抗生素效價的測定-微生物檢定法吳爽講師●生化藥物和生物制品●生物藥物的有效性是指單位劑量的生物藥物應能產生的特定生物效應。●有效性評價需采用能夠測定藥品生物學活性的生物技術方法。●常用的有效性測定技術：

生物測定法、生物活性測定法和效價測定法●用于確證藥品的真偽和效價。生物藥物定義抗生素效價的測定-微生物檢定法●《中國藥典》2015年版四部

通則3400生物測定法●27種技術一、生物測定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（一）生物活性測定法二、生物活性/效價測定法●《中國藥典》2015年版四部

通則1200生物活性測定法●17種技術

生化藥物的效價/活力測定技術抗生素效價的測定-微生物檢定法●抗生素微生物檢定法二、生物活性/效價測定法●在適宜條件下，根據量反應平行線原理設計，通過檢測抗生素對微生物的抑制作用，計算抗生素活性（效價）的方法。●以抗生素的抗菌活性為指標，測定原理與臨床應用一致，直接反映抗生素的醫療價值，試驗靈敏度較高，供試品用量較小，對產品純度限度要求較寬?！瘛吨袊幍洹贩椒ǎ汗艿ā岫确股匦r的測定-微生物檢定法（1）檢定原理二、生物活性/效價測定法●量反應平行線原理：因標準品和供試品為同種抗生素，在相同試驗條件下，標準品溶液和供試品溶液對試驗菌所得的量反應曲線，在一定劑量范圍內互相平行。●檢定方法：一劑量法（標準曲線法）、二劑量法、三劑量法等?！窨股匚⑸餀z定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（2）試驗菌二、生物活性/效價測定法●管碟法

枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、藤黃微球菌、

大腸桿菌、啤酒酵母、肺炎克雷伯菌、支氣管炎博德特菌●濁度法

金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、白念珠菌●抗生素微生物檢定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（3）管碟法二、生物活性/效價測定法●利用抗生素在瓊脂培養基內的擴散作用，比較標準品與供試品兩者對接種的試驗菌產生抑菌圈的大小，以測定供試品效價的一種方法?！駠H上抗生素藥品檢定的經典方法?！?/p>

《中國藥典》法定方法：二劑量法和三劑量法?！窨股匚⑸餀z定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（3）管碟法二、生物活性/效價測定法雙碟底層、菌層牛津杯二劑量法三劑量法測量各個抑菌圈的直徑（或面積）●抗生素微生物檢定法抗生素效價的測定-微生物檢定法（4）濁度法二、生物活性/效價測定法●利用抗生素在液體培養基中對試驗菌生長的抑制作用，通過測定培養后細菌濁度值的大小，比較標準品與供試品對試驗菌生長抑制的程度，以測定供試品效價的一種方法?！?/p>

《中國藥典》法定方法：

標準曲線法、二劑量法或三劑量法。●抗生素微生物檢定法微生物比濁法測定儀抗生素效價的測定-微生物檢定法【實例】《中國藥典》2015年版硫酸鏈霉素【含量測定】方法：精密稱取本品適量，加滅菌水定量制成每1ml中約含1000單位的溶液，照抗生素微生物檢定法（通則1201)測定。1000鏈霉素單位相當于1mg的C21H39N7O12。分析：按照“抗生素微生物檢定試驗設計表”規定，鏈霉素的試驗菌為枯草芽孢桿菌，培養條件為Ⅰ號培養基、35～37℃、14～16小時，選擇鏈霉素標準品（理論計算值798.3U/mg），抗生素濃度范圍0.6～1.6U/ml?？股匦r的測定-微生物檢定法（二）生物活性/效價測定法二、生物活性/效價測定法●《中國藥典》2015年版四部