團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《含生化黃腐酸的有機(jī)肥料種子發(fā)芽指數(shù)檢測方法》（征求意見稿）編制說明一、項(xiàng)目來源、起草單位等根據(jù)《廣西肥料協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法（試行）》的相關(guān)要求以及廣西肥料協(xié)會(huì)下達(dá)的《廣西肥料協(xié)會(huì)關(guān)于下達(dá)2023年第二批團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目計(jì)劃的通知》文件精神，由廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心提出，廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心、廣西西大檢測有限公司、廣西勤德科技股份有限公司、廣西金穗生態(tài)科技集團(tuán)股份有限公司、桂平市環(huán)海肥業(yè)有限公司、廣西力源寶科技有限公司、廣西興嘉農(nóng)生態(tài)科技有限公司、廣西桂本生物科技有限公司、融水縣融豐農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料有限責(zé)任公司、廣西馬山縣百龍肥業(yè)有限公司、廣西深博農(nóng)業(yè)科技有限公司、安琪酵母股份有限公司、廣西丹寶利酵母有限公司、廣西好生寶肥料科技有限公司、廣西對比生物科技有限公司、廣西上思縣華桂生物科技有限公司、廣西鑫燊生態(tài)環(huán)境科技有限公司、南寧市俄羅菲化肥有限公司、廣西博冠農(nóng)業(yè)科技有限公司、南寧市三鑫復(fù)合肥料廠、廣西壯族自治區(qū)新材料技術(shù)工程院等單位共同起草的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《含生化黃腐酸的有機(jī)肥料種子發(fā)芽指數(shù)檢測方法》已獲批立項(xiàng)。二、項(xiàng)目背景、必要性和意義 蔗糖產(chǎn)業(yè)是廣西支柱產(chǎn)業(yè)，由蔗糖加工延伸的副產(chǎn)品糖蜜積水、酵母發(fā)酵廢液、酒精發(fā)酵廢液等所制備得到的生化黃腐酸相關(guān)產(chǎn)品，深受肥料行業(yè)及種植終端的喜愛，具有促進(jìn)根系生產(chǎn)、增強(qiáng)作物抗逆性、提高肥料利用率、增加農(nóng)作物產(chǎn)量和提高農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)等作用，從而經(jīng)常被添加到各類肥料產(chǎn)品中。NY/T525-2021有機(jī)肥料新標(biāo)準(zhǔn)自2021年6月實(shí)施以來，新增加了種子發(fā)芽指數(shù)檢測指標(biāo)，以判定有機(jī)肥料發(fā)酵的腐熟程度，同時(shí)增加了有機(jī)肥料生產(chǎn)原料使用類目錄及評(píng)估類原料安全性評(píng)價(jià)要求。根據(jù)NY/T525-2021有機(jī)肥料的規(guī)定，由蔗糖產(chǎn)業(yè)延伸制備得到的生化黃腐酸屬于評(píng)估類原料（食品及飲料加工有機(jī)廢棄物）。廣大有機(jī)肥料生產(chǎn)企業(yè)喜歡在其產(chǎn)品中添加上述生化黃腐酸，以提高其肥效，有關(guān)情況由來已久，并得到市場的廣泛好評(píng)。但因生化黃腐酸具有小分子、全水溶等特征，以其為原料制備成有機(jī)肥料，如按1:10固液比的檢測標(biāo)準(zhǔn)測量種子發(fā)芽指數(shù)，則達(dá)不到新標(biāo)準(zhǔn)的要求，并且尚未有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)可參考，這給肥料產(chǎn)品登記、市場監(jiān)督檢測等帶來了極大困擾。NY/T525-2021有機(jī)肥料新標(biāo)準(zhǔn)中，附錄F對“種子發(fā)芽指數(shù)(GI)的測定”進(jìn)行了詳細(xì)方法介紹，同時(shí)也指出“注：評(píng)估類原料可依據(jù)專家評(píng)估結(jié)果確定固液比”，即評(píng)估類原料可以不參照“1:10”的固液比來檢測測量種子發(fā)芽指數(shù)。本標(biāo)準(zhǔn)立足于NY/T525-2021的基本要求，在“評(píng)估類原料”的基礎(chǔ)上，以生化黃腐酸為主要研究對象，開展種子發(fā)芽指數(shù)固液比的相關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)，并以此為依據(jù)制定本標(biāo)準(zhǔn)，為肥料產(chǎn)品登記、市場監(jiān)督檢測提供參考依據(jù)，對促進(jìn)廣西有機(jī)肥料健康發(fā)展及蔗糖產(chǎn)業(yè)廢棄物高效利用具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。三、項(xiàng)目編制起草過程（一）成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《含生化黃腐酸的有機(jī)肥料種子發(fā)芽指數(shù)檢測方法》項(xiàng)目任務(wù)下達(dá)后，廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心成立了標(biāo)準(zhǔn)編制工作組，制定了起草編寫方案，明確任務(wù)職責(zé)，確定工作技術(shù)路線，開展標(biāo)準(zhǔn)研制工作。具體標(biāo)準(zhǔn)編制工作由廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心、廣西西大檢測有限公司等單位相關(guān)人員配合開展相關(guān)種子發(fā)芽指數(shù)研究及生化黃腐酸檢測標(biāo)準(zhǔn)的修訂；由廣西勤德科技股份有限公司、安琪酵母股份有限公司、廣西丹寶利酵母有限公司等多家企業(yè)單位負(fù)責(zé)進(jìn)行了試驗(yàn)樣品配置和生產(chǎn)工作。（二）收集整理文獻(xiàn)資料NY/T525-2021有機(jī)肥料NY/T3162-2017肥料中黃腐酸的測定容量滴定法GB/T34765-2017礦物源黃腐酸含量的測定HG/T5334-2018黃腐酸鉀GB/T8576復(fù)合肥料中游離水含量的測定真空烘箱法GB/T42513.1-2023鎳合金化學(xué)分析方法第1部分:鉻含量的測定硫酸亞鐵銨電位滴定法（三）研討確定標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制工作組在對收集的資料進(jìn)行整理研究之后，標(biāo)準(zhǔn)編制工作組召開了標(biāo)準(zhǔn)編制會(huì)議，對標(biāo)準(zhǔn)的整體框架結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，并對標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵性內(nèi)容進(jìn)行了初步探討。經(jīng)過研究，標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容確定為范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、儀器、試劑、試驗(yàn)步驟和允許差。（四）調(diào)研及形成草案、征求意見稿2023年5月，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組進(jìn)行了廣泛實(shí)地調(diào)研工作，查閱了大量的國內(nèi)外文獻(xiàn)資料，經(jīng)編制組反復(fù)討論，形成了標(biāo)準(zhǔn)研制的方案和基本構(gòu)架，對主要內(nèi)容進(jìn)行了討論并對項(xiàng)目的工作進(jìn)行了部署和安排。2023年5-8月，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組研制了一批試驗(yàn)樣品。其中由并開展有機(jī)肥料中黃腐酸的測定方法研究；2023年7月-2024年5月，進(jìn)行了試驗(yàn)樣品的田間試驗(yàn)安全性測試。2024年5-6月，進(jìn)行了本標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法驗(yàn)證。2024年6-7月起草了完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《含生化黃腐酸的有機(jī)肥料種子發(fā)芽指數(shù)檢測方法》（征求意見稿）。四、標(biāo)準(zhǔn)制定原則1、實(shí)用性原則本文件是在充分收集相關(guān)資料和文獻(xiàn)，并在開展大量試驗(yàn)研究基礎(chǔ)上制定的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)，符合當(dāng)前廣西有機(jī)肥料健康發(fā)展及蔗糖產(chǎn)業(yè)廢棄物高效利用的發(fā)展方向與需求，為肥料產(chǎn)品登記、市場監(jiān)督檢測提供參考依據(jù)，具有較強(qiáng)的實(shí)用性和可操作性。2、協(xié)調(diào)性原則本文件編寫過程中注意了與NY/T525-2021有機(jī)肥料種子發(fā)芽指數(shù)檢測方法的協(xié)調(diào)問題，在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。3、規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容，保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫質(zhì)量。4、前瞻性原則本文件在兼顧當(dāng)前NY/T525-2021有機(jī)肥料種子發(fā)芽指數(shù)檢測方法的同時(shí)，還考慮到了生化黃腐酸屬于評(píng)估類原料（食品及飲料加工有機(jī)廢棄物）的有小分子、全水溶等特征。本文件在兼顧當(dāng)前NY∕T3162-2017肥料中黃腐酸的測定方法，還考慮到了有機(jī)肥料中肥料自身顏色對檢測方法的干擾問題，借鑒參考“GBT

42513.1-2023”標(biāo)準(zhǔn)中的電位滴定法，能更精準(zhǔn)測定本有機(jī)肥料中生化黃腐酸的含量，在標(biāo)準(zhǔn)中體現(xiàn)了個(gè)別特色性、前瞻性和先進(jìn)性條款。五、標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容及依據(jù)來源（一）標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容本標(biāo)準(zhǔn)主要章節(jié)內(nèi)容包括：含生化黃腐酸的有機(jī)肥料種子發(fā)芽指數(shù)檢測方法的范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、儀器、試劑、試驗(yàn)步驟、分析結(jié)果的表述、允許差、附錄A。（二）主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證的論述本標(biāo)準(zhǔn)主要以NY/T525-2021《有機(jī)肥料》所對應(yīng)“附錄F種子發(fā)芽指數(shù)（GI）的測定”以及NY∕T3162-2017《肥料中黃腐酸的測定容量滴定法》標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法為基礎(chǔ)，結(jié)合本標(biāo)準(zhǔn)所對標(biāo)的物料特性（生化黃腐酸、有機(jī)肥料）進(jìn)行研究，在原有檢測方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行調(diào)整，具體調(diào)整的主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證詳見如下：1、種子發(fā)芽指數(shù)檢測的種子數(shù)量的調(diào)整NY/T525-2021《有機(jī)肥料》“附錄F種子發(fā)芽指數(shù)（GI）的測定”，所用種子數(shù)量為10粒。經(jīng)多次測試，受種子質(zhì)量影響較大，重復(fù)誤差較大，為此以腐熟牛糞為原料，進(jìn)行了10粒、20粒、30粒、40粒、50粒種子的對比的測試研究(注：每個(gè)培養(yǎng)皿仍為10粒種子，通過增加培養(yǎng)皿數(shù)量而增加試驗(yàn)種子的總粒數(shù))，試驗(yàn)情況詳見下表1：表1不同種子數(shù)量的種子發(fā)芽指數(shù)檢測表重復(fù)1重復(fù)2重復(fù)3重復(fù)4重復(fù)5絕對差值10粒82.32%94.96%70.37%72.48%89.95%8.47%20粒83.45%86.18%74.23%78.78%89.45%4.73%30粒87.42%79.11%78.16%85.79%87.48%3.97%40粒85.14%80.23%83.16%84.21%78.76%2.24%50粒78.32%86.27%84.34%82.45%84.23%2.19%備注：根據(jù)NY/T525-2021《有機(jī)肥料》，按1:10檢測供試驗(yàn)牛糞種子發(fā)芽指數(shù)為82.7%。根據(jù)NY/T525-2021《有機(jī)肥料》“附錄F種子發(fā)芽指數(shù)（GI）的測定”的允許差“絕對差值”不能超過5%。而10粒種子的絕對差值達(dá)到8.47%，20粒、30粒、40粒、50粒種子都符合要求?？紤]到試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的工作量，種子發(fā)芽指數(shù)檢測的種子數(shù)量建議由10粒調(diào)整為20粒。有機(jī)肥料中生化黃腐酸含量的測定方法研究目前，國內(nèi)涉及到黃腐酸檢測的方法主要有NY/T3162-2017《肥料中黃腐酸的測定容量滴定法》、GB/T34765-2017《礦物源黃腐酸含量的測定》、HG/T5334-2018《黃腐酸鉀》。其試驗(yàn)原理基本相同，都是提出到黃腐酸后，采用重鉻酸鉀將黃腐酸的碳氧化成二氧化碳，用硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)滴定液反滴定，根據(jù)重鉻酸鉀消耗量和黃腐酸的碳系數(shù)計(jì)算有機(jī)肥料中生化黃腐酸鉀的含量。主要區(qū)別在于前端處理方法，本標(biāo)準(zhǔn)主要針對有機(jī)肥料，即生物源類物質(zhì)，因此主要參考NY/T3162-2017《肥料中黃腐酸的測定容量滴定法》的方法。但NY/T3162-2017《肥料中黃腐酸的測定容量滴定法》的方法在檢測中，在提取生化黃腐酸溶液過程中，溶液通常帶有染色（有機(jī)肥料其他顏色），如采用原方法中“鄰菲羅啉”為指示劑通過顏色判定滴定終點(diǎn)則干擾較大。因此經(jīng)過研究調(diào)整，改為采用電位滴定儀來判斷滴定終點(diǎn)，通過滴定過程中電位差的變化來判斷終點(diǎn)更準(zhǔn)確，不受浸提溶液顏色干擾。另“生化黃腐酸的碳系數(shù)”沒有參考NY/T3162-2017《肥料中黃腐酸的測定容量滴定法》的標(biāo)準(zhǔn)。而是參考HG/T5334-2018《黃腐酸鉀》標(biāo)準(zhǔn)中的生物源黃腐酸的碳系數(shù)0.45。經(jīng)過實(shí)際測試，更準(zhǔn)確。有機(jī)肥料的水分含量檢測方法的調(diào)整經(jīng)過市場調(diào)研，幾乎所有機(jī)肥料生產(chǎn)都是在有機(jī)肥料發(fā)酵配料時(shí)，添加酵母或酒精濃縮廢液，比例約2%-20%左右（折算干基約1%-10%，添加的黃腐酸含量約0.3%-3.4%），20%（折算干基約10%）以上酵母或酒精濃縮廢液則因?yàn)槠浔旧砦锪蠈傩裕瑒t無法添加到有機(jī)肥料中（添加后物料粘稠，很難發(fā)酵，干燥成本高），即市場上幾乎沒有添加酵母或酒精濃縮廢液超過20%的有機(jī)肥料產(chǎn)品。但市場上常見將酵母或酒精濃縮廢液作為母液，通過噴霧干燥的方法，獲得粉狀全水溶的有機(jī)肥料，因其還有較高的鉀含量，市場稱之為“生化黃腐酸鉀”。生化黃腐酸鉀經(jīng)本標(biāo)準(zhǔn)檢測，其黃腐酸含量約34%左右。有機(jī)肥料中生化黃腐酸的含量X≤6.2%的，其水分含量檢測參照GB/T8576的規(guī)定執(zhí)行（真空烘箱法）；有機(jī)肥料中生化黃腐酸的含量X≥34%的，因其已干燥，自身具有較強(qiáng)吸水性，如還用真空烘箱法測量水分，則會(huì)出現(xiàn)倒吸潮的情況，出現(xiàn)烘干后的重量比烘干前還重（生化黃腐酸鉀采用真空烘箱法測量水分，實(shí)測值為-18.22%）。經(jīng)過試驗(yàn)研究，有機(jī)肥料中生化黃腐酸的含量X≥34%的，則采用GB/T6283的規(guī)定執(zhí)行（卡爾費(fèi)休法）。不同原料的發(fā)酵腐熟有機(jī)肥料生化黃腐酸的含量檢測選擇純牛糞、純豬糞、純雞糞、純蘑菇渣、純劍麻渣、純薯糧渣、純蔗髓蔗皮共7種原料，在不添加酵母或酒精濃縮廢液的情況下，獨(dú)立進(jìn)行有機(jī)肥堆肥發(fā)酵，有氧發(fā)酵時(shí)間3-5個(gè)月，每間隔10天檢測種子發(fā)芽指數(shù)，當(dāng)種子發(fā)芽指數(shù)超過70%以后；記錄達(dá)到種子發(fā)芽指數(shù)所需時(shí)間，再進(jìn)行生化黃腐酸的檢測，以探討在未添加酵母或酒精濃縮廢液的前提下，常規(guī)有機(jī)肥料的生化黃腐酸的含量，具體檢測情況如表2；表2不同原料的發(fā)酵腐熟有機(jī)肥料生化黃腐酸的含量檢測及發(fā)酵所需時(shí)間序號(hào)物料成分所需時(shí)間（天）實(shí)測生化黃腐酸含量（以干基計(jì),%）1純牛糞702.952純豬糞902.643純雞糞1203.084純蘑菇渣702.175純劍麻渣802.066純薯糧渣702.457純蔗髓蔗皮601.81由表2得知，腐熟的有機(jī)肥料中生化黃腐酸最高值為純雞糞，其次為純牛糞，最低為純蔗髓蔗皮。糞便類原料的生化黃腐酸平均值都高于植物源類。而糞便類中純牛糞、純豬糞、純雞糞的數(shù)值相近，而牛糞的發(fā)酵時(shí)間最快（70天）能達(dá)到種子發(fā)芽指數(shù)≥70%，并且生化黃腐酸含量介于三種禽畜糞便之間，僅略低于雞糞。由于純腐熟牛糞的生化黃腐酸含量介于三種禽畜糞便之間，具有一定代表性，同時(shí)為減少發(fā)酵周期及試驗(yàn)工作量，將以純腐熟牛糞作為有機(jī)肥料代表，作為后續(xù)試驗(yàn)基礎(chǔ)原料開展試驗(yàn)。4.1樣品配置及黃腐酸含量根據(jù)經(jīng)過市場調(diào)研，幾乎所有機(jī)肥料生產(chǎn)都是在有機(jī)肥料發(fā)酵配料時(shí)，添加酵母或酒精濃縮廢液，比例約2%-20%左右（折算干基約1%-10%，添加的黃腐酸含量約0.3%-3.4%。為排出生產(chǎn)環(huán)節(jié)的干擾，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組經(jīng)研究決定，采用腐熟牛糞為基礎(chǔ)料，添加不同比例生化黃腐酸鉀粉末（1-10%）來制備檢測樣品，具體配比及黃腐酸含量檢測值如下表3：表3不同樣品配比及黃腐酸含量檢測值樣品序號(hào)牛糞添加量（%）生化黃腐酸鉀添加量（%）實(shí)測黃腐酸含量（以干基計(jì),%）備注1100%02.95純牛糞297.5%2.5%3.74395%5%4.52492.5%7.5%5.36590%10%6.1560%100%34.19純生化黃腐酸鉀粉末4.2不同樣品的種子發(fā)芽指數(shù)固液比研究以腐熟牛糞平均的種子發(fā)芽指數(shù)為基準(zhǔn)參考值（平均值約82.7%，按1：10固液比檢測），根據(jù)試驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)和理論測算，計(jì)算出每個(gè)樣品的種子發(fā)芽指數(shù)約為80%的固液比最佳值。以最佳值為中心，上下各再增加2個(gè)試驗(yàn)處理，即每個(gè)樣品種子發(fā)芽指數(shù)設(shè)定為5個(gè)處理固液比，尋找種子發(fā)芽指數(shù)接近80%的固液比。試驗(yàn)設(shè)計(jì)及種子發(fā)芽指數(shù)測試結(jié)果如下表4：表4不同樣品的種子發(fā)芽指數(shù)固液比試驗(yàn)數(shù)據(jù)樣品序號(hào)處理①處理②處理③處理④處理⑤樣品序號(hào)固液比種子發(fā)芽指數(shù)固液比種子發(fā)芽指數(shù)固液比種子發(fā)芽指數(shù)固液比種子發(fā)芽指數(shù)固液比種子發(fā)芽指數(shù)11:1082.7%1:2097.4%1:30105.8%1:40106.7%1:50121.0%21:1058.4%1:2079.4%1:3095.1%1:40102.9%1:50111.0%31:2043.5%1:3083.2%1:40100.3%1:5098.9%1:60108.8%41:3046.6%1:4064.8%1:5081.2%1:6091.1%1:7096.3%51:4025.7%1:5048.5%1:6065.4%1:7080.6%1:8094.5%61:2505.6%1:30042.1%1:35070.2%1:40083.0%1:45097.5%從上表數(shù)據(jù)分析，以種子發(fā)芽指數(shù)80%為基準(zhǔn)值，樣品1在固液比1:10達(dá)到82.7%；樣品2在固液比1:20達(dá)到79.4%；樣品3在固液比1:30達(dá)到83.2%；樣品4在固液比1:50達(dá)到81.2%；樣品5在固液比1:70達(dá)到80.6%；樣品6在固液比1:400達(dá)到83.0%。因此，建議按下表5設(shè)置不同含量生化黃腐酸的有機(jī)肥料所對應(yīng)的提取固液比來開展種子發(fā)芽指數(shù)測試。表5有機(jī)肥料中不同含量的生化黃腐酸所對應(yīng)的提取固液比樣品序號(hào)實(shí)測黃腐酸含量（以干基計(jì),%）固液比對應(yīng)實(shí)測的發(fā)芽指數(shù)（%）對應(yīng)黃腐酸含量設(shè)置含量（以干基計(jì),%）12.951:1082.7X≤3.0%23.741:2079.43.0%＜X≤3.8%34.521:3083.23.8%＜X≤4.6%45.361:5081.24.6%＜X≤5.4%56.151:7080.65.4%＜X≤6.2%634.191:40083.0X≥34%5、不同含量生化黃腐酸的有機(jī)肥料田間試驗(yàn)安全性測試情況為驗(yàn)證試驗(yàn)有機(jī)肥料樣品是否存在燒苗等不良反應(yīng)，將上述各處理樣品開展辣椒的田間試驗(yàn)，以測試其安全性。樣品1～樣品5按每畝使用400kg，做基肥埋施；樣品6為全水溶產(chǎn)品，則采用滴灌的方式，按1:200倍兌水，每次用量4kg/畝，每隔10～15天使用1次，共使用5次，合計(jì)20kg/畝。其他化肥按常規(guī)方法使用，并以單施化肥處理作為CK對照，試驗(yàn)情況如下6表：表6不同樣品的田間試驗(yàn)情況表樣品序號(hào)使用方法使用量是否出現(xiàn)燒苗等不良情況跟對照比增產(chǎn)率1基肥埋施+