絲蛋白創面敷料臨床試驗報告〔主要結果〕11.1 爭論背景II度燒傷和供皮的敷料。在創面掩蓋物中，應用于II度燒傷創面和供皮區的敷料主要性能除了常規要求：包括粘附性、通透性、屏障功能、削減苦痛、順應性、耐用性、不干擾創面愈合過程以潮濕環境、主動抑制創面滲液滲出，具有促進創面壞死組織脫落，從而減輕炎癥反響絲蛋白創面敷料簡介主要用途①用于治療深II度及中厚供皮區創面為代表的深度創面或皮膚缺損：作為創面修復敷料，避開創面暴露，防止創面感染，減輕苦痛，促進創面愈合。②用于治療淺II度及刃厚供皮區創面為代表的淺度創面或皮膚缺損：作為創面修復作為創面治療敷料，應用時間：1—15天。形態構造1提純后，承受冷凍枯燥工藝加工而成，微孔材料的外觀為白色；上層12醫用硅橡膠膜(見圖2)。敷料厚度：2.0mm左右1絲蛋白創面敷料的構造示意圖上外表(b)下外表2絲蛋白創面敷料外表的掃描電子顯微鏡照片產品特性及作用機理面粘附；的流失；③良好的生物安全性：無細胞毒性、刺激性、過敏性；裂；⑤能減輕苦痛：保護神經末梢免受外界刺激；⑥促進創面愈合：利用蠶絲絲素蛋白良好的生物相容性和絲素微孔材料保水力氣，為的的基質過度沉積，無占位性；⑦適當的通透性：能把握水分蒸發。生產工藝過程桑蠶生絲—脫膠〔碳酸鈉溶液，98-100℃，2小時〕—洗滌—枯燥—絲素纖維—溶解〔氯化鈣的乙醇溶液，70℃，1-2小時〕—原料來源本產品使用的主要原料是桑蠶生絲——由定點繅絲廠生產。〔繅絲〕〔來自于綠色養蠶基地〕繭〔70—125℃，4-7小時〕—干繭—混繭—剝繭〔剝去蠶繭外層散亂的繭衣〕—選繭〔選除有明顯疵點的蠶繭〕—煮繭〔90—100℃水蒸氣及高溫水，10-18分鐘〕—繅絲〔將蠶絲從繭層上離解出來，合并假設干跟繭絲制成連續的生絲〕—復搖—整理〔絞絲、檢驗、包裝、再檢驗等〕—桑蠶生絲。原料絲素和生絲分別有相應的行業標準和國家標準。原料源頭把握：蠶種——家〔桑〕蠶種，來源于江蘇省蠶種場；養蠶及烘繭——蘇豪國際集團下屬蠶業公司溧陽綠色〔定點企業〕。產品特性說明－絲蛋白創面敷料的非吸取性：由于本品承受高溫等工藝處理，使絲素微孔材料內的絲素結晶化，使其在掩蓋在創面的短期〔15天〕[13]。－絲蛋白創面敷料的保水性：利用絲素的較強親水性，同時利用微孔絲素材料的多孔境。絲蛋白創面敷料的透濕性：絲蛋白創面敷料上外表的醫用硅橡膠膜能有效避開創面暴露，阻擋細菌入侵，削減水分、熱量、蛋白質和離子的流失；同時允許適量水蒸氣透過，可以有效防止創面積液。蠶絲絲素材料的安全性蠶絲絲素的構造〔桑蠶〕絲。蠶絲由絲素〔又稱“絲芯蛋白”,約占75%〕和絲膠〔約占25%〕兩種蛋白質組成。絲素纖維位于蠶絲內部，是纖維狀蛋白，結晶度較高，不溶于水；絲膠包裹于絲素外圍，是球狀蛋白，可溶于水。家蠶絲素的主要成分是H鏈，H鏈的核心區域由12個低簡潔度的“結晶”區域和11段幾乎一樣拷貝的43Gly-X94%的序列，X65%,絲氨酸占23%,酪氨酸占9%70個氨基酸殘,GAGAGSGAASGly-X嚴格重復。依據蠶絲絲素的產生原理，絲素蛋白純度高，不含有生物雜質5齡期后，蠶的絹絲腺〔蠶體內的一個腺體〕5排列的構造——液晶。吐出后即形成絲素纖維。要提純〔大〕高，不含有細胞、細胞器、其他蛋白、多糖、DNA或其片段、蠶病原微生物等生物雜質。尚未覺察蠶與人類存在病原微生物穿插感染的可能性蠶屬于昆蟲綱、鱗翅目、蠶蛾,在國內外大量的爭論說明，絲素蛋白材料具有牢靠的生物安全性20長。列舉幾篇爭論報道如下：UngerR.E.Unger,K.Peters,etal.Endothelializationofanonwovensilkfibroinnetforuseintissueengineering:growthandgeneregulationofhumanendothelialcells.Biomaterials,2023,25:5137-5146)爭論了幾種人源細胞對絲素蛋白無材料上的黏附和生長狀況。結果說明這些細胞在絲素材料的纖維上能快速黏附并擴增。細Zhang等(X.Zhangetal.Invitroevaluationofelectrospunsilkfibroinscaffoldsforvascularcellgrowth.Biomaterials，2023，29：2217-2227Kuniyo等(KuniyoInouye,MasatoKurokawa,ShigemichiNishikawa,MasuhiroTsukada.UseofBombyxmorisilkfibroinasasubstratumforcultivationofanimalcells.BiochemicalandBiophysicalmethods,1998,37:159-16)4爭論了多種哺乳動物30%和50%。絲素蛋白能促進貼壁細胞的生長，并且絲素材料可以替代膠原蛋白作為細胞培育的基質材料。Norihiko等(NorihikoMinoura,Sei-IchiAiba,etal.Attachmentandgrowthoffibroblastcellsonsilkfibroin.Biochemicalandbiophysicalpesearchcommunications,1995,2(208):511-516和增殖。IlariaDalIlariaDalPra,GiulianoFreddi,etal.Denovoengineeringofreticularconnectivetissueinvivobysilkfibroinnonwovenmaterials.Biomaterials,2023,26:1978-99生。L．MeinelReginaV,SamuelP,WayneM.OrientationofsilkⅢattheairwaterinterface.Journalofcolloidandinterfacescience,2023,266:68-7)3將蠶絲絲損部位，8周后生骨根本連接了缺損，說明蠶絲絲素支架材料具有良好的骨組織相容性。－— [47][89][1011][12]－— ISO標準要求RNAmRN的A[13]。－[1415]－曾在江蘇省藥監局注冊的“AST-1全有效〔原蘇州絲綢工學院〕“AST-1絲素創面保護膜”產品，注冊證號：蘇藥器監〔準〕95264098號〔附錄14.5〕。該產品曾批量用于臨床，臨床應用〔14.6〕好的透水蒸汽性，安全有效。“絲蛋白創面敷料”作為“AST-1絲素創面保護膜”的延長〔絲素蛋白〕仍連續了原產品未蠶絲絲素作為美國強生公司蠶絲手術縫合線原料，生物安全性久經考驗絲蛋白創面產品注冊型式檢驗結果顯示產品具有較高安全性pH值、無菌、重金屬含量、生物相容性等工程進展了檢測，并在此根底上制定了注冊產品標準，經江蘇完整，不裂開；在50℃±1℃環境中，收縮率為0.6％-1.1％，不大于5％；按YY/T0148C24h500g.m-2,符合標準要求；pH1級，符合標準要求；無皮膚致敏反響、無皮膚刺激反響。檢測結果說明：絲蛋白創面敷料具有較高的安全性。動物試驗試驗分組和動物模型制作SPFSD36只〔中國醫學科學院上海試驗動物中心〕230-250g。于術前一天硫化鋇脫毛，經2.5%戊巴比妥鈉〔35mg/kg體重〕腹腔注射麻醉，18〕凡士林紗布〔生產廠：紹興振德醫用敷料〕76度水溫燙傷103天，5天，8天，11天和14天取材。每組每個時相點動物數為3只。試驗過程如圖1—6。圖1SD麻醉大鼠 圖2硫化鋇脫毛17圖3SD大鼠脫毛后 圖4大鼠背部皮膚二度燙傷大鼠燙傷深度的檢測SD大鼠燙傷后，皮膚外表紅潤，輕度水腫。Masson”s染色觀看顯示：正常皮膚表圖7、圖8所示。圖7燙傷皮膚 圖8正常皮膚試驗取材和觀看于術后3天，5天，8天，11天和14天更換外敷料，同時進展創面大體觀察。另外，行創面組織取材，大小約0.5×0.5cm2，馬上置10%福爾馬林溶液固定。標本制成石蠟切片后，Masson”s染色觀看創面愈合過程中組織學變化〔膠原纖維呈綠色，胞漿呈紅色，胞核呈蘭黑色〕大鼠創面愈合過程的大體觀看3紅潤，如圖9、圖10所示。術后8天比照組創面外表形成黃色焦痂，質較硬。試驗組創面清潔，潮濕，大局部壞死組織已脫落，局部創面開頭上皮化，如圖11、圖12所示。術后14組創面已根本愈合，皮膚清潔光滑，如圖14所示。118天118天128天

103天

13、圖13比照組術后14天 圖14試驗組術后14天大鼠創面愈合過程的組織Masson”s 染色觀看3痂皮呈脫落趨勢，如圖15、圖16示。術后8天，比照組炎癥反響仍明顯，可見表皮層少量細胞生長聚攏，試驗組大量細胞在表皮層生長聚攏，如圖17、圖18所示。術后14天，表皮層仍在形成過程中，試驗組表皮層已形成，而且具備角質層構造，如圖19、圖20所示。圖19比照組術后3天 圖20試驗組術后3天圖23比照組術后8天 圖24試驗組術后8天27142814天動物試驗結論程的作用。鑒于“絲蛋白創面敷料”在動物試驗中表現出一種優異的生物敷料特性，結合蘇州市華信絲綢技術開發公司生產的“AST-1創面保護膜”〔主要材料為絲素蛋白〕的臨床試用報告〔附錄14.6〕，顯示出“絲蛋白創面敷料”具有良好的應用前景。因此，有必要性能。

2、臨床一般資料本臨床試驗依據絲蛋白創面敷料臨床試驗方案的要求進展，針對本試驗臨床過程中消滅者溝通并解決。具體標準如下：受試者入選標準：年齡18～65歲，性別不限；假設為燒傷患者，二度燒傷創面〔含淺Ⅱ度，深Ⅱ度〕限于三天以內的穎30%；病人同意參與本試驗，并簽署知情同意書；無嚴峻心、肝、腎及血液系統合并癥及無全身嚴峻感染者；非甲肝、乙肝、艾滋病、結核等傳染性疾病處于活動期者；受試者排解標準：〔1〕1865歲以上者；〔2〕III度燒傷面積大于30％或伴有嚴峻全身感染者；〔3〕原有嚴峻心臟病、不穩定〔4〕原有慢性腎臟疾病，腎功能不全，入院時血清肌酐大于正常上限的 1.25倍；〔5〕原有明確的肝臟疾病，入院時肝功能AST或ALT大于正常值上限的1.5倍；〔6〕哺乳期、孕期的婦女；〔7〕4周內使用過對主要臟器有損害的藥物者；〔8〕有哮喘、蕁尋麻疹等過敏體質的患者，對絲素蛋白材料有過敏史者。糖尿病患者；有精神疾患者。全身或局部使用促進創面愈合藥物的患者；爭論者認為不宜參與本臨床試驗的患者。受試者剔除標準：試驗期間覺察違反入選要求，予以剔除；試驗期間如因不良大事不得不去除移植物或實行其他治療，則實行相應的治療措施，并予以脫落處理；受試者撤消知情同意、依從性差、治療無效改用其它療法者；〔4〕必需記錄并通知監查員。〔1〕試驗中消滅嚴峻的安全性問題，應準時中止試驗；申辦者要求中止；試驗過程中試驗方案有重大失誤，難以評價治療的安全性和有效性；行政部門要求中止。選擇對象數量及選擇理由依據本臨床試驗爭論的主要療效指標創面愈合時間估量樣本量。本爭論假設為：絲蛋白創面敷料用于II度燒傷創面及供皮區創面掩蓋的愈合時間與滅菌凡士林紗布不等。試驗參數設定：假設假定α=0.05，Power=80%，試驗組：比照組按1：1設計。依據文獻資料，兩組創面愈合時間合并的標準差約為 2天左右，假設試驗組創面愈合時間較比照組縮短1天，估量試驗組為32例、比照組32例。考慮到實際可能發生的脫落〔20%計〕，3636例。依據淺IIII層設計，淺II度燒傷創面及刃厚皮供皮區創面72例〔試驗組36例、比照組36例〕，深II二度燒傷創面及中厚皮供皮區創面72例〔試驗組36例、比照組36例〕，共14401上海交通大學醫學院6666附屬瑞金醫院2402南通大學附屬醫院121212124803蘇北人民醫院121212124804中國人民蘭軍區蘭州總醫院州666624合計36363636144中心中心供皮區創面 供皮區創面合計試驗組 比照組 試驗組 比照組創面感染治療創面。過敏反響馬上停頓使用本產品，查明過敏緣由。不良大事處理在試驗中如消滅嚴峻不良大事，擔當臨床爭論的單位須馬上實行必要措施，保護受試者安全，并在243、臨床試驗方法本臨床試驗承受隨機、開放、滅菌凡士林紗布平行比照試驗設計。將入選病人隨機分成試驗與比照兩組，淺IIII度燒傷創面及中厚皮供全性和臨床療效。隨機分組本爭論雖為開放性試驗，但為避開受試者入組時可能存在的選擇性偏倚，由南京醫科大學流行病與衛生統計學系生物統計學專業人員承受計算機SAS程序模擬產生隨機數，分組。比照本試驗承受滅菌凡士林紗布作為比照組。試驗創面的選擇由于關節等活動部位及持續受壓迫部位可能會影響傷口愈合程度和時間，因此，試驗用器械試驗用器械由蘇州蘇豪生物材料科技、紹興振德醫用敷料有限公司供給。試驗組：規格型號：20100mm；10100mm〔SHF-1型〕〔企業標準〕20230901比照組：〔滅菌批號：3.5. 倫理學要求本臨床試驗必需遵循赫爾辛基宣言和中國有關臨床試驗爭論法規、規范進展。在試驗書，并以爭論檔案保存其中。3.6. 試驗流程試驗流程圖訪視訪視使用前〔1〕2345與手術日相比的時間天數〔天〕創面完全愈合71014知情同意書X人口學資料X病史記錄和體格檢查X血常規XXX尿常規XXX血肝腎功能XXX使用日當天觀看X使用后創面觀看XXXX記錄不良大事XXXX注：血生化包括ALT、AST、BUN、Cr。對于淺二度燒傷創面及刃厚皮供皮區創面，于訪視點2進展第2次血常規、尿常規、肝腎功能檢查，并42次血常規、尿常規、肝腎功能檢查，并翻開創面觀看、記錄。:,:是否固定良好。使用后創面觀看：創面愈合狀況，記錄病人的苦痛程度、創面邊緣的炎性反響程度。入院 有可能 知情

,不入組

,,填篩,保存知情同意檢查 入組 同意

按方案 體檢:

編號絲蛋白創面敷料臨床試驗流程簡要圖示7．絲蛋白創面敷料使用方法：〔1〕貼附前貼附前，應用無菌生理鹽水充分浸泡絲蛋白創面敷料，必要時更換生理鹽水。〔2〕貼附時依創面大小，貼附1張或數張，與創面嚴密貼附。手術時將“微孔”面〔微孔材料面，白色或淡黃色〕面對創面貼附。使用多張產品時，產品與產品之間依據需要固定。〔3〕貼附后上面用紗布掩蓋固定。〔4〕留意事項本品由專業醫生貼附或在專業醫生指導下貼附。本品為無菌產品，開封后應馬上使用。開封后未用完局部應丟棄，本產品不得再次滅菌使用。如覺察鋁箔包裝袋有破損，制止使用3.8、臨床觀看時間點及觀看要求臨床觀看時間點的設置如下：訪視1創面使用絲蛋白創面敷料或凡士林油紗布就位前、就位后訪視27天訪視310天訪視414天訪視5創面完全愈合〔訪視點〕觀看時間在各訪視點按臨床評價標準記錄一次病人創面的愈合狀況、苦痛程度〔訪視點〕觀看時間1II度創面；絲蛋白創面敷料或滅菌凡士林紗布就位后是否固定良好。訪視點2II創面愈合狀況，拍照記錄并測量創面大小、病人的苦痛程度、創面邊緣的炎性反響程度，II視創面愈合狀況翻開或不翻開創面，記錄病人的苦痛程度、創面邊緣的炎性反響程度，不3創面邊緣的炎性反響程度，不進展血常規、尿常規、肝腎功能檢查。訪視點4IIII5邊緣的炎性反響程度，不進展血常規、尿常規、肝腎功能檢查。安全性評價試驗中親熱觀看不良大事并評價，對臨床消滅的不良反響，應準時、樂觀地治療，隨訪至病癥消逝，并記錄。度、創面邊緣的炎性反響程度。觀看工程〔1〕人口學資料：性別、年齡。〔2〕生命體征：呼吸、體溫、心率。〔3〕一般臨床資料：病史、查體狀況。〔4〕試驗室檢查——血常規、尿常規、肝、腎功能。〔5〕有效性評價——按有效性評價標準進展觀看。〔6〕4、所承受的統計方法及評價方法FAS〔FullAnalysisSet〕:ITT原則確定1符合方案集PPS〔Per-ProtocolSet〕:是FAS總集的子集合，包括全部符合試驗方案、依從性好、試驗期間未用用品、完成CRF的病例。安全性分析集SAS〔SafeAnalysisSet〕：即安全性數據集，指用過試驗敷料并至少有一次安全性評價記錄的病例。FASFASPPS進展分析，但以FAS分析的結論為主。當FAS和PPS所得結論一致時，可以增加結論的可信度。統計分析打算統計分析將承受SAS9.1.3統計分析軟件進展計算。全部統計檢驗p0.05不同治療組各次就診的計量資料將承受均數±標準差進展統計描述。與篩選期根底值t〔ANOVA〕進展比較。不同治療組各次就診的計數資料承受頻數〔構成比〕進展統計描述。兩組治療前后的20變化承受X檢驗或非參數檢驗。〔1〕脫落分析：兩組總脫落率和由于不良大事而脫落的比較將承受X2檢驗。〔2〕根底值的均衡性分析：承受方差分析或X2檢驗來比較將人口學資料和其它根底值指標，以衡量兩組均衡性如何。〔3〕床試驗，在作此分析時，將考慮中心效應對療效指標的影響。〔4〕安全性分析：承受X2檢驗或精準概率計算比較兩組不良大事發生率，并列表描述本次試驗所發生的不良大事。5、臨床評價標準創面愈合狀況21愈合率＝

治療前傷口面積－治療后未愈傷口面積治療前傷口面積

10％傷口面積測量方法：承受坐標紙尺放置于傷口邊緣，拍照記錄并計算面積。痊愈：創面愈合率≥90％90%＞創面愈合率≥60％進步：60%＞創面愈合率≥20％無效：創面愈合率＜20％有效率＝〔痊愈人數＋顯效人數〕 /觀看人數×100％程度工程紅腫程度工程紅腫熱滲液無輕中重0123012301230123、苦痛程度評分承受VAS法對患者自覺病癥進展評估。即承受一條長約10厘米的標尺,一面標有10個刻度,兩端分別“0“分端和“10“分端“0“分表示無痛,“10“、不良反響評價不良反響發生率計算公式如下：該組病例總數%=不良反應病例數該組病例總數該組病例總數6、臨床試驗結果入組狀況及依從性本臨床試驗隨機入組144例，創面應用滅菌凡士林紗布者〔A組〕，72例，脫落4例，實為68例；創面應用絲蛋白創面敷料者〔 B組〕，72例，10％222317113953.74%6-1-1,6-1-26-1-3，輕度違反方案未剔除病例狀況見表6-1-4。可比性〔或滅菌凡士林紗布〕可比。具體項臨床數據比較參考表6-2-1至表6-2-7。受試者在性別、年齡、試驗前對本疾病的治療、創面類型、創面部位、創面面積等一般資料方面，兩組間比較差異均無統計創面愈合狀況全部入組受試者的創面最終都愈合。但創面應用絲蛋白創面敷料者平均愈合時間比應〔P=0.0013，P=0.0018〕；凡士林紗布者，統計分析有顯著差異〔P=0.0049〕；分層分析說明，深II度創面應用絲安全性評價心率、呼吸、體溫變化：不良影響。在兩組受試者療程中，心率、呼吸、體溫變化根本相像，組間比較差異無統計學意義，具體參考表 6-4-1、6-4-2。血、尿各項化驗結果：臨床結果顯示：絲蛋白創面敷料作為創面臨時性掩蓋物，到達了安全，無致敏、免疫排斥反響的要求。臨床試驗過程中，兩組受試者均無致敏、肝腎功能損傷等不良反響。血尿常規、肝腎6-4-3至表6-4-9。主要療效指標：創面愈合時間〔天〕臨床統計數據結果說明：創面應用絲蛋白創面敷料者愈合天數比應用滅菌凡士林紗布者短。FAS分析〔參考表6-5-1〕：創面應用絲蛋白創面敷料者和應用滅菌凡士林紗布者兩組中位愈合天數〔比照A組為14天，試驗B組為12天〕組間比較差異有統計學意義〔P=0.0013〕。分層分析爭論結果如下：淺 II度兩組中位愈合天數〔比照A組為14天，試驗B組為13天〕組間比較差異有統計學意義〔P=0.0349〕，深II度兩組中位愈合天數〔比照驗B組為12天〕組間比較差異也有統計學意義〔P=0.0139〕。

A14天，試PPS分析〔參考表6-5-2〕：創面應用絲蛋白創面敷料者和應用滅菌凡士林紗布者兩組中位愈合天數〔比照A組為14天，試驗B組為13天〕組間比較差異有統計學意義〔P=0.0018〕。分層分析爭論結果如下：淺 II度兩組中位愈合天數〔比照A組為14天，試驗B組為13天〕組間比較差異有統計學意義〔P=0.0370〕，深II度兩組中位愈合天數〔比照試驗B組為12天〕組間比較差異也有統計學意義〔P=0.0189〕。

A14天，創面愈合狀況：臨床統計結果說明：使用后7天B組痊愈率和顯效率高于A組；使用后14天，II度創使用后7天臨床療效FAS分析(參考表6-6-1)：兩組療效等級比較差異有統計學意義(P=0.0049)；A組的痊愈率為7.94%，B組的痊愈率為27.94%，校正中心效應組間比較差異有統計學意義 (P=0.0027)；A組的顯效率為9.52%，B組的顯效率為32.35%，校正中心效應后組間比較差異有統計學意義(P=0.0011)。使用后14天臨床療效FAS分析(參考表6-6-2、6-6-3)：創面應用絲蛋白創面敷料者(B組)和應用滅菌凡士林紗布者(A(P=0.0321)。創面應用絲蛋白創面敷料者痊愈率為78.87%，而應用滅菌凡士林紗布者為 62.69%，校正中心效應組間比較差異有統計學意義(P=0.0262)；A組的顯效率為71.64%，B組的顯效率為83.10%，校正中心效應后組間比較差異無統計學意義(P=0.0949)。分層分析結果顯II(P=0.7669)，兩組痊愈率及顯效率校正中心效應后組間比較差異無統計學意義(P=0.7386，P=0.8077)；深II度中兩組療效等級比較差異有統計學意義(P=0.0042)，兩組痊愈率及顯效率校正中心效(P=0.0023P=0.0204)。應用滅菌凡士林紗布者主訴創面換藥時苦痛嚴峻。兩組療程中分別都以用藥后7天、10天和14天換藥時為苦痛觀看記錄點，兩組間比較差異統計結果分別是： P<0.0001、P<0.0001、P=0.0006，兩組間比較差異有統計學意義。具體參見表6-6-4。創面炎癥反響：26臨床數據顯示：應用絲蛋白創面敷料的創面無明顯的炎癥反響用絲蛋白創面敷料對創面前期有抑制滲液滲出效果。

，且應臨床過程中，應用絲蛋白創面敷料和應用滅菌凡士林紗布的兩組創面在紅、腫、熱方7面敷料對創面早期有抑制創面滲出效果，且組間比較有統計學意義〔P＝0.0395，P＝0.0103〕，6-6-5。7、臨床試驗中覺察的不良