1GB1886.355—2022食品安全國家標準食品添加劑甜菊糖苷本標準適用于以甜葉菊（ste℃iaRebaudiana葉為原料，經提取、精制而得的食品添加劑甜菊糖苷。已知糖苷包括甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷及甜菊雙糖苷。2分子式、結構式和相對分子質量2.213種糖苷的結構式配基。2GB1886.355—2022表113種糖苷的化合物名稱、化合物名稱R1位取代基R2位取代基中文英文甜菊苷Stevioside瑞鮑迪苷ARebaudiosideA瑞鮑迪苷BRebaudiosideBH瑞鮑迪苷CRebaudiosideC瑞鮑迪苷DRebaudiosideD瑞鮑迪苷ERebaudiosideE瑞鮑迪苷FRebaudiosideF瑞鮑迪苷MRebaudiosideM瑞鮑迪苷NRebaudiosideN瑞鮑迪苷ORebaudiosideO杜克苷ADulcosideA甜茶苷Rubusoside甜菊雙糖苷SteviolbiosideH注：分別代表葡萄糖、鼠李糖、木糖。2.313種糖苷的相對分子質量甜菊苷：804.87（按2018年國際相對原子質量）瑞鮑迪苷A:967.01（按2018年國際相對原子質量）瑞鮑迪苷B:804.87（按2018年國際相對原子質量）瑞鮑迪苷C:951.01（按2018年國際相對原子質量）瑞鮑迪苷D:1129.15（按2018年國際相對原子質量）瑞鮑迪苷E:967.01（按2018年國際相對原子質量）3GB1886.355—2022瑞鮑迪苷F:936.99（按2018年國際相對原子質量）杜克苷A:788.87（按2018年國際相對原子質量）甜菊雙糖苷：642.73（按2018年國際相對3技術要求感官要求應符合表2的規定。表2感官要求項目要求檢驗方法色澤白色至淺黃色取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下觀察其色澤和狀態狀態粉末、晶體、顆粒或片狀3.2理化指標理化指標應符合表3的規定。表3理化指標項目指標檢驗方法甜菊糖苷含量（以干基計）a,∞/%0附錄A中A.3灰分，∞/%≤04干燥減量，∞/%≤60GB5009.3直接干燥法bpH4.5~7.0附錄A中A.4鉛0砷0甲醇附錄A中A.5乙醇注：商品化的甜菊糖苷產品應以符合本標準的甜菊糖苷為原料，可添加用于標準化目的的淀粉等食品原料。a商品化的甜菊糖苷產品應符合標識值。b干燥溫度和時間分別為105℃±2℃和2h。4GB1886.355—2022附錄A檢驗方法A.1一般規定本標準所用試劑和水在未注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規定的三級水。試驗中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品在未注明其他要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。A.2鑒別試驗A.2.1甜菊糖苷色譜試驗在甜菊糖苷含量試驗中，試樣溶液色譜圖中13種糖苷的色譜峰應與混合標準品溶液相對應。A.3甜菊糖苷含量（以干基計）的測定磷酸鈉緩沖液(稱取磷酸二氫鈉(),溶于水中用磷酸調節至A.3.1.7瑞鮑迪苷A標準品：瑞鮑迪苷A含量（質量分數，以干基計）≥99.0%。A.3.1.8瑞鮑迪苷D標準品：瑞鮑迪苷D含量（質量分數，以干基計）≥95.0%。A.3.1.9其他11種糖苷標準品：甜菊苷、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷，或使用13種糖苷混合標準品。A.3.2儀器和設備高效液相色譜儀：配備紫外檢測器，或其他等效的檢測器。A.3.3參考色譜條件色譜柱粒徑或其他等效的色譜柱。A.3.3.2流動相梯度洗脫條件（比例可根據實際情況調節見表A.1。5GB1886.355—2022表A.1流動相梯度洗脫條件（比例可根據實際情況調節）時間/min磷酸鈉緩沖液/%乙腈/%0流動相流速檢測波長進樣量柱溫A.3.4分析步驟A.3.4.1混合標準品溶液的制備分別稱取適量瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷D、甜菊苷、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷標準品（或13種糖苷混合標準品置于同一個容量瓶中，用乙腈水溶液完全溶解后定容，得到混合標準品溶液。混合標準品溶液用于確定13種糖苷的相對保留時間。A.3.4.2標準溶液的制備分別稱取的瑞鮑迪苷A標準品和12.5mg的瑞鮑迪苷D標準品，精確至0.1mg,分別置于25mL的容量瓶中，用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度的瑞鮑迪苷A標準溶液和的瑞鮑迪苷A.3.4.3試樣溶液的制備稱取25.0mg±5.0mg試樣（干基精確至0.1mg,置于50mL的容量瓶中，用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度，得到試樣溶液。A.3.5.1標準曲線的繪制參考色譜條件下分別對的瑞鮑迪苷A標準溶液和100mg/L、200mg/L、400mg/L、500mg/L的瑞鮑迪苷D標準溶液進行色譜分析，記錄各濃度標準溶液對應的峰面積值。以標準溶液色譜圖中瑞鮑迪苷A或瑞鮑迪苷D的峰面積值為Y軸，以對應溶液濃度(mg/L)為X軸，繪制標準曲線，分別得到瑞鮑迪苷A標準曲線和瑞鮑迪苷D標準曲線（強制過原點從標準曲線上分別獲得瑞鮑迪苷A線性函數斜率（Ka)和瑞鮑迪苷D線性函數斜率（Kd)。6GB1886.355—2022在A.3.3參考色譜條件下，分別對混合標準品溶液和試樣溶液進行色譜分析。將試樣溶液的色譜圖與混合標準品溶液的色譜圖（見附錄B）相比較，以確定試樣溶液色譜圖中各組分對應的峰。記錄試樣溶液色譜圖中瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷D、甜菊苷、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷的峰面積。8種糖苷含量（以干基計）的質量分數∞i按式（A.1）計算。×%.×ci×%.×c式中：分別對應甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷；Ai—試樣溶液色譜圖中i組分的峰面積值；Ka—A.3.5.1中瑞鮑迪苷A線性函數斜率；5種糖苷含量（以干基計）的質量分數∞i按式（A.2）計算。i式中：分別對應瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O；Ai—試樣溶液色譜圖中i組分的峰面積值；Kd—A.3.5.1中瑞鮑迪苷D線性函數斜率；和∞o，取各組分含量之和即為試樣中甜菊糖苷含量。的測定酸度計。A.4.2試劑和材料試樣，溶于100A.5甲醇和乙醇的測定7GB1886.355—2022A.5.2儀器和設備氣相色譜儀：配有氫火焰離子化檢測器(FID)和頂空進樣器。A.5.3參考色譜條件或其他等效的色譜柱。載氣氮氣純度載氣流量柱溫保持升溫至保持最后以升溫至保持進樣口溫度檢測器溫度進樣體積分流比A.5.4參考頂空條件頂空瓶溫度頂空瓶平衡時間A.5.5分析步驟移取2mL水，置于頂空瓶中，迅速壓緊瓶蓋，備用。A.5.5.2標準溶液的制備稱取0.1g甲醇，精確至0.001g,用水稀釋后轉移至一個1000mL的容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得100mg/L的甲醇標準儲備溶液。將該溶液配制成一系列濃度為2.5mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L和50mg/L的甲醇標準溶液。移取上述系列濃度溶液各2mL,分別置于頂空瓶中，迅速壓緊A.5.5.2.2乙醇標準溶液的制備稱取0.1g乙醇，精確至0.001g,用水稀釋后轉移至一個100mL的容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得1000mg/L的乙醇標準儲備溶液。將該溶液配制成一系列濃度為50mg/L、100mg/L、200mg/L、500mg/L和750mg/L的乙醇標準溶液。移取上述系列濃度溶液各2mL,分別置于頂空瓶中，迅速壓A.5.5.3試樣溶液的制備稱取1.0g試樣，精確至0.001g,用水溶解后轉移至一個10mL的容量瓶中，在室溫下超聲處理約3min,加水稀釋至刻度，搖勻。移取該溶液2mL置于頂空瓶中，迅速壓緊瓶蓋，備用。8GB1886.355—2022在參考操作條件A.5.3和A.5.4下，分別對空白溶液、標準系列溶液和試樣溶液進行測定，記錄甲醇或乙醇的峰面積值。以標準系列溶液色譜圖中甲醇或乙醇的峰面積值為Y軸，以對應溶劑濃度（mg／L）為X軸，繪制標準曲線，得到甲醇標準曲線或乙醇標準曲線。根據試樣溶液色譜圖中甲醇或乙醇的按式（A.3）計算。式中：V—試樣溶液