格蘭陰性球菌第十七章革蘭陰性菌奈瑟菌屬（Neisseria）

布蘭漢菌屬（Branhamella）第十七章革蘭陰性菌概述“伯杰鑒定細菌學手冊”第9版將奈瑟菌屬和布蘭漢菌屬歸于群4，將奈瑟菌屬、莫拉菌屬、金氏菌屬和不動桿菌屬都歸于奈瑟菌科奈瑟菌屬中的淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）、腦膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）以及莫拉菌屬中的卡他莫拉菌（M.catarrhalis）是主要的致病菌。目前對卡他莫拉菌是歸屬尚未定論第十七章革蘭陰性菌一、分類腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌對人致病寄生在人體內鼻咽腔的腐生菌解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黃奈瑟菌、粘液奈瑟菌、淺黃奈瑟菌、灰色奈瑟菌、延長奈瑟菌、去氮奈瑟菌和多糖奈瑟菌一、奈瑟菌屬第十七章革蘭陰性菌1．形態革蘭陰性雙球菌直徑0.6~1.5μm

形似雙腎或咖啡豆樣，凹面相對無動力，無芽胞，某些菌種形成莢膜第十七章革蘭陰性菌2．培養特性需在培養基中添加羊血、兔血或血清，對脂肪酸敏感，在培養基中需加入可溶性淀粉。需氧生長，初次分離需5%~7%CO2和高濕度最適生長溫度為35~37℃，低于30℃不生長第十七章革蘭陰性菌血瓊脂平板或巧克力瓊脂平板上呈光滑、濕潤、透明或半透明、直徑1~2mm的不溶血、圓形、灰蘭色菌落卵黃瓊脂平板上為無色、光滑、半透明、邊緣整齊、濕潤奶油狀菌落在液體培養基中呈輕度或中度混濁生長，無菌膜腦膜炎奈瑟菌于孵育24h后在培養基上發生自溶第十七章革蘭陰性菌3．生化特性氧化酶陽性，觸酶陽性（除延長奈瑟菌外）分解葡萄糖和麥芽糖，產酸不產氣對糖分解能力、硝酸鹽還原能力和DNA合成酶不同，常作為菌種間的鑒別依據奈瑟菌屬DNA中G+Cmol%為46~54第十七章革蘭陰性菌抗原構造、抵抗力依據莢膜多糖的抗原成分可分為：A、B、C、……等13個血清群，我國A群占95.8%，其余為B、C等群。第十七章革蘭陰性菌4．抵抗力對寒冷、干燥和熱的抵抗力弱，對化學消毒劑敏感對青霉素敏感但近年來由質粒介導的β內酰胺酶所致的耐藥在淋病奈瑟菌中產生較多第十七章革蘭陰性菌1.致病物質莢膜：抵抗吞噬的作用，利于細菌在體內的存活和繁殖菌毛：粘附于黏膜上皮細胞，利于定植內毒素：可引起發熱、微循環障礙，嚴重者可致內毒素休克、血栓、DIC等第十七章革蘭陰性菌所致疾病流行性腦脊髓膜炎（人類是唯一的易感宿主)

冬末春初，多為學齡兒童、青少年感染后多為隱性感染，早期，有上呼吸道癥狀，少數可發展為菌血癥或敗血癥，進而累及腦、脊髓膜，形成化膿性腦膜炎可出現嚴重的臨床癥狀如發熱、頭痛、腦膜刺激癥陽性、甚至休克和DIC等；菌血癥和細菌的損傷作用使約半數患者出現皮下瘀斑第十七章革蘭陰性菌

主要侵犯蛛網膜腦膜炎奈瑟菌鼻咽腔繁殖繁殖入血菌/敗血癥中樞神經系統暴發型腦膜炎微循環衰竭、內毒素休克、DIC第十七章革蘭陰性菌免疫性6月～2歲年齡組嬰兒免疫力最低，是易感人群病后可獲得體液免疫第十七章革蘭陰性菌四、微生物檢驗第十七章革蘭陰性菌腦膜炎奈瑟菌標本采集

無菌方法抽取腦脊液、關節液、血液、瘀點穿刺液等標本采集后立即送往實驗室用血平板進行床邊接種后置35℃孵育血液標本接種在血液培養瓶中置35℃孵育標本運送時需要35℃保溫第十七章革蘭陰性菌腦膜炎奈瑟菌檢驗程序CO2環境形態學鑒定生化鑒定血清學鑒定第十七章革蘭陰性菌標本直接檢查直接涂片檢查腦脊液直接或經離心后取沉淀涂片皮膚瘀點滲出液涂片革蘭染色后顯微鏡下見白細胞內外的革蘭陰性雙球菌，可報告“檢出革蘭陰性雙球菌，疑似腦膜炎奈瑟菌”。有助于流行性腦脊髓膜炎早期診斷第十七章革蘭陰性菌抗原檢查通常用膠乳凝集試驗和其他凝集試驗包括A、C、Y、W125血清型的多價抗體和血清型B抗體檢測結果應結合涂片和培養結果，抗原檢測陽性結果可作出快速、推測性診斷第十七章革蘭陰性菌分離培養鑒定

腦脊液標本接種在巧克力瓊脂或羊血瓊脂平板咽拭子或鼻咽拭子接種在選擇性培養基上如改良的Thayer-Martin(MTM)、GC-Lect、NewYorkCity(NCY)等培養基血液標本經增菌培養基增菌培養后，移種至巧克力瓊脂或羊血瓊脂平板上置5%~7%CO235℃孵育，每隔24h觀察平板第十七章革蘭陰性菌鑒定初步確定為奈瑟菌屬直徑1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落涂片革蘭染色見陰性雙球菌氧化酶試驗陽性進一步進行葡萄糖和麥芽糖發酵試驗陽性、其他糖類發酵陰性可確定為腦膜炎奈瑟菌用分型血清確定血清型別平板上沒有發現菌落需繼續觀察72h后無菌生長可報告為陰性第十七章革蘭陰性菌防治原則綜合性預防措施隔離病人、檢查帶菌者、預防性投藥，室內通風流腦疫苗：6個月-2歲接種兩次，間隔1月A群腦膜炎球菌多糖抗原。制備疫苗青霉素、磺胺大劑量治療第十七章革蘭陰性菌二、淋病奈瑟菌

N.gonorrhoeae第十七章革蘭陰性菌G－雙球菌，似一對咖啡豆。有菌毛，有莢膜專性需氧，巧克力血瓊脂平板2.培養特性1.形態與染色3.抵抗力弱：熱、冷、干燥和消毒劑極敏感，1%石炭酸

3

min或1:4000硝酸銀2

min即死亡。本菌能自溶。（一）生物學性狀第十七章革蘭陰性菌1.致病物質莢膜：利于細菌在體內的存活和繁殖菌毛：粘附作用；抵抗吞噬外膜蛋白Ⅱ：有助于粘附IgA蛋白酶：能破壞黏膜表面sIgA

內毒素：損害人體黏膜的重要因素（二）致病性與免疫性第十七章革蘭陰性菌1.淋病人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主，屬性傳播疾?。╡xually

transmitted

disease

，STD）主要通過性接觸引起泌尿道和生殖系統炎癥。2.所致疾病gonorrhea第十七章革蘭陰性菌第十七章革蘭陰性菌2.新生兒淋菌性結膜炎/新生兒膿漏眼新生兒由產道感染有淋病性陰道炎或子宮頸炎的孕婦，胎兒經產道娩出時可被感染。3.淋病奈瑟菌性結膜炎及幼女陰道炎2.所致疾病通過毛巾、浴池間接感染。第十七章革蘭陰性菌1.標本2.直接涂片鏡檢中性粒細胞內發現G－雙球菌有價值。3.分離培養與鑒定泌尿生殖道膿性分泌物，用無菌棉拭沾取，子宮頸口表面分泌物，標本采集后應注意保暖保濕，立即送檢接種。巧克力色平板，5-10%二氧化碳（三）微生物學檢查法第十七章革蘭陰性菌4.快速診斷SPA協同凝集實驗、ELISA檢查標本中細菌；核酸雜交及PCR檢測淋病奈瑟菌質粒DNA等。第十七章革蘭陰性菌防開展防治性病的知識教育防止不正當的兩性關系治新生兒1%硝酸銀滴眼。抗生素。參考體外藥敏試驗。對青霉素、頭孢胺噻肟鈉、環丙沙星、壯觀霉素等多種抗生素敏感，近年報告耐藥菌株增多。（四）防治原則第十七章革蘭陰性菌卡他莫拉菌培養及鑒定在血液瓊脂或巧克力瓊脂平板上生長良好35℃24h孵育后菌落直徑1~3mm，灰白色、光滑，用接種環推菌落可將整個菌落在平板表面移動氧化酶和觸酶陽性不發酵葡萄糖和其它糖類產酸大多數菌株還原硝酸鹽和產生DNase。三丁酸甘油酯水解（丁酸酯酶）試驗陽性可與奈瑟菌屬鑒別可產生誘導型β內酰胺酶第十七章革蘭陰性菌奈瑟菌屬和卡他布蘭漢菌的鑒定第十七章革蘭陰性菌