第13章遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷由于遺傳病的治療還沒有理想的方法，目前臨床遺傳的重點是如何診斷遺傳病，特別是產前診斷，以達到防止有遺傳缺陷的患兒出生。遺傳病診斷方法除普遍性診斷原則（即通過對病史、癥狀、體征并進行必要的輔助性檢查外，還必需要有遺傳學的特殊診斷手段（家系分析、染色體檢查、膚紋分析、攜帶者的檢出等）。ch13遺傳病的診斷遺傳病診斷的分類臨床上的遺傳病診斷主要包括：①產前診斷②癥狀前診斷③現癥患者診斷（prenataldiagnosis）ch13遺傳病的診斷是醫務工作者根據已出現癥狀的患者的各種臨床表現進行分析，并進行疾病的診斷和遺傳方式的判斷，是遺傳病臨床診斷的主要內容。第一節現癥患者診斷ch13遺傳病的診斷一、常規臨床診斷1、病史遺傳病大多有家族聚集現象,因此病史的采集尤為重要。采集過程中要本著準確和詳盡的原則。除詢問一般病史外，應著重患者的家族史、婚姻史和生育史。如流產史、死胎、兒童的收養、過繼、近親婚配和非婚生育等情況。對于一些先天性畸形，還需要詳細詢問懷孕時父母身體健康狀況和年齡、孕早期是否有病毒感染史、致畸物接觸史以及是否順產等有關資料。ch13遺傳病的診斷2、癥狀和體征遺傳病有和其它疾病相同的體征和癥狀，往往又有其本身特異性癥侯群，為診斷提供初步線索。如：①智力發育不全伴有特殊腐臭尿液苯丙酮尿癥②智力發育不全伴有白內障，肝硬化半乳糖血癥③智力低下伴有眼距寬、眼裂小、外眼角上斜先天愚型ch13遺傳病的診斷大部分遺傳病都是一般臨床癥狀和該病特有的臨床癥狀混雜，需要臨床醫生在實踐中積累經驗，分出主要矛盾、次要矛盾，結合病史、家族史和實驗室檢查確診！ch13遺傳病的診斷二、系譜分析系譜分析是臨床醫生在診斷遺傳病時應掌握的一項基本功。系譜分析的作用①有助于區分單基因病屬于哪一種遺傳方式，以及患病風險的計算；②有助于區分某些表型相似的遺傳病，以及同一遺傳病的不同類型，也可鑒別由于遺傳異質性而出現的不同遺傳方式。ch13遺傳病的診斷系譜的系統性、完整性和可靠性。完整的系譜要包括三代以上各成員的患病資料。

有些遺傳病家系除先證者外，家庭中找不到其他患者，此時應考慮是否為新的基因突變。對系譜的分析要注意區別：孟德爾遺傳病、非孟德爾遺傳病、遺傳異質性和一些特殊的遺傳現象。系譜分析注意事項ch13遺傳病的診斷三、細胞遺傳學檢查染色體檢查亦稱核型分析，是確診染色體病的主要方法。隨著顯帶技術的應用以及高分辯率染色體顯帶技術的出現和改進，能更準確地判斷和發現更多的染色體數目和結構異常綜合征，還可以發現新的微畸變綜合征。ch13遺傳病的診斷主要取自胎兒的皮膚、臍帶血、受精卵卵裂細胞、絨毛和羊水中胎兒脫落細胞從而進行產前的染色體診斷；亦可取患者的外周血和身體的各種組織進行現癥病人的檢查。①標本來源ch13遺傳病的診斷★②染色體檢查的適應證智能低下、生長遲緩或伴有其他先天畸形者；夫婦之一有染色體異常，如平衡易位、嵌合體等；家族中已有染色體異常或先天畸形的個體；多發性流產婦女及其丈夫；原發性閉經和男女不育癥者；34歲以上的高齡孕婦（產前診斷）。兩性內外生殖器畸形者；身材高大，性情粗暴的男性；惡性血液病患者；長期接受Ｘ線、電離輻射的人員。ch13遺傳病的診斷性染色質檢查性染色質（X染色質、Y染色質）檢查方法簡單，不僅可以①鑒別性別，還可用于②疑為兩性畸形或性染色體數目異常的疾病診斷或產前診斷。發根鞘細胞，皮膚或口腔上皮細胞，女性的陰道上皮細胞，也可取自絨毛和羊水的胎兒脫落細胞。標本來源ch13遺傳病的診斷四、生化檢查基因突變引起的單基因病往往表現在酶和蛋白質的質和量的改變或缺如。因此，酶和蛋白質的定性定量分析是診斷單基因病或分子代謝病的主要方法。ch13遺傳病的診斷臨床上經常應用的生物化學檢測方法是檢測酶的缺陷和代謝中間產物。產前診斷中常采集絨毛、羊水、臍帶血和皮膚。新生兒的篩查最常用的標本是血和尿。測定患者尿中苯丙酮酸、苯乙酸濃度或血清中苯丙氨酸的濃度是否增高，可獲知是否缺乏苯丙氨酸羥化酶，從而診斷是否患有苯丙酮尿癥。

苯丙酮尿癥可使患兒神經系統受到不可逆轉損害，如能早期發現并在出生后3－6周內開始治療，可使患兒正常發育。舉例ch13遺傳病的診斷五、基因診斷基因診斷是利用DNA重組技術直接從DNA水平檢測類遺傳性疾病的基因缺陷。概念特點A、針對直接病因診斷；B、目的基因無組織和發育特異性ch13遺傳病的診斷分子雜交PCR及相關技術DNA測序基因芯片技術基因診斷方法ch13遺傳病的診斷分子雜交是根據堿基互補配對的原則，利用標記探針鑒定DNA或ＲＮＡ中特定基因順序的一種方法。PCR技術是在體外快速擴增特異性DNA片斷地技術，使能夠達到足夠分析的純度和量。PCR的模板DNA可以來自一個細胞，一根頭發、一滴精斑等都可以得到有效的擴增。ch13遺傳病的診斷Southernblotch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷限制性片段長度多態性

（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）人群中不同個體基因的核苷酸序列存在差異，稱DNA多態性。DNＡ序列上發生變化而出現或丟失某一限制性酶切位點，使酶切產生的片段長度和數量發生變化稱為RFLP。ch13遺傳病的診斷鐮狀細胞貧血(HbS)：第5～7位密碼子MstⅡ：CCTNAGG

A：CCTGAGGAG

S：CCTGTGGAG

A

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S1.2Kb

0.2Kb1.40Kb1.20Kb0.20Kbch13遺傳病的診斷DNA自動測序儀生成的序列DNA自動測序儀采用4種不同顏色的熒光分別標記4種雙脫氧核苷酸，基本實現了測序自動化。ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷DNA芯片指把成千上萬個寡核苷酸或cDNA探針密集、規律地排列在1cm2大小的硅片或玻璃芯片上，容量可達20～40萬個基因探針。將熒光標記的DNA或cDNA樣品送到在芯片上與探針雜交，通過激光共聚焦顯微鏡獲取信息,以計算機系統對熒光信號做出比較和檢測，可迅速得出所需的信息，比常規方法快幾十到幾千倍。

ch13遺傳病的診斷DNAmicroarraych13遺傳病的診斷Huntington舞蹈病：患者好發年齡在40歲左右，此時患者已經生兒育女，很有可能將致病基因傳給子代。如能在可疑雜合子生育之前就作出診斷，就能避免影響子代。主要針對某些常染色體顯性遺傳病的雜合子個體，患者往往發病年齡延遲。如第二節癥狀前診斷ch13遺傳病的診斷又稱宮內診斷，是對胚胎或胎兒在出生前是否患有某種遺傳病或先天畸形作出準確的診斷。第三節產前診斷ch13遺傳病的診斷一、產前診斷的適應證有高風險和危害較大的遺傳??；①染色體?。虎谔囟溉毕菟碌倪z傳性代謝病；③可進行DNA檢測的遺傳?。虎芏嗷蜻z傳的神經管缺陷；⑤有明顯形態改變的先天畸形。ch13遺傳病的診斷35歲以上的高齡孕婦或夫婦之一有明顯致畸因素接觸史；夫婦之一有染色體數目或結構異常者；或曾生育過染色體病患兒的孕婦；已知或推測孕婦是AR或XR攜帶者；曾生育過某種單基因病遺傳病患兒的孕婦。曾生育過先天畸形（尤其是神經管畸形）的孕婦；有原因不明的自然流產，畸胎，死產及新生兒死亡的孕婦；★適應證ch13遺傳病的診斷X射線檢查主要用于檢查18周以后胎兒骨骼先天畸形。X射線對胎兒有一定影響，現已極少使用。二、產前診斷的方法ch13遺傳病的診斷B超檢查是一項簡便對母體無痛無損傷的產前診斷方法。B超應用最廣。可用于多胎妊娠，羊水過多，無腦兒、脊柱裂、腦膜膨出、多囊腎、肢體短小等發育遲緩的診斷。利用超聲波還可直接對胎心和胎動進行動態觀察，并可攝像記錄分析，亦可作胎盤定位，選擇羊膜穿刺部位，可引導胎兒鏡操作.。ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷胎兒鏡又稱為羊膜腔鏡或宮腔鏡，是一種帶有羊膜穿刺的雙套光導纖維內窺鏡?？捎趹言?5~21周進行操作。主要用于胎兒血的取樣、活檢和產前診斷。也可對胎兒形態異常進行直接觀察，此外還可判定胎兒性別和對某些遺傳病進行宮內治療。該技術如果操作不當，會引起流產、母體免疫反應等，所以應用受到一定的限制。ch13遺傳病的診斷羊膜穿刺術亦稱羊水取樣。抽取羊水最佳時間是妊娠16-18周，因為此時羊水量多、胎兒浮動，穿刺時進針容易，且不易傷及胎兒。目前，羊膜腔穿刺術是胎兒產前診斷最常用、最有效手段之一ch13遺傳病的診斷羊膜穿刺術：ch13遺傳病的診斷絨毛吸取術可在B超監視下經宮頸部取樣，一般于妊娠7-9周進行。絨毛枝經處理或經短期培養后進行染色體分析、酶和蛋白質檢測和基因分析。優點是取樣時間早，一旦作出明確診斷，需要進行選擇性流產時，不會給孕婦帶來更多的損傷和問題。ch13遺傳病的診斷絨毛吸取術ch13遺傳病的診斷臍帶穿刺術在B超引導下經抽取胎兒臍靜脈血，一般于孕中期、孕晚期（17~22周）進行。臍血可作染色體或血液學各種檢查，亦可用于因羊水細胞培養失敗，DNA分析無法診斷而能用胎兒血漿或血細胞進行生化檢測的疾病，或在錯過絨毛和羊水取樣時機下進行。ch13遺傳病的診斷孕婦外周血分離胎兒細胞這是一項非創傷性產前診斷技術，并易于被孕婦接受。

胎兒循環中的淋巴細胞，粒細胞，有核紅細胞等可以通過胎盤屏障滲透漏入母體血液循環，一般在妊娠第5-6周即可出現，其中有核紅細胞是最佳侯選細胞。但在母體外周血細胞中胎兒細胞僅占1/105-1/106

，如何從中有效識別和富集胎兒細胞是一個尚待解決的問題。ch13遺傳病的診斷植入前診斷是利用微操作技術和DNA擴增技術對胚泡植入前進行檢測。植入前(著床前)遺傳診斷適用于體外受精試管嬰兒ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷體外受精和

胚胎移植（in-vitrofertilizationembryotransfer,IVF-ET）1978年世界第一例試管嬰兒誕生。人類體外受精-胚胎移植方法的建立。ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷胚胎移植前遺傳病診斷

preimplantationgeneticdiagnosis,PGDPGD是在體外受精技術、分子生物學和顯微操作的基礎上，對受精三天后的胚胎在種植前，檢查其正常后