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發酵法生產白細胞介素-2

白細胞介素-2白介素－2是一個分子量為14500的糖蛋白，它刺激已被特異性抗原或致絲裂因數啟動的T細胞增殖【所屬】免疫增強劑/其他抗腫瘤藥及輔助治療藥【別名】白間素,欣吉爾,T細胞生長因子,白細胞介素-2等【適應癥】主要用于腎癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效（Rossenberg）。LAK細胞代表1個有單核巨噬細胞，B和T淋巴細胞特征的異原的細胞體。這些LAK細胞似乎對癌細胞有特異作用。此外，LAK細胞（不象T細胞）介導殺傷不受MHC的約束。應用【藥理作用】本品可促進T淋巴細胞增殖與分化，誘導具有細胞毒樣活力的殺傷細胞，誘導及增強殺傷性T細胞、單核細胞、巨噬細胞的活力等。【臨床應用】適用于慢性活動性乙型肝炎病毒感染等；用于腎細胞癌、黑色素瘤的治療，用于癌性胸腹水的控制及其他晚期腫瘤；用于先天或后天免疫缺陷癥的治療，如艾滋病，可提高病人細胞免疫功能和抗感染能力；各種自身免疫病的治療，如類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡、干燥綜合征等；對某些疾病性、桿菌性疾病、胞內寄生菌感染性疾病，如乙型肝炎、麻風病、肺結核、白色念珠菌感染等具有一定的治療作用。2生產過程及工藝過程(1)發酵工程菌為大腸桿菌，溫度敏感型。種子用LB培養基；發酵用M9CA培養基，30度10小時，后提高溫度至42度，誘導3h。

傳統工藝雞瘟病毒，PHA,培養液[啟動誘生]37℃人白細胞粉誘生白細胞培養液[滅活病毒，分離],HCl,NaOHpH=2~2.5,pH=7.2~7.4,離心上清液35%硫酸銨4℃，24h，離心上清液85%硫酸銨4℃，24h，離心沉淀10mmol/LPBS透析pH=6.5，24h透析內液[親和層析]上Sepharose柱pH=6.5親和載體I[洗滌]0.4mol/LNaCl，PBSpH=6.5親和載體Ⅱ[吸收]1.0mol/LNaCl,PBS透析pH=6.5IL-2組分[凝膠層析]上Utrogel柱pH=6.5凝膠載體0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸pH=7.6IL-2酶法生產1工藝流程圖IL-2工程菌斜面搖瓶發酵制備包涵體洗滌與裂解凝膠過濾與復性檢定與包裝(2)分離純化包涵體制備離心收集，菌體懸于EDTA溶液中，用超聲波破碎細胞，后8000r/min離心，收集沉淀(包涵體和細胞碎片)。包涵體洗滌及裂解：

用Tris-HCl洗滌3次，離心收集沉淀，用鹽酸胍變性，離心收集上清液。凝膠過濾及復性：

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