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文檔簡介
酶的特性一、試驗目的1PH對酶活力的影響、激活劑和抑制劑對酶活力的影響二、試驗原理本試驗由溫度對酶活力的影響;PH對酶活力的影響;酶的激活劑及抑制劑;酶的4組試驗組成。〔一〕溫度對酶活力的影響酶的催化作用受溫度的影響。在最適溫度下,酶的反響速度最高。大多數動物酶37-40℃,植物酶的最適溫度為50-60℃。100℃,其活性并無明顯的轉變,但在100℃的溶液中卻很快地完全失去活性。低溫能降低酶或抑制酶的活性,但不能使酶失活。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈藍色、紫色、暗褐色或紅色。最簡潔的糊精遇碘不呈顏色,麥芽糖遇碘也不呈色,在不同溫度下,淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈現的顏色來推斷。〔二〕PH對酶活力的影響酶的活力受環境PH值的影響極為顯著。不同酶的最適PH不同。本試驗觀看PH對唾液淀粉酶活性的影響。唾液淀粉酶的最適PH6.8。〔三〕唾液淀粉酶的活化及抑制酶的活性受活化劑或抑制劑的影響,氯離子為唾液淀粉酶的活化劑,銅離子為其抑制劑。酶具有高度的專一性。本試驗以唾液淀粉酶和蔗糖酶對淀粉和蔗糖的作用為例,來說明酶的專一性。〔四〕酶的專一性淀粉和蔗糖無復原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有復原性的麥芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用Benedict試劑檢查糖的復原性。三、試驗物品儀器:試管及試管架,恒溫水浴,冰浴,沸水浴,吸管,滴管,錐形瓶藥品: 稀釋30倍的唾液(用蒸餾水漱口,以去除食物殘渣,再含一口蒸餾水,半分鐘后使其流入量筒并稀釋30倍。混勻備用。)KI-I碘溶液(將KI20g及I10g溶于100ml10倍。)2 20.2molNa2HPO3溶液,1%NaCl溶液,1%CuSO4溶液,1%Na2SO4溶液,2%蔗糖溶液,0.1%淀粉溶液,溶于0.3%NaCl的1%淀粉溶液,溶于0.3%NaCl的0.2%淀粉淀粉0.3%NaCl0.5%淀粉溶液四、試驗過程〔一〕溫度對酶活力影響往三只試管各參加1.5ml0.2%0.3%NaCl溶液,冰浴5min,再參加已冰浴5min的稀釋唾液1ml,搖勻后,將1號試管連續冰浴、2號兩試管放入37℃恒溫水浴中,3號試管放入沸水浴中,10min后去處,將2號管內液體分為兩半,用KI-I2溶液來檢驗1、2、32號管管號1234剩下的一半溶液放入管號12340.2%淀粉的1.51.51.51.50.3%NaCl溶液〔ml〕冰浴5min稀釋唾液1111〔ml〕〔已冰5min〕冰浴10min37℃恒溫水浴沸水浴10min冰浴5min后轉10min37℃恒溫水浴10minKIKI-I液21-2滴〔二〕PH對酶活力的影響取四個標有號碼的50ml試管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和0.1檸檬酸溶液以制備pH5.0-8.01分鐘。將各試管中物質混勻,并依次置于37℃恒溫水浴中保溫。隨后于每個試管中添加0.52ml和稀釋2002ml,待向第4管參加唾液2ml后,每隔1分鐘由第3管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1KI-I2
溶液。添加KI-I21-2滴KI-I溶液。添加滴KI-I溶液的時間間隔,從第1管起,亦均為1分鐘。2 212340.2mol/l12340.2mol/lNa2HPO3溶液〔ml〕2.633.94.90.1mol/L檸檬酸2.421.10.1PH55.86.880.5%淀粉的0.3%NaCl溶液〔ml〕2222稀釋唾液〔ml〕2222混勻,于37℃恒溫水浴中保溫〔三〕唾液淀粉酶的活化及抑制往四只編好號的試管中各參加1.5ml的0.1%淀粉溶液,然后往1號試管參加0.5ml1%NaCl溶液,往20.5ml1%CuSO4溶液,往30.5ml1%1%Na2
SO4溶液,往4號試管參加0.5ml蒸餾水,于37℃恒溫水浴中保溫5分鐘,然后參加2-3KI-I2
溶液,觀看試驗現象,并分析酶的活化及抑制。管號0.1%管號0.1%淀粉溶液〔ml〕稀釋的穎唾液〔ml〕1%NaCl溶液〔ml〕1%CuSO4溶液〔ml〕1%NaSO4溶液2〔ml〕蒸餾水〔ml〕---------------------0.537℃恒溫水浴中保溫5分鐘KI-I溶液22-3滴管號12341%淀粉的0.3%NaCl溶液〔滴〕442%蔗糖溶液〔滴〕4412341.51.51.51.50.50.50.50.50.5---------------------------0.5----------------------------0.5-------〔四〕酶的專一性取四只編好號的試管,往1和34滴1%0.3%NaCl溶液,往2和4號參加4滴2%蔗糖溶液;往1和2號試管參加1ml蒸餾水;3和4號試管參加1ml唾液稀釋液,將四支試管置于37
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