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文檔簡介

關于艾滋病實驗室檢查2實驗室檢查第2頁,共19頁,星期六,2024年,5月3免疫學檢測AIDS患者正常(×109/L)CD4<0.21(0.8~1.2)CD4/CD8<11.2~2.1淋巴細胞總數<12~3流式細胞儀測定第3頁,共19頁,星期六,2024年,5月4血清學檢測(1)HIV抗體的初篩試驗——ELISA(酶聯免疫試驗)第4頁,共19頁,星期六,2024年,5月5血清學檢測(2)HIV抗體的確證試驗——Westernblot(免疫印跡試驗)第5頁,共19頁,星期六,2024年,5月6血清學檢測(3)HIV抗原檢測——ELISA夾心法測定p24抗原敏感性很高(7~10pg/ml)特異性稍差(可有假陽性)第6頁,共19頁,星期六,2024年,5月7分子生物學檢測(1)HIVRNA檢測—RT-PCR(逆轉錄-聚合酶鏈反應)PCR:高溫變性(94℃)→低溫退火(55℃)→適溫延伸(72℃);經25~30個循環,成倍數擴增熒光定量PCR:比常規PCR多一個寡聚核苷酸探針(帶一個熒光發光分子和一個熒光淬滅分子)應用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血漿中的病毒RNA第7頁,共19頁,星期六,2024年,5月8分子生物學檢測(2)淋巴細胞HIVRNA檢測——Northern印跡雜交(Northernblot)

原理:RNA片段經電泳分離,從凝膠中轉移到硝酸纖維素濾膜,再用探針雜交第8頁,共19頁,星期六,2024年,5月9分子生物學檢測(3)HIV變異株檢測——Sanger測序法

原理:核酸擴增時,核苷酸在某一固定點開始,隨機在某一特定的堿基處終止,產生A、T、C、G四組不同長度的一系列核苷酸,通過在尿素變性的PAGE膠上電泳,獲得DNA序列第9頁,共19頁,星期六,2024年,5月10病毒檢測血漿、單核細胞、腦脊液可分離出HIV操作復雜,主要用于科研第10頁,共19頁,星期六,2024年,5月11診斷第11頁,共19頁,星期六,2024年,5月12診斷原則流行病學史:有靜脈注射毒品史;多個性伴和不潔性生活史;輸入未經HIV抗體檢測的血液和血制品史;HIV抗體陽性所生的子女;其它(如職業暴露或醫源性感染史)。臨床表現:

高危對象出現上感樣及單核細胞增多癥樣表現,頸、腋及枕部淋巴結腫大,肝脾腫大,可考慮急性HIV感染。無癥狀期、艾滋病期臨床表現。

實驗室檢查:①HIV抗體陽性,并經確證試驗確認。②CD4+T淋巴細胞數明顯減少。③HIVRNA和P24抗原的檢測有助于早期診斷新生兒的HIV感染。第12頁,共19頁,星期六,2024年,5月13診斷標準急性期

★流行病學史、臨床表現、HIV抗體由陰性轉為陽性

★僅實驗室檢查HIV抗體由陰性轉為陽性無癥狀期

★流行病學史、HIV抗體陽性

★僅實驗室檢查HIV抗體陽性

第13頁,共19頁,星期六,2024年,5月14診斷標準艾滋病期

流行病學史,HIV抗體陽性,臨床表現有下列一項或以上:

1.短期(6個月內)體重下降10%以上;2.咳嗽或腹瀉超過4周;3.持續或間歇發熱超過4周;4.全身淋巴結腫大;5.反復帶狀皰疹或慢性播散性HSV感染;6.口咽念珠菌病;7.全身搔癢性皮炎;8.反復發生的敗血癥;9.深部真菌感染,馬爾尼非青霉菌;10.肺孢子蟲肺炎;11.活動性巨細胞病毒感染;12.弓形蟲腦病。13.反復發生、難治性肺部感染或進展迅速的活動性結核病;14.中樞神經系統受損、占位性病變或中、青年癡呆癥;15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。ⅠⅠ第14頁,共19頁,星期六,2024年,5月15診斷標準

★HIV抗體陽性

CD4+T淋巴細胞數<200/mm3無上述表現或癥狀第15頁,共19頁,星期六,2024年,5月16鑒別診斷原發性CD4+淋巴細胞減少癥

無HIV感染流行病學資料,HIV-1和HIV-2病原學檢測陰性。繼發性CD4+淋巴細胞減少

腫瘤和自生免疫性疾病(autoimmunedisease)化療或免疫抑制治療后。第16頁,共19頁,星期六,2024年,5月17預后第17頁,共19頁,星期六,2024年,5月18影響預后的因素感染的HIV型別及亞型:

HIV-1較HIV-2臨床進展快并發的機會性感染:

同時合并卡波濟肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高;合并丙型肝炎者預后差抗逆轉錄病毒治療:

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