二胚胎工程技術及其應用必備知識·夯實雙基一、體外受精1．試管動物：通過人工操作使卵子在__體外__受精，經培養發育為__早期胚胎__后，再進行移植產生的個體。2．體外受精技術的主要步驟：__卵母細胞的采集__、__精子的獲取__和__受精__。3．過程二、胚胎移植1．概念：是指將通過__體外受精__及其他方式得到的胚胎，移植到__同種的__、__生理狀態相同__的雌性動物體內，使之繼續發育為新個體的技術。2．胚胎移植的基本程序eq\x(\a\al(對供、受體的,選擇和處理))eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(選擇：遺傳性能和生產性能優秀的,個體（供體），健康、有正常繁,殖能力的個體（受體）,處理：__同期發情__處理和__超數排卵__,處理))↓eq\x(配種或__人工授精__)↓eq\x(\a\al(胚胎的收集、檢,查、培養或保存))eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(收集：沖卵,檢查：發育到__桑椹胚__或__囊胚__,階段,保存：－196℃的液氮中保存))↓eq\x(胚胎移植)↓eq\x(胚胎移植后的檢查)檢查受體母牛__是否妊娠__3．胚胎移植的意義(1)充分發揮雌性優良個體的__繁殖潛力__。(2)__大大縮短__了供體本身的繁殖周期。(3)對供體施行__超數排卵__處理后，增加后代數量。(4)推動胚胎工程及其他技術的研究和應用。三、胚胎分割1．概念：采用__機械方法__將早期胚胎切割成__2等份、4等份或8等份__等，經移植獲得同卵雙胎或多胎的技術。2．所需主要儀器設備：__體視顯微鏡__和__顯微操作儀__。3．操作對象及要求：選擇發育良好、形態正常的__桑椹胚或囊胚__，將它移入盛有操作液的培養皿中，在顯微鏡下用__分割針__或__分割刀__分割。在分割囊胚階段的胚胎時，要注意__將內細胞團均等分割__。4．胚胎分割的意義(1)促進優良動物品種的繁殖，產生__遺傳性狀__相同的后代用于遺傳學研究。(2)對胚胎進行__性別鑒定__、__遺傳病篩查__等，對于人工控制動物性別、動物繁育健康后代有重要意義。┃┃學霸記憶__■1．體外受精技術主要包括卵母細胞的采集、精子的獲取和受精等過程。2．采集到的卵母細胞和精子要分別在體外進行成熟培養和獲能處理才能完成受精。3．胚胎移植實質上是早期胚胎在相同生理環境條件下空間位置的轉移。4．動物的胚胎只有移植到同種且生理狀態相同的雌性動物體內才能成功。5．胚胎移植的優勢是可以充分發揮雌性優良個體的繁殖潛力6．胚胎分割應選擇形態正常的桑椹胚或囊胚，在分割囊胚階段的胚胎時，要注意將內細胞團均等分割。┃┃活學巧練__■1．為了獲得更多的卵母細胞，需用性激素對供體進行處理。(×)2．受精卵發育到原腸胚階段才能進行胚胎移植。(×)3．胚胎移植一般應在同種的雌性供體和受體之間進行，因為兩者生理特征相近，易于成功。(√)4．胚胎移植時，供體母畜需要具備優良的遺傳性能。(√)5．胚胎分割時需將原腸胚的內細胞團均等分割。(×)6．利用胚胎分割技術可以獲得兩個基因型完全相同的胚胎。(√)思考：1．試管動物與克隆動物有什么不同？提示：①生殖方式不同：試管動物屬于有性生殖，克隆動物屬于無性生殖。②培育的技術手段不同：試管動物需采用體外受精、胚胎移植等技術，克隆動物需采用核移植、胚胎移植技術。③是否遵循遺傳定律：試管動物遵循遺傳定律，克隆動物不遵循遺傳定律。2．超數排卵處理中為什么使用的是促性腺激素而不是性激素？提示：性激素是由性腺產生并釋放的，長期使用外源性激素會導致性腺萎縮。促性腺激素由垂體產生并釋放，作用于性腺，可以促進排卵，并且不會使性腺萎縮。3．胚胎分割的對象是什么？選擇此時期的胚胎進行分割的原因是什么？提示：桑椹胚或囊胚階段的胚胎。桑椹胚階段尚未出現細胞分化，具有全能性；囊胚階段的內細胞團具有全能性。4．分割囊胚期的胚胎時為什么強調將內細胞團均等分割？而鑒定胚胎的性別做DNA分析時卻是取樣的滋養層？提示：因為囊胚的內細胞團將來發育成胎兒的各種組織，滋養層發育成胎盤、胎膜。囊胚的內細胞團要均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。取滋養層細胞做DNA分析鑒定性別，不會影響胎兒的發育。課內探究·名師點睛知識點體外受精1．試管動物并非自始至終都在試管中發育，而是胚胎發育的早期在培養皿和試管中，胚胎發育的絕大部分時間在母體內。2．體外受精(1)原理：人工模擬體內環境(包括營養、溫度、pH等)，使卵母細胞成熟、精子獲能，最終完成受精。(2)主要步驟：卵母細胞的采集、精子的獲取和受精等。(3)過程：精子進行獲能處理，卵子進行成熟培養(發育到MⅡ期)，再進行體外受精。知識貼士體外受精形成的胚胎進行胚胎移植屬于有性生殖，核移植形成的胚胎進行胚胎移植屬于無性生殖，即判斷胚胎移植為何種生殖方式，關鍵要看胚胎是通過何種方式發育而來的。┃┃典例剖析__■典例1下列有關哺乳動物體外受精的敘述，正確的是(C)A．給實驗動物注射促性腺激素，使其產生更多的精子B．從輸卵管中采集的卵母細胞經培養后才能與獲能的精子受精C．獲能的精子和成熟的卵子，要在適當的培養液中完成受精D．卵母細胞與精子受精前均已完成減數第二次分裂解析：給實驗動物注射促性腺激素，目的是使其產生更多的卵子，A錯誤；從卵巢中采集的卵母細胞要在體外進行成熟培養，然后才能與精子共同培養，完成受精，B錯誤；一般情況下，獲能的精子和成熟的卵子要在適當的培養液中共同培養一段時間，來促使它們完成受精，C正確；次級卵母細胞減數第二次分裂是在精子和卵子結合過程中完成的，D錯誤。┃┃變式訓練__■1．下列是人工授精和體外受精的相同點的是(C)A．人工授精能更有效地發揮優良公畜的優良特性B．體外受精能更有效地發揮母畜的繁殖潛能C．人工授精和體外受精的本質相同D．人工授精的精卵結合過程發生在母畜體內，而體外受精的過程發生在母畜體外解析：人工授精能更有效地發揮優良公畜的優良特性，這是兩者的區別，A不符合題意；體外受精能更有效地發揮母畜的繁殖潛能，這是兩者的區別，B不符合題意；二者的本質都是兩性生殖細胞的結合，C符合題意；人工授精的精卵結合過程發生在母畜體內，而體外受精的過程發生在母畜體外，這是兩者的區別，D不符合題意。知識點胚胎移植1．胚胎移植的理解(1)胚胎的來源：通過轉基因、核移植、體外受精、體內受精等技術獲得的胚胎。(2)供體：提供胚胎的個體。(3)受體：接受胚胎的個體。eq\a\vs4\al(胚胎受體,的條件)eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(①同一物種的雌性個體,②進行胚胎移植的供體和受體的生,理狀態要相同))2．胚胎移植的生理學基礎項目內容胚胎移入的基礎哺乳動物發情排卵后，不管是否妊娠，在一段時間內，同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的胚胎收集的基礎哺乳動物的早期胚胎形成后，在一定時間內不會與母體子宮建立組織上的聯系，而是處于游離狀態移入胚胎存活的基礎受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應保留遺傳特性的基礎供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但移入受體的供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響3．胚胎移植的程序┃┃典例剖析__■典例2進行動物胚胎移植時，必須考慮的事項是(A)A．供體動物與受體動物生理狀態的一致性B．受體動物對供體胚胎的免疫排斥反應C．受體動物的子宮與供體胚胎建立組織上和生理上的聯系D．早期胚胎能否從供體子宮內完整地分離出來解析：哺乳動物的早期胚胎形成后，在一定時間內不會與供體子宮建立組織上的聯系，受體子宮對外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，并能建立組織上和生理上的聯系，這是動物胚胎發育和胚胎移植時的固有屬性。因此，在進行胚胎移植時不是必須考慮的。┃┃變式訓練__■2．在胚胎移植的操作過程中，對已經受精的動物，可進行沖卵等技術操作。下列相關敘述正確的是(B)A．接受手術的對象是胚胎移植的受體B．沖卵的目的是獲得已經受精發育的早期胚胎C．為獲得雌性胚胎進行移植，需取囊胚期的內細胞團細胞做性別鑒定D．受體對移入子宮的外來早期胚胎可通過細胞免疫將其排斥解析：沖卵實質上是將供體母牛子宮內的早期胚胎沖洗出來，此環節接受手術的對象是供體，A項錯誤，B項正確；進行性別鑒定時，需取滋養層細胞，C項錯誤；大量研究已經證明，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，這為胚胎在受體內的存活提供了可能，D項錯誤。知識點胚胎分割1．胚胎分割的基礎(1)理論基礎：細胞的全能性。(2)物質基礎：每個細胞核內具有相同的遺傳物質。2．胚胎分割的過程eq\x(選發育良好、形態正常的桑椹胚或囊胚)↓eq\x(移入盛有操作液的培養皿中)↓eq\x(用分割針或分割刀將胚胎切開)↓eq\x(吸出其中半個胚胎，注入空透明帶中，或將裸半胚移植入受體)↓eq\x(著床發育產仔)注意：胚胎分割的份數越多，操作的難度會越大，移植的成功率也越低。早期胚胎的體積很小，只有在顯微鏡下才能看到；再者，細胞數目是有限的。分割的份數越多，不但難以做到均等分割，每一份的細胞數會越少，而且作為囊胚期的胚胎內細胞團細胞所受的影響會更大。因此，分割的份數越多，技術的難度會越大，移植后恢復和發育的難度會越大，移植的成功率自然會降低。┃┃典例剖析__■典例3以下關于胚胎分割移植的說法，不正確的是(C)A．就目前的胚胎分割移植而言，產生的同卵雙胎較多，同卵多胎成功率較低B．胚胎分割所需要的主要儀器設備為體視顯微鏡和顯微操作儀C．可在囊胚階段將胚胎隨機分割成兩份或多份，然后移植D．用分割針將桑椹胚均分成兩部分，可直接將裸半胚移植入受體解析：實踐證明，采用胚胎分割技術產生同卵多胎的可能性是有限的，分割次數越多，分割后胚胎成活的概率越小。目前，二分胚胎的分割和移植效率最高，A項正確；胚胎分割所需要的主要儀器設備為體視顯微鏡和顯微操作儀，B項正確；在分割囊胚階段的胚胎時，要注意將內細胞團均等分割，以免影響胚胎的恢復和進一步發育，但對于不同發育階段的胚胎，分割的具體操作不完全相同，C項錯誤；分割后的胚胎可以直接移植給受體，或經體外培養后，再移植給受體，D項正確。┃┃變式訓練__■3．下圖是利用胚胎工程技術培育優質奶牛的主要步驟。下列敘述正確的是(B)A．胚胎移植可以定向改造動物的遺傳性狀B．A細胞不一定是受精卵C．①②兩個胚胎具有不同的遺傳物質D．圖中a過程包括桑椹胚、囊胚和原腸胚等階段解析：胚胎移植發育形成的個體性狀取決于供體，與受體無關，不能定向改造動物的遺傳性狀，A項錯誤；移植的胚胎可以由受精卵發育而成，或者通過克隆技術形成，B項正確；由同一個胚胎分割形成的不同個體含有相同的遺傳物質，C項錯誤；胚胎分割應該選擇早期胚胎，包括桑椹胚、囊胚階段，不包括原腸胚，D項錯誤。指點迷津·撥云見日一、胚胎分割動物與體細胞克隆動物的比較項目胚胎分割動物體細胞克隆動物相同點都屬于無性生殖，最終技術是胚胎移植不同點胚胎的來源雌性動物的早期胚胎或體外受精及其他方式得到的胚胎通過核移植技術獲得的重組胚胎遺傳物質胚胎分割動物具有相同的核遺傳物質，兩個親本提供的核遺傳物質一樣多克隆動物的核遺傳物質主要由供體細胞核提供起點經過受精作用形成的一個細胞經過核移植形成的一個細胞┃┃典例剖析__■典例4動物細胞培養是動物細胞工程的基礎。右圖中，a、b、c表示現代工程技術，①②③分別表示a、b、c的結果。下列說法正確的是(C)A．①②③中作為受體的動物品種是珍稀或存量少的雌性動物B．若a是胚胎分割技術，①中個體的基因型和表型一定相同C．若b是體外受精技術，②為試管動物，屬于有性生殖D．若c是核移植技術，③反映了動物細胞也具有全能性解析：珍稀的或存量少的雌性動物屬于保護動物，不能作為生物工程的受體，因此，①②③中作為受體的動物品種應該是本地中數量較多的雌性動物，A項錯誤；胚胎分割技術是將一個囊胚或者桑椹胚分割成兩份或多份獲得多個后代個體，屬于無性生殖，獲得的個體的基因型一般相同，但是表型是基因型和環境條件共同作用的結果，不一定相同，因此，若a是胚胎分割技術，則①中個體的基因型一般相同，但表型不一定相同，B項錯誤；若b是體外受精技術，②為試管動物，是通過體外受精和胚胎移植獲得的，屬于有性生殖，C項正確；動物細胞通過核移植技術獲得動物個體只能證明動物細胞的細胞核具有全能性，若c是核移植技術，則③不能反映動物細胞也具有全能性，D項錯誤。解疑答惑思考討論?P621．提示：不一定能正常發育。胚胎移植成功需要的條件：①在同一物種的雌性供體和受體之間進行。②進行胚胎移植的供體、受體的生理狀態要相同，所以在移植前要對供體、受體進行同期發情處理。2．提示：大量的研究已經證明，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應。3．提示：與供體保持一致。供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但移入受體的供體胚胎的遺傳特性，在孕育過程中不受任何影響。4．提示：正確。胚胎移植成功率的高低與供體、受體生理環境條件一致性密切相關。只有供體、受體生理環境高度一致，移入受體的胚胎才能被接受，并繼續發育。所以我們可以把胚胎移植簡單概括為早期胚胎在相同生理環境條件下空間位置的轉移。到社會中去?P64提示：胚胎分割用到哪些技術與工具？胚胎分割的關鍵操作是什么？胚胎分割主要應用在哪些方面？胚胎分割具有怎樣的意義？等等。練習與應用?P64一、概念檢測1．(1)×提示：要分別對采集來的卵母細胞和精子進行成熟培養和獲能處理，才能用于體外受精。(2)×提示：經胚胎移植的后代，其遺傳特性與供體保持一致。(3)×提示：受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應。2．提示：(1)體外胚胎培養胚胎移植(2)使用促性腺激素使其超數排卵。(3)要對采集到的卵母細胞進行成熟培養，對采集到的精子進行獲能處理。二、拓展應用(1)提示：動物細胞培養、動物細胞核移植、體外受精、胚胎移植、胚胎分割等技術。不一定。盡管相關技術已經在多種動物中獲得成功，但其成功率仍然非常低。技術的具體環節也有待進一步改進。不同動物，操作過程中也會有差異。(2)提示：由于親本個體少，人工繁育的種群，基因多樣性比野生種群低，基因庫小，對環境的適應能力弱。(3)提示：多種多樣的生物是生態系統的重要成員，是一個個獨特的基因庫。任何一個物種的滅絕都可能產生多米諾效應，使其他相關物種受到影響；進而威脅到生態系統的平衡與穩定。保護瀕危的野生動物，保護生物多樣性刻不容緩。訓練鞏固·課堂達標1．下圖是利用體外受精技術培育試管牛的大致過程，下列敘述錯誤的是(B)A．采集到的精子需在獲能培養液中進行獲能培養B．培育試管牛的胚胎發育過程在體外進行C．受精可以在專用的受精溶液中完成D．進行早期胚胎培養的目的是檢查受精狀況和受精卵的發育能力解析：采集到的精子需要在獲能溶液中進行獲能培養，A正確；試管動物是在體外受精，受精卵發育為早期胚胎后，再移植到母體產生的后代，B錯誤；減Ⅱ中期的卵子和獲能精子，一般都可以在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精，C正確；進行早期胚胎培養的目的是檢查受精狀況和受精卵的發育能力，D正確。2．我國引進良種紅安格肉牛后，使其快速繁殖使用的方法有(B)①組織培養②基因工程③體外受精和胚胎移植④克隆A．①③ B．③④C．①④ D．②④解析：動物組織培養的目的是獲取動物細胞和產物，①不符合題意；基因工程是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物新的遺傳特性，從而創造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品，不能快速繁殖動物，②不符合題意；體外受精和胚胎移植獲得試管動物，能縮短繁殖周期，增加繁殖的后代數量，③符合題意；將動物的一個細胞的細胞核移入另一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最