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文檔簡介

知識目標掌握:抗原抗體結合力和抗原抗體反應特點(重難點)。熟悉:影響抗原抗體反應因素(難點)。了解:抗原抗體反應原理(難點)、抗原抗體反應類型。教學目標能力目標利用抗原抗體反應的特點進行免疫學檢測。思政-素質目標嚴謹求實的作風、質控、生物安全意識等抗原抗體反應特點。影響抗原抗體反應因素??乖贵w反應原理。本章要點二三四目錄一抗原抗體反應原理抗原抗體反應特點抗原抗體反應的影響因素抗原抗體反應類型抗原抗體在體內體外能發生特異性結合。由于抗原理化性狀和抗體類型不同,抗原抗體結合后表現出不同的反應類型,可用于疾病的診斷、病原鑒定、藥物分析等檢測。如何利用抗原抗體反應的特點準確的進行免疫學檢測是一個重要內容。前言基本概念抗原抗體反應

抗原與抗體在體內或體外發生的特異性結合反應。抗原抗體反應的原理和物質基礎:抗原表位與抗體高變區間的互補結合在極短距離內才能發生一抗原抗體反應原理一、抗原抗體結合力靜電引力:又稱庫倫引力指帶電離子基團(如:—NH3+和COO-)之間的引力,距離越近引力越大。范德華引力:

原子與原子、分子與分子相互接近時分子極化作用發生的一種吸引力,其決定分子空間構型。能量小于靜電引力。氫鍵:由分子中H原子與電負性大的O和N原子等相互作用形成的引力,結合力較范德華力強,因為需要受氫體和供氫體之間的互補形成氫鍵,因此更具有特異性。疏水作用:疏水集團相互排斥水分子而趨于聚集的力。作用力最強,占總結合力的50%。

二、抗原抗體親和力和合力親和力(affinity)抗體分子上一個抗原結合點與對應的抗原決定簇之間的結合強度,用平衡常數K值表示,K值越高抗原抗體結合越牢固親合力(avidity)

一個完整的抗體結合部位與若干個抗原表位之間結合的強度。三、親水膠體轉化為疏水膠體形成可見抗原抗體反應抗原/抗體結合水化層變薄,失去親水性電解質中和膠體粒子表面電荷,使各疏水膠體進一步靠攏疏水膠體知識目標掌握:抗原抗體結合力和抗原抗體反應特點(重難點)。熟悉:影響抗原抗體反應因素(難點)。了解:抗原抗體反應原理(難點)、抗原抗體反應類型。教學目標能力目標利用抗原抗體反應的特點進行免疫學檢測。思政-素質目標嚴謹求實的作風、質控、生物安全意識等抗原抗體反應特點。影響抗原抗體反應因素。抗原抗體反應原理。本章要點一三四目錄抗原抗體反應原理二抗原抗體反應特點抗原抗體反應的影響因素抗原抗體反應類型二抗原抗體反應特點

特異性:抗原與抗體結合反應的專一性。分子基礎:抗原表位與抗體分子高變區之間空間構型的互補性。交叉反應:兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結構的抗原表位,可與彼此相應的抗血清發生反應。缺點:影響檢測的準確性優點:協助檢測一、特異性抗原與相應抗體結合成復合物后,在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性(非共價鍵結合)影響因素:抗體對相應抗原的親合力:親合力越高,結合越牢固,越不易解離。環境因素對復合物的影響:pH(破壞離子間的靜電引力)、離子強度(破壞離子間的靜電引力)二、可逆性前帶(prezone):抗體過量后帶(postzone):抗原過量等價帶(equivalencezone):抗原抗體比例合適三、比例性

免疫學檢測時,由于帶現象的干擾,導致假陰性結果??贵w的兩個Fab段分別結合兩個Ag分子,相互交叉結合連接成巨大的網格狀立體聚合物,(可見)。二者比例合適過剩方的結合價得不到飽和,大多數游離存在,只形成小分子復合物(不可見)。由此可知:確定

的濃度非常重要,即在實驗中需對Ag/Ab進行適當的

,調整二者的比例,產生可見反應。

一般原則:固定

含量(Ag/Ab)的濃度,稀釋

含量的(Ab/Ag)。

一般可溶性Ag稀釋

,顆粒性Ag,稀釋

。Ag/Ab稀釋低高AgAb第一階段:特異性結合階段,反應快,不可見(數秒或數分鐘內完成)。第二階段:反應可見階段,反應慢(數分鐘或數小時或數日)),出現凝集、沉淀和細胞溶解等現象。受電解質、溫度和酸堿度影響。四、階段性知識目標掌握:抗原抗體結合力和抗原抗體反應特點(重難點)。熟悉:影響抗原抗體反應因素(難點)。了解:抗原抗體反應原理(難點)、抗原抗體反應類型。教學目標能力目標利用抗原抗體反應的特點進行免疫學檢測。思政-素質目標嚴謹求實的作風、質控、生物安全意識等抗原抗體反應特點。影響抗原抗體反應因素。抗原抗體反應原理。本章要點一二三四目錄抗原抗體反應原理抗原抗體反應特點抗原抗體反應的影響因素抗原抗體反應類型三抗原抗體反應的影響因素一、自身因素抗原:抗體來源:

驢和馬免疫血清:等價帶較窄(H型抗體)兔:等價帶較寬(R型抗體)

濃度:比例合適出現可見反應親合力

可溶性抗原+相應抗體→沉淀顆粒性抗原+相應抗體→凝集單價抗原--不凝集或沉淀二、環境因素知識目標掌握:抗原抗體結合力和抗原抗體反應特點(重難點)。熟悉:影響抗原抗體反應因素(難點)。了解:抗原抗體反應原理(難點)、抗原抗體反應類型。教學目標能力目標利用抗原抗體反應的特點進行免疫學檢測。思政-素質目標嚴謹求實的作風、質控、生物安全意識等抗原抗體反應特點。影響抗原抗體反應因素??乖贵w反應原理。本章要點一二三四目錄抗原抗體反應原理抗原抗體反應特點抗原抗體反應的影響因素抗原抗體反應類型四抗原抗體反應類型反應類型實驗技術結果判斷凝集反應直接凝集試驗觀察凝集現象間接凝集試驗同上抗球蛋白試驗同上沉淀反應液相沉淀試驗觀察沉淀,檢測濁度免疫電泳技術觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與的反應補體溶血試驗觀察測定溶血現象補體結合試驗同上抗原-抗體反應的類型反應類型實驗技術結果判斷中和反應病毒中和試驗檢測病毒感染性毒素中和試驗檢測外毒素毒性標記免疫反應熒光免疫技術檢測熒光現象放射免疫技術檢測放射性強度酶免疫技術檢測酶底物顯色發光免疫技術

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