGAGCTGA-3'D．ddNTP與dNTP競爭的延長位點是核苷酸鏈的5'末端二、非選擇題（本題共4道試題，共50分。）25．GA3是一種由C、H、O三種元素構成的與赤霉素作用類似的植物生長調節劑，能促進莖伸長和種子萌發。GA3的廣泛施用會導致其在土壤中殘留，研究小組從長期施用GA3農田的土壤中篩選出了能降解GA3的菌株。據圖回答下列問題：（1）過程②是將稀釋的含有降解GA3的菌株接種到甲瓶培養液中，這樣做的目的是。（2）乙培養基中含有的唯一的碳源應該是，實際操作時，乙培養基上可能還有其他微生物，原因是。（3）振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快，原因是振蕩培養能提高培養液中的含量，同時可使菌體與培養液充分接觸，提高的利用率。（4）為調查土壤中能降解GA3的菌的數量，進行了如下實驗：下圖中3號試管中樣品液的稀釋倍數為倍，5號試管的結果表明每克土壤中的活菌數為個。26．馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒，莖尖離體培養大致過程如圖1所示，馬鈴薯莖尖外植體大小對苗的脫毒率和成活率的影響如圖2所示。請回答問題：（1）依圖1分析，馬鈴薯脫毒苗培養依據的主要原理是。將微莖尖接種在添加有等植物激素的培養基中，經過過程完成組織培養，獲得試管苗。對脫毒苗進行病毒檢測時，可采用方法檢測病毒的蛋白質。（2）由圖2可知，應大小為mm的莖尖外植體適宜馬鈴薯脫毒苗的培養。27．動物的某種退行性神經疾病由基因t突變為基因T導致。隨著生物工程技術的發展和基因編輯（CRISPR/Cas9）技術的出現，為治療該疾病提供了如下新思路?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用CRISPR/Cas9編輯基因時，Cas9蛋白依據sgRNA片段（不同的sgRNA可以識別不同的DNA序列），能精準識別并切割動物纖維細胞中的致病基因T，并在DNA連接酶的作用下將正?；騮連接到染色體DNA的相應位置上，獲得不含致病基因T的動物成纖維細胞?？梢?，sgRNA片段能夠精準識別致病基因T的核苷酸序列的原因是，CRISPR/Cas9還具有的作用。（2）過程①所利用的生物技術是，過程②的培養條件十分苛刻，需要無菌、無毒環境，充足的營養物質、適宜的溫度和pH；培養時，對氣體環境的要求是。過程④的培養基中需要添加，以促進ES細胞的增殖分化。（3）利用上述思路治療該退行性神經疾病，理論上不會產生免疫排斥反應，原因在于。28．由于豬的器官在生理形態上和人的器官非常接近，近年來應用豬的體細胞核移植技術研制人類基因疾病的動物模型，以及生產基因敲除豬用于人異種器官移植成為豬核移植相關研究的熱點方向。如圖為豬的體細胞核移植流程示意圖，請回答下列問題：（1）研究人員在用合成培養基對豬耳部成纖維細胞進行培養時，通常需加入等一些天然成分。（2）從卵巢中采集的卵母細胞需在體外培養至期才能用于體細胞核移植。除該方法外，采集卵母細胞還可采用超數排卵法，其具體做法是。（3）重構胚通常需培養至期，然后通過技術送入代孕母豬體內。為提高胚胎的利用率，還可采用技術對胚胎進行處理。（4）就豬的體細胞移植技術本身來講，雖然已經有多例體細胞克隆豬誕生，但總體的效率還是較低的，克隆豬的存活率只有1%或更低。研究表明，用組蛋白去乙?；敢种苿┍焖幔╒PA）處理重構胚能顯著提高其發育能力。從而大大提高巿隆效率。若想探究VPA處理重構胚的最適濃度，其實驗思路是。

答案解析部分1．【答案】C【解析】【解答】A、有氧呼吸的第三節階段需要氧氣的參與，有氧呼吸第第一、二階段和無氧呼吸均不需要氧氣參與，醋酸發酵過程需要氧氣的參與，③為有氧呼吸第三階段需要O2參與，過程④⑤為醋酸發酵需要O2參與，A正確；

B、當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌直接以葡萄糖為原料進行發酵，發生過程⑤，B正確；

C、過程②為無氧呼吸第二階段，④為醋酸發酵，二者所需要的微生物不同，最適溫度也不同，C錯誤；

D、酵母菌為兼性厭氧型生物，可以進行有氧呼吸也可以進行無氧呼吸，過程①②為無氧呼吸的兩個階段，場所均為細胞質基質，D正確。

故答案為：C。

【分析】果酒、果醋制作原理與發酵條件：果酒制作果醋制作菌種酵母菌醋酸菌發酵過程有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6+6O2→酶6CO2+6H2O；

無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產生酒精：C6H12O6→酶2C2H5氧氣、糖源充足時：

C6H12O6+2O2→酶2CH3COOH+2CO2+2H2O；

缺少糖源、氧氣充足時：

C2H5OH+O2→酶CH3COOH+H溫度一般酒精發酵18～25℃，繁殖最適為20℃左右最適為30～35℃氣體前期：需氧；后期：無氧需要充足的氧氣時間10～12天7～8天2．【答案】B【解析】【解答】A、①②③步驟需要注意無菌環境，操作時在酒精燈火焰旁進行，A正確；

B、步驟①中，待倒入的培養基后立即蓋上培養皿的皿蓋，冷卻之后倒置，B錯誤；

C、平板劃線法每次劃線前后都需要對接種環進行灼燒滅菌處理，C正確；

D、劃線結束之后，需要將平板進行倒置放置，并在培養基中培養，D正確。

故答案為：B

【分析】1、平板劃線法操作步驟：①將接種環放在火焰上灼燒，直到接種環燒紅；②在火焰旁冷卻接種環，并打開棉塞；③將試管口通過火焰；④將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環菌液；⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞；⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養皿；⑦灼燒接種環，待其冷卻后，從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重復以上操作，在三、四、五區域內劃線。注意不要將最后一區的劃線與第一區相連；⑧將平板倒置放入培養箱中培養。

2、稀釋涂布平板操作的步驟：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中；②取少量菌液，滴加到培養基表面；③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8~10s；④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養基表面。3．【答案】C【解析】【分析】分離土壤中分解尿素的細菌，培養基中要有尿素、瓊脂糖、葡萄糖，尿素給分解尿素的細菌提供氮源，不加硝酸鹽。4．【答案】C【解析】【解答】A、蠶豆瓣中含有豐富的營養，如糖類、蛋白質和脂質等，因而可提供微生物生長繁殖所需的碳源和氮源，A正確；B、溫度通過影響酶的活性影響細胞代謝，而鹽度過高可導致微生物失水，進而影響微生物的細胞代謝，即溫度與鹽度都影響微生物的生長繁殖，進而影響發酵產物的種類和含量，B正確；C、平板劃線法不能用于統計活細菌總數，可用稀釋涂布平板法統計活細菌的數目，C錯誤；D、根據統計結果可知新工藝發酵過程中霉菌和細菌在前期和中期的含量均高于傳統工藝，因而導致發酵產品中氨基酸態氮含量高于傳統工藝，因此甜瓣子風味提升，D正確。故答案為：C。

【分析】1、酶的特性：①高效性：酶的催化效率大約是無機催化劑的107-1013倍。②專一性：每一種酶只能催化一種或者一類化學反應。③酶的作用條件較溫和：在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低。

2、微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。5．【答案】B【解析】【解答】A、培養蛇干細胞時，所需的營養物質與植物細胞培養不完全相同，動物細胞培養需加入葡萄糖、血清等，植物細胞培養需加入蔗糖、植物激素等，A錯誤；B、不同細胞中基因的表達情況不同，因此蛇毒腺微型組織基因的表達與蛇胚胎干細胞不完全相同，B正確；C、分泌毒液的蛇毒腺微型組織細胞是蛇胚胎干細胞分裂分化形成的，蛇胚胎干細胞不能分泌毒液，C錯誤；D、由于不同細胞的結構和功能不同，因此培養蛇毒腺微型組織與哺乳動物細胞培養的條件不完全相同，D錯誤。故答案為：B。

【分析】1、動物培養條件：（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養液，以清除代謝廢物。（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質。（3）溫度和pH。（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養液的pH）。

2、動物細胞培養過程：取動物組織塊→用機械方法或胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。6．【答案】A【解析】【解答】植物體細胞雜交技術的目的是獲得雜種植株，A錯誤；在形成再生植株的過程中與植物組織培養相似的步驟是④⑤，B正確；原生質體融合成為一個新的雜種細胞的標志是雜種細胞再生出新的細胞壁，C正確；親本植物A的細胞與親本植物B的細胞兩兩融合后的細胞類型有AA、BB、AB3種，D正確。故答案為：A?！痉治觥恐参矬w細胞雜交技術：

1、植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。

2、過程：

（1）誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等。化學法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑。

（2）細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成。

（3）植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質。

3、意義：克服了遠緣雜交不親和的障礙。

4、分析題圖：圖示為種間植物細胞融合再生植物示意圖，其中①表示去除細胞壁獲取原生質體的過程；②表示誘導原生質體融合的過程；③表示再生出新的細胞壁的過程；④表示脫分化，⑤表示再分化形成雜種植株。7．【答案】D【解析】【解答】幼齡動物的組織細胞的分裂能力強，因此選擇幼齡動物的組織進行細胞培養，有利于獲得大量細胞；因為胚胎細胞的全能性較高，故答案為：胚胎細胞作為核供體進行核移植，可提高克隆動物的成功率；選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養，可獲得脫毒苗，原因是莖尖等分生組織中幾乎不含病毒；由于基因突變具有多害少利性，因此選擇植物的愈傷組織進行誘變處理，不一定可獲得優質的突變體。故答案為：D?！痉治觥?、動物細胞培養的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。

2、植物細胞工程技術的應用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產。8．【答案】B【解析】【解答】A、MⅡ期的卵母細胞細胞質中有促進細胞核全能性表達的物質，故過程①中選擇MⅡ期的卵母細胞有利于細胞核全能性恢復，A正確；

B、早期胚胎發育順序為桑葚胚、囊胚和原腸胚等過程，B錯誤；

C、過程③誘導分化的關鍵是利用特定條件誘導胚胎干細胞相關基因表達，C正確；

D、胚胎移植時受體需要進行同期發情處理，但不需要免疫抑制劑處理，子宮對同物種胚胎不發生免疫反應，D正確。

故答案為：B。

【分析】1、動物胚胎發育的基本過程：（1）受精場所是母體的輸卵管上段；（2）卵裂期；（3）桑葚胚；（4）囊胚；（5）原腸胚。

2、胚胎移植的生理學基礎：①動物發情排卵后，同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。②早期胚胎在一定時間內處于游離狀態。③受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫排斥反應。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。9．【答案】C【解析】【解答】A、受精過程中防止多精入卵的屏障是透明帶反應和卵細胞膜反應，A錯誤；

B、卵裂期細胞數目增多，體積變小，有機物含量減少，種類增多，B錯誤；

C、囊胚期的細胞出現了細胞分化，細胞分化不改變遺傳物質，C正確；

D、體外培養的動物細胞一般會表現細胞貼壁生長現象，但有的細胞不會，D錯誤。

故答案為：C。

【分析】1、動物胚胎發育的基本過程：

（1）受精場所是母體的輸卵管上段。

（2）卵裂期：細胞有絲分裂，細胞數量不斷增加，但胚胎的總體體積并不增加，或略有減小。

（3）桑葚胚：胚胎細胞數目達到32個左右時，胚胎形成致密的細胞團，形似桑椹，是全能細胞。

（4）囊胚：細胞開始出現分化（該時期細胞的全能性仍比較高）。聚集在胚胎一端個體較大的細胞稱為內細胞團，將來發育成胎兒的各種組織，中間的空腔稱為囊胚腔。

（5）原腸胚：有了三胚層的分化，具有囊胚腔和原腸腔。

2、受精作用過程：

（1）頂體反應：精子釋放頂體酶溶解卵丘細胞之間的物質，穿越放射冠；

（2）透明帶反應：頂體酶可將透明帶溶出孔道，精子穿入，在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止后來精子進入透明帶的生理反應[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障；

（3）卵黃膜的封閉作用：精子外膜和卵黃膜融合，精子入卵后，卵黃膜會拒絕其他精子再進入卵內的過程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障；

（4）精子尾部脫落，原有核膜破裂形成雄原核，同時卵子完成減二分裂，形成雌原核；

（5）雌、雄原核融合形成合子。

3、動物細胞培養過程：取動物組織塊→用機械方法或胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。10．【答案】A【解析】【解答】A、利用組織培養技術獲得的脫毒苗病毒含量少，但是沒有抗病毒的能力，A錯誤；

B、植物組織培養是無性繁殖方式，利用組織培養技術獲得的名貴蘭花的種苗，能保持親本的優良性狀，B正確；

C、植物組織培養技術應用于細胞產物的工廠化生產，如從培養的紅豆杉細胞中提取抗腫瘤藥物紫杉醇，C正確；

D、植物體細胞雜交技術可以克服生物遠緣雜交不親和的障礙，實現種間雜交獲得“白菜-甘藍”，D正確。

故答案為：A。

【分析】植物組織培養技術已經得到廣泛應用，包括：植物繁殖的新途徑（如微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（如單倍體育種、突變體的應用）、細胞產物的工廠化生產（如從培養的紅豆杉細胞中提取抗腫瘤藥物紫杉醇）。11．【答案】D【解析】【解答】從a到e中，適宜于牛的胚胎移植的時期有d桑葚胚、e囊胚，A正確；可從圖e的①內細胞團中分離出胚胎干細胞，B正確；圖e的③是滋養層，將來可發育成胎膜和胎盤，C正確；圖中b、c、d階段的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能，e階段的①內細胞團細胞也具有發育成完整胚胎的潛能，但e階段的③滋養層細胞已分化，不具有發育成完整胚胎的潛能，D錯誤。故答案為：D?！痉治觥颗咛グl育過程：

（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂，數量增加，胚胎總體積不增加。

（2）桑葚胚：32個細胞左右的胚胎。

（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔。

（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔[細胞分化在胚胎期達到最大限度。12．【答案】C【解析】【解答】若a是體細胞核移植技術，則①反映了動物體細胞的細胞核具有全能性；通過胚胎分割技術所獲得個體的基因型完全相同，但表型不一定完全相同，因為表型還受環境的影響；若b是體外受精技術，則②為試管動物，這為良種家畜快速大量繁殖提供了可能；①②③中作為供體的動物品種是珍稀的或存量少的雌、雄性動物，而受體是健康和具有良好的繁殖能力的雌性動物即可。【分析】1、動物體細胞核移植技術：（1）基本原理：動物細胞核具有全能性。（2）核移植分類：胚胎細胞核移植和體細胞核移植（3）選用MI期去核卵母細胞作受體細胞的原因：卵（母）細胞比較大，容易操作；卵（母）細胞細胞質多，營養物質豐富，含有促進細胞核全能性表達的物質。

2、體外受精是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完成受精過程的技術。

3、胚胎分割：（1）材料：發育良好，形態正常的桑椹胚或囊胚。（2）實質：胚胎分割可增加動物后代數目，其實質是動物的無性繁殖或克隆。（3）注意：對囊胚分割時，注意將內細胞團均等分割否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。13．【答案】B【解析】【解答】A、限制酶是從原核生物中分里純化出來的，DNA連接酶是從原核生物和病毒中分離純化的，A錯誤；

B、限制酶催化磷酸二酯鍵的斷裂，DNA連接酶催化磷酸二酯鍵的形成，B正確；

C、限制酶切割之后能在特定的位點產生黏性末端或者平末端，C錯誤；

D、DNA連接酶的底物是DNA片段，DNA聚合酶的底物是脫氧核苷酸，D錯誤。

故答案為：B。

【分析】幾種相關酶的比較：名稱作用部位作用結果限制酶磷酸二酯鍵將DNA切成兩個片段DNA連接酶磷酸二酯鍵將兩個DNA片段連接為一個DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯鍵將兩個脫氧核苷酸依次連接到單鏈末端DNA（水解）酶磷酸二酯鍵將DNA片段水解為單個脫氧核苷酸解旋酶堿基對之間的氫鍵將雙鏈DNA分子局部解旋為單鏈，形成兩條長鏈14．【答案】A【解析】【解答】A、一個DNA分子中，可能存在一個至多個酶a與酶b的識別序列，A正確；

B、由圖可知，酶a與酶b識別的序列雖然不同，但切出的粘性末端相同，相同的粘性末端能相互連接，B錯誤；

C、酶a與酶b切斷的化學鍵均為相鄰脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，C錯誤；

D、質粒是小型環狀DNA分子，用酶a切割有3個識別位點的質粒，可得到3種切割產物，D錯誤。

故答案為：A。

【分析】“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）

（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。

（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。

（3）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。15．【答案】C【解析】【解答】A、T4DNA連接酶既能連接粘性末端，又能連接平末端，A錯誤；

B、E.coliDNA連接酶能將雙鏈DNA片段黏性末端之間進行連接，B錯誤；

C、DNA連接酶能恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，C正確；

D、DNA連接酶可連接DNA雙鏈的磷酸二酯鍵，且不能使雙鏈延伸，D錯誤。

故答案為：C。

【分析】“分子縫合針”——DNA連接酶。兩種DNA連接酶（E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區別：E.coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。16．【答案】C【解析】【解答】A、由圖可知，標記基因為氨芐青霉素抗性基因，因此篩選1需要用氨芐青霉素培養基篩選出成功導入表達載體的農桿菌，A正確；

B、根據題干信息“報告基因的產物能催化無色物質K呈現藍色”可知，篩選2需要用無色物質K處理愈傷組織并篩選出呈現藍色的組織，B正確；

C、為使除草劑抗性基因G在農桿菌中高效表達，需要把目的基因片段插入到表達載體的啟動子和終止子之間，C錯誤；

D、為從個體水平上檢測圖中玉米植株A是否具有抗除草劑性狀，可采用的方法是用相應除草劑噴灑待測玉米植株，D正確。

故答案為：C。

【分析】基因工程技術的基本步驟︰（1）目的基因的獲取︰方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建︰是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩定存在，可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用。啟動子的本質是DNA片段，其為RNA聚合酶識別和結合的位點。(3)將目的基因導入受體細胞∶根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定∶分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定︰抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。17．【答案】B【解析】【解答】A、a過程是變性，高溫使DNA變性解旋，該過程不需要解旋酶的作用，A正確；

B、c過程是延伸，要用到的TagDNA聚合酶耐高溫，在高溫下不會失活，B錯誤；

C、DNA復制為半保留復制，如果把模板DNA的兩條鏈用15N標記，游離的脫氧核苷酸不標記，控制“94℃~55℃~72℃”溫度循環3次，則在形成的8個子代DNA中含有標記的DNA有2個，占25%，C正確；

D、PCR中由堿基錯配會導致基因中堿基對替換，引起的變異屬于基因突變，D正確。

故答案為：B。

【分析】PCR技術

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

（2）原理：DNA復制。

（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚臺酶(Taq酶)。

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴増中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。18．【答案】C【解析】【解答】A、若供體DNA提供prG基因，則II是已免疫的B細胞，即能產生特異性抗體的效應B細胞，形成的重組細胞才能制備單克隆抗體，A正確；

B、酶具有專一性，同種限制酶能識別相同的核苷酸序列，切割形成相同的黏性末端，B正確；

C、該過程涉及基因工程和動物細胞培養技術，沒有動物細胞融合的過程，C錯誤；

D、需對II進行克隆化培養和專一抗體檢測，才可以得到能無限增殖并能產生專一性抗體的雜交瘤細胞，D正確。

故答案為：C。

【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。19．【答案】D【解析】【解答】A、PCR技術中復性是當溫度下降到55℃時，兩種引物分別與兩條DNA模板鏈結合的過程，A錯誤；

B、dNTP作為擴增的原料會依次連接到3'端，B錯誤；

C、在一定范圍內，反應體系中引物的G、C堿基含量越高，其結合的特異性越強，但G、C過高，不利于退火，而且與相近序列配對的可能性比正常引物高，更容易產生非特異性擴增，C錯誤；

D因為組織細胞間的物質會吸附Mg2+，故原位PCR反應體系中使用的Mg2+濃度要比常規PCR高，D正確。

故答案為：D。

【分析】PCR技術

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

（2）原理：DNA復制。

（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚臺酶(Taq酶)。

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴増中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。20．【答案】A,B,D【解析】【解答】A、由分析可知，果酒發酵所需的最適溫度低于果醋，A錯誤；

B、過程①②在酵母菌細胞中發生的場所相同，都是細胞質基質，B正確；

C、過程⑤和過程④都需要氧氣，C錯誤；

D、參與果酒制作的微生物是酵母菌，為真核生物，含有線粒體，進行果醋發酵的微生物是醋酸菌，為原核生物，不含有線粒體，D正確。

故答案為：ABD。

【分析】1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進行酒精發酵。溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件，20℃左右，酒精發酵時，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發酵過程當中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2、醋酸菌是一種好氧細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當進行深層發酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。21．【答案】A,D【解析】【解答】A、平板上不含任何生長因子，若倒成平板后直接培養，出現菊落說明已被雜菊感染，因為該嗜熱菌不能在缺乏生長因子的培養基中生長，A正確；

B、制備平板時，先滅菌再倒平板，B錯誤；

C、圖中菌落生活在乙丙區域之間，說明同時需要乙和丙，C錯誤；

D、不同菌種所需生長因子不同，可利用生長圖形法篩選菌種，D正確。

故答案為：AD。

【分析】微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。22．【答案】A,B【解析】【解答】A、單克隆抗體制備過程中，雜交瘤細胞需要進行兩次篩選，第一次利用選擇培養基篩選出能在特定培養基生長且能無限增殖的雜交瘤細胞，第二次篩選可用抗原-抗體雜交的方法篩選出產生特異性抗體的雜交瘤細胞，雙雜交瘤細胞本身就是由兩個雜交瘤細胞融合而成，利用選擇培養基無法篩選出雙雜交瘤細胞AB，A正確；

B、雜交瘤細胞是由已免疫的B細胞和骨髓瘤細胞融合，無需接觸抗原就能產生抗體，B錯誤；

C、雜交瘤細胞是懸浮培養的細胞，細胞之間并未接觸，若要傳代培養，細胞培養液直接離心，去除上清液培養基，加入新鮮培養基即可，不用胰蛋白酶處理，C正確；

D、將雜交瘤細胞注射到小鼠腹水中培養，腹水作為天然培養基，為細胞提供各種生長條件，D正確。

故答案為：AB。

【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。23．【答案】A,D【解析】【解答】A、要獲得大量的卵母細胞，需用促性腺激素處理良種母牛，促進其超數排卵，雄性個體本身能獲得大量的精子，不需要激素處理，A錯誤；

B、對精子進行獲能處理：包括培養法和化學誘導法。對干嚙齒動物、家兔和豬等動物的精子，一般采用培養法，即將取自附睪的精子，放入人工配制的獲能液中，培養一段時間后，精子就可獲能；對于牛、羊等家畜的精子常采用化學法，即將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液，B錯誤；

C、要生產高產奶牛，可?、僮甜B層細胞處細胞做DNA分析性別鑒定，取雌性胚胎移植，C錯誤；

D、據題圖可知，轉基因牛D的培育可以經過b→f→g過程，D正確。

故答案為：AD。

【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑葚或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氨中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。24．【答案】A,C,D【解析】【解答】A、PCR測序需要引物和耐高溫的DNA聚合酶，A錯誤；

B、電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥嘌呤結尾，B正確；

C、由圖可知：測得未知DNA的序列為5'-TCAGCTCGAATC-3'，C錯誤；

D、ddNTP與dNTP競爭的延長位點是核苷酸鏈的3'末端，D錯誤。

故答案為：ACD。

【分析】PCR技術

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

（2）原理：DNA復制。

（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚臺酶(Taq酶)。

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴増中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。25．【答案】（1）富集培養GA3降解菌（2）GA3；有些微生物可利用空氣中的二氧化碳作為碳源（3）溶解氧；營養物質（4）104；1.7×109【解析】【解答】（1）將稀釋的含有降解GA3的菌株接種到甲瓶培養液中，目的是富集培養GA3降解菌，增大GA3降解菌的數。

（2）題意可知，GA3是一種由C、H、O三種元素構成的植物生長調節劑，培養基乙是為了獲得GA3的降解菌，故培養基中應以GA3為唯一的碳源，所以乙培養基屬于選擇培養基。由于有些微生物可利用空氣中的二氧化碗作為碳源，所以在選擇培養時，培養基上可能還有其他微生物。（3）振蕩培養可以增加液體培養基的溶解氧的含量，促進好氧型微生物的生長；同時還能使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率。

（4）圖中10g土樣加入無菌水定容至100mL，稀釋了10倍，取1mL加入1號試管(含有9mL無菌水)又稀釋了10倍，取1mL加入2號試管(含有9mL無菌水)又稀釋了10倍，取1mL加入3號試管(含有9mL無菌水)又稀釋了10倍，據此推測，丙圖中3號試管中樣品液的稀釋倍數為104倍；5號試管稀釋了106倍，根據計算公式：每克樣品中的菌株數=(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數，所以每克土壤中的活菌數為(168+175+167)÷3÷0.1x106=1.7x109。

【分析】1、培養基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產物的營養物質。營養物質歸納為碳源、氨源、生長因子、無機鹽和水。培養基按物理性質可分為固體培養基和液體培養基，液體培養基中加入凝固劑可以制成固體培養基；固體培養基一般用于微生物的鑒別、分離和計數，液態培養基常用于擴大化生產，觀察細菌運動。根據化學成分分為合成培養基、天然培養基等；根據用途分為選擇培養基、鑒別培養基。

2、統計菌落數目的方法：間接計數法(活菌計數法）①原理∶當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作∶a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30~300的平板進行計數。③計算公式：每克樣品中的菌株數=(c/V)×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數。26．【答案】（1）植物細胞的全能性；生長素和細胞分裂素；脫分化和再分化；抗原—抗體雜交（2）0.27【解析】【解答】（1）圖1表示的是無毒苗的培養過程，圖中馬鈴薯脫毒苗培養依據的主要原理是植物細胞的全能性。植物組織培養過程中需要在培養基中添加生長素和細胞分