全國艾滋病檢測技術規范

NationalGuidelineforDetectionofHIV/AIDS

（2009年修訂版）

中國疾病預防控制中心

二OO九年九月

全國艾滋病檢測技術規范

NationalGuidelineforDetectionofHIV/AIDS

（2009年修訂版）

中國疾病預防控制中心

二OO九年九月

II

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艾滋病在我國的流行已有二十余年，隨著感染者不斷增加、感染人群的變化和臨

床病人的日益增多，艾滋病檢測工作量逐漸加大，新的監測和檢測需求也不斷增加，

艾滋病檢測實驗室已遍及全國各級醫療、疾病預防控制、采供血、婦幼保健機構，出

入境檢驗檢疫、軍隊等各個系統。近幾年，為了適應基層艾滋病檢測的需要，一些沒

有條件建立規范的艾滋病檢測實驗室的鄉鎮衛生院，也陸續建起了艾滋病檢測點。遍

布全國的實驗室網絡為艾滋病防治工作提供了重要而堅實的基礎。在新的形勢下，為

了更加有效地支持艾滋病監測、咨詢檢測（包括VCT和PITC）、新生兒感染早期診斷

和抗病毒治療工作，根據《關于艾滋病抗病毒治療管理工作的意見》、《中國預防與控

制艾滋病中長期規劃（1998—2010年）》和“四免一關懷”等重要方針政策，在向各

省、市征求意見基礎上，在“全國艾滋病檢測實驗室審評和技術指導專家組”的參與

下，中國疾病預防控制中心性艾滋病預防控制中心對《全國艾滋病檢測技術規范（2004

年版）》進行修改、增補和完善后，制定出《全國艾滋病檢測技術規范（2009年版）》，

使其既能滿足目前艾滋病檢測工作的實際需要，又能體現檢測技術的發展。

本次主要對以下兒個方面內容進行了修改、增補和完善：（1）在樣品的采集和處

理中，增加了濾紙干血斑樣品、快速檢測樣品的采集和處理，用于CD4+/CD8+T淋巴

細胞測定樣品、尿液和唾液樣品的采集和處理；（2）在HIV抗體檢測中，增加了免疫

熒光法和化學發光法，進一步明確了不同情況下的檢測策略;（3）在HIV核酸檢測中，

增加了HIV感染產婦所生嬰兒HIV感染早期診斷檢測流程和適用于窗口期的集合核酸

檢測方法；（4）根據臨床治療需求，增加了HIVT的耐藥檢測；（5）進一步完善了艾

滋病檢測實驗室安全防護和艾滋病檢測實驗室的質量管理，使其更加符合目前艾滋病

防治工作的需求，更加具有可操作性；（6）考慮到技術發展和新的需求，增加了HIV-1

新近感染檢測和HIVT的分離培養技術。

修訂后的《規范》共九章，包括：樣品的采集和處理、HIV抗體檢測、HIVT抗

原檢測、HIV核酸檢測、HIV-1耐藥檢測、CD4+和CD8+T淋巴細胞檢測、HIV-1的

分離培養、實驗室生物安全、艾滋病檢測實驗室的質量管理。

本《規范》上報衛生部，經獲準由中國疾病預防控制中心發至全國艾滋病檢測實

in

驗室及有關單位。本《規范》將為國家、衛生部與財政部等部委下發的關于艾滋病防

治工作的各項政策法規的有效實施提供強有力的技術支持，并具體指導艾滋病檢測實

驗室技術人員開展日常工作。

本《規范》起草單位：中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心。

本《規范》參加編寫單位：中國人民解放軍軍事醫學科學院、上海市疾病預防控

制中心、中國醫科大學、北京出入境檢驗檢疫局、北京市疾病預防控制中心、四川省

疾病預防控制中心、浙江省疾病預防控制中心、中國生物制品檢定所、衛生部臨床檢

驗中心、中國醫學科學院、天津市疾病預防控制中心、河南省疾病預防控制中心、福

建省疾病預防控制中心。

本《規范》編寫組人員：蔣巖、汪寧、李敬云、鐘平、康來儀、尚紅、邵一鳴、

肖瑤、朱紅、邢文革、姚均、潘品良、邱茂峰、邢玉蘭、秦光明、郭志宏、王佑春、

申子瑜、季陽、強來英、朱效科、王哲、嚴延生、朱關福。

本《規范》主要國際咨詢專家：世界衛生組織OsborneConnie,張嵐。美國疾病

預防控制中心GAP項目BulteryMarc,Chin-YihOu。克林頓基金中國艾滋病項目

TrevorPetero

本《規范》編寫工作聯系人：肖瑤

本《規范》自發布之日起實施，同時終止《全國艾滋病檢測技術規范（2004年版）》。

本《規范》適用于全國所有的艾滋病檢測實驗室。

本《規范》解釋權屬于中國疾病預防控制中心。

IV

目錄

第一章樣品的采集和處理.............................................................1

1范圍...........................................................................1

2規范性引用文件................................................................1

3樣品種類及相應的用途..........................................................1

4操作步驟.......................................................................1

4.1采樣前準備.............................................................1

4.2采集和處理樣品.........................................................2

4.3樣品的保存..............................................................3

4.4樣品的運送..............................................................3

4.5樣品的接收..............................................................3

第二章HIV抗體檢測..................................................................5

1范圍...........................................................................5

2規范性引用文件................................................................5

3HIV抗體檢測實驗室要求.......................................................5

4HIV抗體檢測的目的和要點.....................................................5

4.1HIV抗體檢測的目的....................................................5

4.2HIV抗體檢測的要點.....................................................5

5以診斷為目的的檢測策略.......................................................6

5.1常規HIV抗體檢測的方法和程序.........................................6

5.2其它HIV抗體檢測的方法和程序.........................................9

6以監測為目的的檢測策略.......................................................13

6.1適用范圍..............................................................13

6.2檢測程序及結果報告.....................................................13

7以血液篩查為目的的檢測策略..................................................14

8艾滋病檢測實驗室檢測信息上報................................................14

9質量控制......................................................................15

V

9.1抗體檢測的統計學室內質量控制.........................................15

9.2快速檢測質控...........................................................18

第三章HIV-1抗原檢測..............................................................19

1范圍.........................................................................19

2規范性引用文件...............................................................19

3HIV-1P24抗原檢測的意義....................................................19

4實驗室要求...................................................................19

5檢測方法及程序..............................................................19

5.1試劑...................................................................19

5.2樣品...................................................................19

5.3定性檢測...............................................................19

5.4定量檢測...............................................................19

5.5結果報告和解釋........................................................20

6質量保證和質量控制...........................................................20

第四章HIV核酸檢測................................................................21

1范圍.........................................................................21

2規范性引用文件..............................................................21

3核酸檢測的意義..............................................................21

3.1早期診斷.............................................................21

3.2疑難樣本的輔助診斷...................................................21

3.3遺傳變異監測..........................................................21

3.4耐藥性監測............................................................22

3.5病程監控及預測........................................................22

3.6指導抗病毒治療及療效判定.............................................22

4HIV核酸檢測實驗室要求......................................................22

4.1實驗室分區和功能.....................................................22

4.2實驗室人員和要求......................................................23

4.3實驗室設施和設備......................................................23

4.4實驗室生物安全........................................................23

4.5防止實驗室核酸殘余(Carry-over)污染措施............................23

4.6廢棄物處理制度........................................................24

5HIV核酸檢測方法及程序.......................................................24

5.1HIV核酸定性檢測......................................................24

5.2HIV核酸定量檢測......................................................25

5.3集合核酸定性檢測(PoolingPCR)....................................27

5.4嬰幼兒HIV感染核酸檢測...............................................28

6質量保證和質量控制..........................................................29

6.1實驗室分區和環境......................................................29

6.2儀器設備質量控制......................................................30

6.3檢測過程質量控制......................................................30

6.4外部質量控制.........................................................30

第五章HIV-1耐藥檢測.............................................................31

1范圍..........................................................................31

2規范性引用文件..............................................................31

3HIV-1耐藥檢測的意義.........................................................31

3.1耐藥監測.............................................................31

3.2耐藥檢測..............................................................31

4HIV-1耐藥檢測實驗室要求.....................................................31

4.1實驗室功能分區........................................................31

4.2人員...................................................................31

4.3設施和設備............................................................31

5HIV-1耐藥檢測方法及程序....................................................32

5.1方法....................................................................32

5.2試劑............................................................32

5.3擴增目的基因片段及測序...............................................32

5.4耐藥分析和結果報告....................................................33

6質量保證與質量控制..........................................................33

VII

6.1室內質控................................................................33

6.2實驗室能力驗證..........................................................34

第六章CD4+和CD8+T淋巴細胞檢測.................................................35

1范圍.........................................................................35

2規范性引用文件...............................................................35

3CD4+和CD8+T淋巴細胞檢測的意義............................................35

4CD4+和CD8+T淋巴細胞檢測實驗室要求........................................36

4.1人員...................................................................36

4.2設施和設備.............................................................36

4.3功能分區...............................................................36

5常規CD4+和CD8+T淋巴細胞檢測的方法和程序................................36

5.1樣品采集、運輸和接收..................................................36

5.2方法...................................................................37

5.3實驗資料的記錄........................................................37

5.4結果報告...............................................................37

6質量控制.....................................................................38

第七章HIV-1的分離培養...........................................................39

1范圍..........................................................................39

2規范性引用文件..............................................................39

3HIV-1分離的意義.............................................................39

4實驗室要求...................................................................39

4.1實驗室.................................................................39

4.2設備...................................................................39

4.3材料...................................................................39

5HIV-1分離的方法及程序.......................................................39

6質量保證和質量控制...........................................................40

第八章實驗室生物安全..............................................................41

VIII

1范圍..........................................................................41

2規范性引用文件..............................................................41

3HIV的生物危害...............................................................41

4HIV相關檢測的生物安全級別..................................................41

5生物安全保證措施............................................................41

5.1建立安全制度..........................................................41

5.2培訓和管理............................................................42

5.3個人保健和防護.......................................................42

5.4安全操作..............................................................43

5.5使用利器注意事項.....................................................44

6污染物處理...................................................................44

7意外事故處理.................................................................44

8職業暴露后預防..............................................................45

8.1局部急救處理.........................................................46

8.2對暴露感染的危險進行評估.............................................46

8.3確定是否需要藥物預防及其方案........................................46

8.4暴露后預防方案........................................................48

8.5暴露后預防的時間.....................................................48

8.6暴露后預防的監測.....................................................48

8.7藥品儲備點的建立及管理...............................................49

第九章艾滋病檢測實驗室質量管理...................................................50

1范圍.........................................................................50

2規范性引用文件...............................................................50

3質量保證.....................................................................50

3.1行政支持...............................................................50

3.2人員培訓...............................................................50

3.3環境條件...............................................................50

3.4樣品采集、運送和處理..................................................51

3.5檢測方法和試劑的選擇.................................................51

IX

3.6設備維護與校準........................................................51

3.7實驗耗材...............................................................52

3.8文件和文件管理........................................................52

4質量控制.....................................................................53

5質量評價.....................................................................53

5.1內部質量評價..........................................................54

5.2外部質量評價...........................................................54

6診斷試劑臨床質量評估........................................................56

6.1評估目的...............................................................57

6.2參考試劑的選擇........................................................57

6.3考評盤的制備..........................................................57

6.4考評程序...............................................................57

附表1HIV抗體篩查報告...........................................................59

附表2HIV抗體復檢檢測單.........................................................60

附表3HIV抗體確證檢測報告單.....................................................61

附表4HIV抗體替代策略檢測報告單................................................62

附表5流行病學監測HIV抗體檢測報告單............................................63

附表6艾滋病病毒抗體檢測數及陽性人數統計報表....................................64

附表7CD4+T淋巴細胞檢測結果報告................................................65

附表8HIV-1耐藥基因型檢測報告..................................................66

附表9艾滋病職業暴露個案登記表...................................................68

附表10艾滋病防治工作人員職業暴露事故匯總表.....................................71

X

全國艾滋病檢測技術規范

第一章樣品的采集和處理

1范圍

本章規定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）檢測的全血、血清、血漿、細胞、唾液、尿液以及

濾紙干血斑（DBS）樣品的采集利處理方法，適用于HIV抗體檢測、抗原檢測、核酸檢測、耐藥

檢測,CD4+和CD8+T淋巳細胞測定和HIV分離培養。

2規范性引用文件

《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準》中華人民共和國衛生行業標準WS293-2008

《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴細胞檢測質量保證指南（試行）》（中國疾病預

防控制中心，2006年2月）

《HIV-1病毒載量測定及質量保證指南（試行）》（中國疾病預防控制中心，2008年2月）

GuidelinesforUsingHIVTestingTechnologiesinSurveillanceWHO/CDS/CSR/EDC/2008

《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規定》，衛生部第45號令2006

年2月1日

3樣品種類及相應的用途

3.1全血、血清、血漿、唾液、尿液以及DBS樣品可用于HIV抗體檢測。

3.2抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴細胞測定。

3.3血漿可用于H1VT病毒我量、基因型及耐藥檢測。DBS樣品可用于H1V-1基因型及耐藥檢測。

3.4全血、血漿、淋巴細胞富集液、外周血淋巴細胞（PBMC）及DBS樣品可用于HIV核酸的定

性檢測。

3.5PBMC、全血、淋巴細胞富集液等可用于HIVT分離培養。

4操作步驟

4.1采樣前準備

根據檢測項目的具體要求，確定采集樣品的種類、處理、保存及運輸的時限和方法，按照臨

床采血技術規范的要求操作，遵守生物安全要求（參見本規范第八章實驗室生物安全）。

要檢查所需物品是否已備齊，是否在有效期內，有無破損，是否足量，特別應檢查受檢者信

息與樣品容器表面的標記是否一致，并注明樣品采集時間。選擇合適的室內（外）采血空間，受

檢者坐（臥）于合適的位置，準備采血用具、皮膚消毒用品、采血管及試管架、硬質廢棄物容器

等。

4.1.1樣品的編碼和記錄

4.1.2應制定樣品編碼的標準操作程序（SOP）,規定樣品編碼的原則和方法，為樣品制定唯一

全國艾滋病檢測技術規范

性編碼（編號），保證其唯一性。

4.1.3采血前，先對裝有樣品的離心管或濾紙進行標記，核對后編碼。要將標簽貼在試管的側

面，最好使用預先印制好的、專門用于冷凍儲存的耐低溫標簽。

4.1.4應使用專門的樣品記錄本或登記表記錄樣品，同時錄入電腦保存。

4.2采集和處理樣品

4.2.1血液

4.2.1.1抗凝全血：消毒局部皮膚，用加有抗凝劑（EDTA鈉鹽或鉀鹽、枸橡酸鈉、肝素鈉）的

真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉移至加有抗凝劑的試管中，輕輕

顛倒混勻6?8次，備用。

4.2.1.2末梢全血：消毒局部皮膚（成人和1歲以上兒童可選擇耳垂、中指、無名指或食指。1

歲以下兒童采用足跟部）。用采血針刺破皮膚，用無菌紗布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，備

用。

4.2.1.3血漿：將采集的抗凝全血1500?3000r/min離心15min,上層即為血漿，吸出置于合適

的容器中，備用。

4.2.1.4血清：根據需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取5?10ml靜脈血，室溫下自

然放置1?2h,待血液凝固、血塊收縮后再用1500?3000r/min離心15min,吸出血清，置于合

適的容器中，備用。

4.2.1.5淋巴細胞富集液：將采集的抗凝全血1500?3000r/min離心15min,吸取血漿層下的

淋巴細胞富集液，置于合適的容器中，備用。

4.2.1.6PBMC：使用淋巴細胞分離液，進行密度梯度離心，吸出PBMC層，備用。

4.2.1.7根據檢測要求選用適當的抗凝劑，如CD4+和CD8+T淋巴細胞測定可選用EDTA鈉鹽或鉀

鹽、枸檬酸鈉、肝素鈉，HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測可選用EDTA鈉鹽或鉀鹽或枸椽酸鈉。

4.2.1.8樣品采集后處理、保存、運輸的時限和條件，因不同的檢測項目而異，應參見不同檢

測項目要求。

4.2.1.9采血完成后的穿刺針頭必須丟棄于尖銳危險品容器里，妥善處理，防止發生職業暴露。

4.2.2濾紙干血斑

4.2.2.1根據需要，可將采集的各種血液樣品制備成濾紙干血斑，保存、運輸及檢測。最常用

的是用抗凝全血、末梢全血和血漿制備濾紙干血斑。

4.2.2.2用移液器從樣品管中吸取lOO^L抗凝全血（或血漿）樣品，對準濾紙印圈的中心處，

將樣品滴在濾紙上，或將穿刺后自皮膚傷口流出的末梢全血直接滴加在濾紙印圈的中心處。

4.2.2.3根據需要，連續在數個印圈上滴加樣品。

4.2.2.4于室溫下自然干燥至少4小時（潮濕氣候下至少干燥24小時），不要加熱或堆疊血斑，

勿與其它界面接觸。

4.2.2.5血斑充分干燥后，將其放入密封袋中，避免血斑之間的相互污染，同時放入干燥劑及

濕度指示卡，密封包裝，保存備用。

4.2.3尿液和唾液

2

全國艾滋病檢測技術規范

4.2.3.1尿液：使用清潔的容器收集尿液。女性應避開月經期。尿液樣品可以在2?8℃下存放。

存放時間、是否凍存以及是否添加防腐劑以試劑盒說明書為準。

4.2.3.2唾液：使用I試劑盒提供的容器收集唾液樣品。存放時間和是否凍存以試劑盒說明書為

準。

4.3樣品的保存

4.3.1用于抗體和抗原檢測的血清或血漿樣品，短期（1周）內進行檢測的可存放于2?8℃,一

周以上應存放于-20℃以下。

4.3.2用于核酸檢測的血漿和血細胞樣品4天內進行檢測的可存放于4℃,3個月以內應存放于

-20C以下。3個月以上應置于-700C以下。

4.3.3艾滋病檢測篩查實驗室檢測的篩查陽性樣品應及時送確證實驗室，篩查陰性樣品，可根

據具體需要決定保存時間，建議至少保存1?2個月。特殊用途或專項項目的樣品根據具體要求

確定保存時間。

4.3.4艾滋病檢測確證實驗室收到的篩查陽性樣品，無論確證結果如何，均應將剩余的樣品保

存至少10年，特殊用途或專項項目的樣品根據具體要求確定保存時間。

4.4樣品的運送

4.4.1應符合生物安全要求；要獲得相應部門批準并由具有資質的人員專程護送。

4.4.2應采用三層容器對樣品進行包裝，隨樣品應附有與樣品唯一性編碼相對應的送檢單。送

檢單應標明受檢者姓名、樣品種類等信息，并應放置在第二層和第三層容器之間。

4.4.2.1第一層容器：直接裝樣品，應防滲漏。樣品應置于帶蓋的試管內，試管上應有明顯的

標記，標明樣品的唯一性編碼或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應墊有緩沖吸水材

料，以免碰碎。

4.4.2.2第二層容器：容納并保護第一層容器，可以裝若干個第一層容器。要求不易破碎、帶

蓋、防滲漏、容器的材料要易于消毒處理。

4.4.2.3第三層容器：容納并保護第二層容器的運輸用外層包裝箱。外面要貼上醒目的標簽，

注明數量、收樣和發件人及聯系方式，同時要注明“小心輕放、防止日曬、小心水浸、防止重壓”

等字樣，還應易于消毒。

4.4.2.4用于抗體檢測的血清和血漿樣品應在凍存條件下運送。用于CD4+和CD8+T淋巴細胞測

定的樣品應在室溫下（18?25℃）或40c（特殊要求時）運送。用于病毒載量檢測的樣品應在-20℃

以下運輸。DBS樣品應在室溫下（18?25℃）運送。每一件包裝的體積以不超過50mL為宜。

4.4.2.5運送樣品必須有記錄。

4.4.2.6特殊情況下經有關部門批準可以用特快專遞郵寄樣品，但必須按三層包裝，將樣品管

包扎好，嚴禁使用玻璃容器。

4.5樣品的接收

4.5.1樣品包裹必須在具有處理感染性材料能力的實驗室內、由經過培訓的、穿戴防護衣、戴

口罩、防護眼鏡的工作人員在生物安全柜中打開，用后的包裹應及時進行消毒。

4.5.2核對樣品與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。如發現溢漏應立即將尚存留的樣品移

3

全國艾滋病檢測技術規范

出，對樣品管和盛器消毒，同時報告實驗室負責人和上一級實驗室技術人員。

4.5.3檢查樣品的狀況，記錄有無嚴重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。如果污

染過重或者認為樣品不能被接受，應將樣品安全廢棄。并將樣品情況立即通知送樣人。

4.5.4接收樣品時應填寫樣品接收單。

4

全國艾滋病檢測技術規范

第二章HIV抗體檢測

1范圍

本章規定了HIV抗體的檢測方法、程序、結果報告、檢測策略及質量控制。適用于各級各類

醫療機構、疾病預防控制機構、檢驗檢疫機構、采供血機構及衛生保健機構。可作為對HIV感染

者診斷和監測的實驗室依據。

2規范性引用文件

《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準》（中華人民共和國衛生行業標準，WS293-2008）

GuidanceforHIVtestingintheWesternPacificRegion.WHODraft19July2008.

StatementfromtheSurveiHanceandSurveyWorkingGroupandtheLaboratoryWorkingGroup

totheOfficeoftheGlobalAIDSCoordinator.26Nov.2006.

GuidelinesfortheuseoftheBEDassayforincidenceestimationandsurveillance

inresource-limitedcountries.Atlanta,5June2006.

RevisedGuidelinesforHIVCounseling,Testing,andReferral.U.S.CDC2001.

CurrentHIV-2diagnosticstrategyoverestimatesHIV-2prevalenceinChina.Journal

ofMedicalVirology,2009,81:790-797.

3HIV抗體檢測實驗室要求

應符合《全國艾滋病檢測工作管理辦法（2006）》中對實驗室人員、建筑設施和設備等條件

的要求。

實驗室的質量保證和實驗室安全防護按本規范相關章節規定執行。

4HIV抗體檢測的目的和要點

4.1HIV抗體檢測的目的

4.1.1HIV抗體檢測可用于診斷、血液篩查、監測等。

4.1.2以診斷為目的的檢測是為了確定個體HIV感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根

據特殊需要進行的體檢等。

4.1.3以血液篩查為目的的檢測是為了防止輸血傳播HIV,包括獻血員篩查和原料血漿篩查。

4.1.4以監測為目的的檢測是為了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、

重點人群和一般人群。

4.2HIV抗體檢測的要點

4.2.1根據目的選擇檢測方法及檢測策略。

4.2.2嚴格遵守實驗室SOP。

5

全國艾滋病檢測技術規范

4.2.3篩查試驗陽性，須作確證試驗。

4.2.4篩查試驗陰性，不應做確證試驗。

4.2.5篩查及確證試驗陽性均應做好咨詢工作。

5以診斷為目的的檢測策略

5.1常規HIV抗體檢測的方法和程序

HIV抗體檢測分為篩查試驗（包括初篩和復檢）和確證試驗。

5.1.1篩查試驗

5.1.1.1篩查試劑

必須是經國家食品藥品監督管理局注冊批準、在有效期內的試劑，其中酶聯免疫試劑應批批

檢合格。推薦使用臨床質量評估敏感性和特異性高的試劑。

5.1.1.2篩查樣品

HIV抗體篩查可采用血清、血漿、濾紙干血斑、唾液和尿液樣品。

5.1.1.3篩查方法

（1）酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

可使用血液、唾液、尿液樣品，ELISA多為單純HIV抗體檢測試劑。HIV抗原抗體聯合檢測

試劑可同時檢測血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗體。HTV抗原或抗體包被于固相載體，加入待

檢樣品和酶標記的HIV抗原或抗體，加底物顯色，用酶標儀測定結果。有效試驗的陰性和陽性對

照必須符合試劑盒規定。

（2）化學發光或免疫熒光試驗

這類試劑采用發光或熒光底物，既可檢測抗體，也可聯合檢測抗原抗體。HIV抗原或抗體包

被于固相載體，加入待檢樣品和酶或熒光標記的HIV抗原或抗體，加發光或熒光底物，用發光或

熒光儀測定結果。有效試驗的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規定。

（3）快速檢測（RT）及其它檢測試驗

這類試驗簡便快速，適用于應急檢測、門診急診檢測。?般可在10?30分鐘內得出結果。

明膠顆粒凝集試驗（PA）：是HIV血清抗體檢測的一種簡便方法。將HIV抗原致敏明膠顆粒

作為載體，與待檢樣品作用。當待檢樣品含有HIV抗體時，明膠顆粒與抗體發生凝集反應，根據

凝集情況判讀結果。PA試劑有兩種：同時檢測HIV-1和HIV-2抗體以及分別檢測HIV-1和HIV-2

抗體。有效試驗必須有陰性和陽性質控。

免疫滲濾試驗：斑點ELISA和斑點免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗：均以硝酸纖維膜為載

體，HIV抗原點狀固定在膜上，加待檢樣品。陽性結果在膜上抗原部位顯示出有色斑點。反應時

間在10分鐘以內。有效試驗的質控點必須顯色。

免疫層析試驗：以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原線狀固定在膜上，待檢樣品（血液或唾液）

沿著固相載體遷移，陽性結果在膜上抗原部位顯示出有色條帶。有效試驗的質控帶必須顯色。

5.1.1.4篩查程序

（1）初篩試驗

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全國艾滋病檢測技術規范

根據檢測目的選用符合要求的篩查試劑對樣品進行初篩檢測，對呈陰性反應的樣品，可出具

HIV抗體陰性（-）報告；對呈陽性反應的樣品，需要進一步做復檢試驗和確證試驗。

（2）復檢試驗

對初篩呈陽性反應的樣品，應使用原有試劑和另外一種不同原理（或廠家）的試劑，或另外

兩種不同原理或不同廠家的試劑進行復檢試驗。如果初篩檢測使用抗原抗體聯合試劑，則復檢必

須包括一種抗原抗體聯合試劑。如兩種試劑復檢均呈陰性反應，則報告HIV抗體陰性"）；如均

呈陽性反應，或一陰一陽，需送艾滋病確證實驗室進行確證試驗（圖1）。如果抗原抗體聯合試劑

檢測呈陽性反應，而抗體試劑檢測為陰性反應，則應考慮進行HIV-1p24抗原或核酸檢測，必要

時進行隨訪。

艾滋病檢測篩查實驗室復檢判定為陽性反應的樣品，確證實驗室可以直接進行確證試驗。

（3）初篩和復檢流程（圖1）

圖1HIV抗體篩杳檢測流程

（4）篩查試驗結果的報告

HIV抗體篩查試驗用附表1進行報告，陰性反應報告為“HIV抗體陰性（-）”；陽性反應報告

為“HIV抗體待復檢”。

（5）篩查試驗呈陽性反應樣品的轉送

如需送上級實驗室進行復檢，需要核對身份，補充個人信息（如姓名和身份證號碼），必要

時采集第二份血樣，持H1V抗體篩查報告，送當地艾滋病篩查中心實驗室，或直接送確證實驗室

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全國艾滋病檢測技術規范

復檢。HIV抗體復檢試驗用附表2進行報告，兩次檢測均陽性或?陰?陽報告為“HIV抗體待確

證”；兩次檢測均陰性報告為“HIV抗體陰性（-）”。HIV抗體復檢報告需由1名檢驗人員和1名

審核人員簽字。

5.1.2確證試驗

5.1.2.1確證試劑

必須是經國家食品藥品監督管理局注冊批準、在有效期內的試劑。

5.1.2.2確證樣品

可采用血清、血漿、濾紙干血斑樣品。

5.1.2.3確證方法

包括免疫印跡試驗（福）、條帶免疫試驗、放射免疫沉淀試驗（RIPA）及免疫熒光試驗（IFA）

等。

5.1.2.4確證流程（圖2）

使用HIV-1/2混合型試劑進行檢測，如果呈陰性反應，則報告HIV抗體陰性（一）；如果呈

陽性反應，則報告HIV-1抗體陽性（+）；如果不是陰性反應，但又不滿足陽性判斷標準，貝時艮

告HIV抗體不確定（土）。結合流行病學資料，可以在4周后隨訪檢測，如帶型沒有進展或呈陰

性反應，則報告陰性；如隨訪期間出現陽性反應，則報告陽性；如隨訪期間帶型有進展，但不滿

足陽性標準，應繼續隨訪到8周。如帶型沒有進展或呈陰性反應則報告陰性；滿足HIV抗體陽性

診斷標準則報告陽性，不滿足陽性判斷標準可視情況決定是否繼續隨訪。隨訪期間可根據需要,

檢測病毒核酸或P24抗原作為輔助診斷。如果出現HIV-2型的特異性指示條帶，根據實際情況需

用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確證試驗或HIV-2核酸檢測，