生物技術實驗操作指導手冊及習題集姓名_________________________地址_______________________________學號______________________-------------------------------密-------------------------封----------------------------線--------------------------1.請首先在試卷的標封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細閱讀各種題目，在規定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.生物技術實驗操作的基本原則包括：

A.安全第一

B.精確操作

C.嚴謹記錄

D.以上都是

2.培養細菌常用的培養基成分不包括：

A.蛋白胨

B.瓊脂

C.葡萄糖

D.硫酸銅

3.DNA提取實驗中，用于溶解細胞膜和細胞器的緩沖液是：

A.TrisHCl緩沖液

B.NaCl溶液

C.乙醇

D.0.1MEDTA

4.以下哪種酶在PCR反應中用于DNA復制：

A.胞嘧啶脫氨酶

B.DNA聚合酶

C.限制性內切酶

D.DNA連接酶

5.轉基因植物中，常用的標記基因是：

A.綠色熒光蛋白基因

B.β半乳糖苷酶基因

C.抗生素抗性基因

D.以上都是

答案及解題思路：

1.答案：D

解題思路：生物技術實驗操作的基本原則應涵蓋安全、精確和記錄等方面，因此選項D“以上都是”是正確的。

2.答案：D

解題思路：蛋白胨、瓊脂和葡萄糖是培養細菌常用的培養基成分，而硫酸銅不是細菌生長所必需的，因此選項D是正確的。

3.答案：A

解題思路：TrisHCl緩沖液常用于調節pH值，并有助于溶解細胞膜和細胞器，因此選項A是正確的。

4.答案：B

解題思路：在PCR反應中，DNA聚合酶負責DNA的復制，因此選項B是正確的。

5.答案：D

解題思路：綠色熒光蛋白基因、β半乳糖苷酶基因和抗生素抗性基因都是常用的標記基因，因此選項D“以上都是”是正確的。二、填空題1.生物技術實驗操作中，無菌操作的基本原則是防止雜菌污染，保證實驗結果的準確性和可靠性。

2.DNA提取實驗中，破碎細胞常用的方法有研磨法、超聲波破碎法、酶解法等。

3.PCR反應的三個步驟分別是變性、復性、延伸。

4.轉基因技術中，常用的載體有質粒載體、噬菌體載體、病毒載體等。

5.生物技術實驗中，常用的緩沖液有TrisHCl緩沖液、磷酸鹽緩沖液（PBS）、硼酸緩沖液等。

6.限制性內切酶的識別序列通常是具有特定核苷酸序列的回文序列。

7.轉基因植物中，常用的標記基因是熒光素酶基因、抗生素抗性基因等。

8.生物技術實驗中，常用的消毒劑有70%乙醇、碘伏、甲醛等。

9.DNA測序的原理是雙鏈DNA分子中核苷酸序列的測定。

10.蛋白質工程中，常用的方法有定點突變、同源重組、基因合成等。

11.生物技術實驗中，常用的顯微鏡有光學顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡等。

12.生物技術實驗中，常用的電泳技術有瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

13.生物技術實驗中，常用的質粒提取方法有堿裂解法、酚氯仿法等。

14.生物技術實驗中，常用的PCR擴增方法有常規PCR、實時熒光定量PCR等。

15.生物技術實驗中，常用的細胞培養方法有懸浮培養、貼壁培養、原代培養等。

16.生物技術實驗中，常用的分子標記技術有PCRRFLP、SSR、SNP等。

17.生物技術實驗中，常用的基因編輯技術有CRISPR/Cas9、ZFN、TALEN等。

18.生物技術實驗中，常用的基因表達調控技術有啟動子替換、轉錄因子調控、RNA干擾等。

19.生物技術實驗中，常用的基因克隆技術有粘性末端連接、同源重組等。

20.生物技術實驗中，常用的基因轉移技術有農桿菌介導轉化、基因槍法、電穿孔法等。

答案及解題思路：

1.答案：防止雜菌污染，保證實驗結果的準確性和可靠性。

解題思路：無菌操作是生物技術實驗的基本要求，保證實驗結果的準確性和可靠性。

2.答案：研磨法、超聲波破碎法、酶解法等。

解題思路：根據DNA提取實驗的需求，選擇合適的細胞破碎方法。

3.答案：變性、復性、延伸。

解題思路：PCR反應的基本步驟包括這三個過程，了解每個步驟的作用。

4.答案：質粒載體、噬菌體載體、病毒載體等。

解題思路：了解轉基因技術中常用的載體類型。

5.答案：TrisHCl緩沖液、磷酸鹽緩沖液（PBS）、硼酸緩沖液等。

解題思路：掌握生物技術實驗中常用的緩沖液類型。

6.答案：具有特定核苷酸序列的回文序列。

解題思路：了解限制性內切酶識別序列的特點。

7.答案：熒光素酶基因、抗生素抗性基因等。

解題思路：掌握轉基因植物中常用的標記基因。

8.答案：70%乙醇、碘伏、甲醛等。

解題思路：了解生物技術實驗中常用的消毒劑。

9.答案：雙鏈DNA分子中核苷酸序列的測定。

解題思路：掌握DNA測序的基本原理。

10.答案：定點突變、同源重組、基因合成等。

解題思路：了解蛋白質工程中常用的方法。

11.答案：光學顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡等。

解題思路：掌握生物技術實驗中常用的顯微鏡類型。

12.答案：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

解題思路：了解生物技術實驗中常用的電泳技術。

13.答案：堿裂解法、酚氯仿法等。

解題思路：掌握生物技術實驗中常用的質粒提取方法。

14.答案：常規PCR、實時熒光定量PCR等。

解題思路：了解生物技術實驗中常用的PCR擴增方法。

15.答案：懸浮培養、貼壁培養、原代培養等。

解題思路：掌握生物技術實驗中常用的細胞培養方法。

16.答案：PCRRFLP、SSR、SNP等。

解題思路：了解生物技術實驗中常用的分子標記技術。

17.答案：CRISPR/Cas9、ZFN、TALEN等。

解題思路：掌握生物技術實驗中常用的基因編輯技術。

18.答案：啟動子替換、轉錄因子調控、