1DB43/TXXXXX—2022玉竹脫毒苗生產技術規程本標準規定了玉竹脫毒種苗生產技術要求。本標準適于湖南省玉竹脫毒種苗的生產。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB15618《土壤質量標準》GB3095《環境空氣質量標準》GB5084《農田灌溉水質標準》GB/T8321《農藥合理使用準則》《中藥材生產質量安全管理規范（試行）》《中華人民共和國藥典》（2015年版第一部）3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1外植體由活植物體上切取下來用于組織培養的組織或器官。3.2脫毒原原種苗利用組織培養等途徑獲得的試管苗，經檢測確認不攜帶規定檢測病毒且移栽成活后的植株。用于繁育原種苗。3.3脫毒原種苗用脫毒原原種苗，在隔離網條件下繁殖出的第一代苗。此過程也可以省去，用脫毒原原種苗直接在自然隔離的條件下生產脫毒生產種苗。3.4脫毒生產種苗用脫毒原種（或原原種）苗，在自然隔離條件下繁殖出的直接用于大田生產的種苗。4玉竹脫毒原原種苗的生產2DB43/TXXXXX—20224.1品種選擇根據當地栽培方式和市場需求選擇品種。促成或半促成早熟栽培選擇休眠淺的品種，露地栽培選擇休眠深的品種。4.2玉竹脫毒方法主要采用莖尖組織培養與物理方法相結合進行。4.2.1莖尖組織培養4.2.1.1培養基配置滅菌使用MS基本培養基配方附加不同種類和數量的激素，pH值5.8～6.0。將制備好的培養基溶液分裝于培養瓶，每瓶10ml～15ml，用硫酸紙、鋁箔或耐高溫塑膜扎緊，在1.2kgf/cm高壓鍋中消毒15min～20min，冷卻后備用。4.2.1.2采集外植體采樣最佳時間為4月～6月份晴天的上午，選擇無病蟲、品種純正的健壯植株，切取莖尖2cm～3cm，流水沖洗1h～2h。4.2.1.3剝取莖尖組織將表面清洗過的外植體置于超凈工作臺上，用70％乙醇表面消毒數秒后，用1.0％次氯酸鈉消毒10min～30min或0.1％升汞消毒8min～10min，之后用無菌水沖洗3～5次后接種。在無菌接種箱中的解剖鏡下用解剖刀挑取0.2mm～0.3mm的莖尖，接種于莖尖誘導培養基（MS+6-BA0.5~1.0mg/L+NAA0.1mg/L）中進行培養，每瓶接種一個莖尖。4.2.1.4培養條件溫度23℃~25℃,光照強度2000lx～3000lx，每天照光10h～12h。4.2.2繼代培養在無菌條件下，對確認的無病毒株系進行繼代增殖培養，培養基為MS+6-BA（0.3～0.5）mg/L+IBA0.1mg/L,培養條件同4.2.1.4增殖培養每20d～30d繼代一次，繁殖系數3～5倍。4.2.3生根培養選2cm～3cm高的小苗轉入1/2MS生根培養基進行生根培養，培養條件同4.2.1.4。生根培養4片葉以上，苗高4cm～6cm，根長3.0cm，5條根以上，可進行煉苗。4.2.4煉苗移栽4.2.4.1煉苗在煉苗間內，打開生根苗瓶口，自然環境條件下放置2～3天。4.2.4.2洗苗將培養瓶中經過煉苗處理的試管苗取出，清水小心洗凈根上的培養基。4.2.4.3基質配制3DB43/TXXXXX—2022基質采用沒有被使用過的蛭石、草炭按1：1配制，同時添加10％的有機肥，pH值5.5～6.5。4.2.4.4移栽移栽時間在10～11月份，在隔離網棚采用育苗床或營養缽、穴盤等育苗容器進行移栽。移栽初期溫度保持在18℃~25℃,濕度8590基質含水量7080適當遮蔭，2周后轉入正常管理，即為脫毒原原種苗。2～3個月后可移栽定植到大棚，進行原種苗繁育。5玉竹脫毒原種苗的繁育5.1產地環境5.1.1產地環境質量玉竹苗生產的產地環境條件應符合GB15618和GB3095的規定。5.1.2土壤條件土層深厚，地形平坦，排灌方便，結構疏松肥沃的微酸性或中性壤土田塊，3年內未種植過玉竹。5.3整地施肥5.3.1施肥原則施用的肥料應是在農業行政主管部門已經登記或免于登記的肥料和各種農家肥。限制使用含氯復合肥。不準施用未經無害化處理的城市廢棄物制成的肥料。5.3.2施肥每667m2施農家肥4000kg～5000kg，過磷酸鈣肥30kg或有機復合肥20kg，深翻20cm。5.4玉竹脫毒原種苗定植5.4.1種苗選擇使用品種純正、健壯、無病蟲害的脫毒草莓原原種苗。5.4.2定植時間春季3～4月份，當日平均氣溫達到10℃以上時定植。5.4.3定植方式按行距30cm～40cm開溝，按株距15cm～20cm定植。6田間管理6.1中耕除草玉竹苗高20cm左右進行除草管理6.2肥水管理4DB43/TXXXXX—2022保持土壤濕潤，并及時清溝瀝水，出齊苗后，分別在苗期、旺長期、現蕾期每畝施用腐熟的家禽糞水600kg或復合肥45kg。6.3冬季管理每年12月～翌年2月割除雜草及玉竹地上部分，徹底清園。畦面撒施800kg/畝左右腐熟農家肥，20kg/畝左右復合肥，蓋土厚度1cm～2cm,并蓋稻草或玉米秸稈。7檔案管理7.1資料記錄玉竹脫毒種苗生產全過程應按《中藥材生產質量安全管理規范（試行）》規定詳細記錄，見附錄A。7.2檔案管理所有基礎資料及產區生產管理記錄均應建立檔案，并專管，具備條件的應建立計算機檔案管理。5DB43/TXXXXX—2022（資料性性）玉竹脫毒苗栽培管理登記表編號栽植地點海拔緯度經度坡向坡度面積土壤類型整地方式種植時間種植密度底肥追肥病蟲害防治采收時間根莖重