實(shí)驗(yàn)一可溶性還原性糖脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè)_第1頁
實(shí)驗(yàn)一可溶性還原性糖脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè)_第2頁
實(shí)驗(yàn)一可溶性還原性糖脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè)_第3頁
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文檔簡介

關(guān)于實(shí)驗(yàn)一可溶性還原性糖脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè)第一頁,共八頁,編輯于2023年,星期一一、實(shí)驗(yàn)原理可溶性還原糖+蛋白質(zhì)+脂肪+斐林試劑雙縮脲試劑磚紅色沉淀蘇丹Ⅲ染液蘇丹Ⅳ染液橘黃色紅色紫色顏色反應(yīng)水浴加熱可溶性還原糖:葡萄糖、果糖、麥芽糖(蔗糖、淀粉都沒有還原性)

第二頁,共八頁,編輯于2023年,星期一二、幾種重要的試劑斐林試劑甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)現(xiàn)配現(xiàn)用等量混合均勻雙縮脲試劑A液(0.1g/mL的NaOH溶液)B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)現(xiàn)配現(xiàn)用先加A液再加B液第三頁,共八頁,編輯于2023年,星期一三、實(shí)驗(yàn)材料還原糖鑒定:淺色、白色且富含還原糖的材料,如蘋果、梨、白蘿卜的勻漿(西瓜汁、甘蔗不符合)蛋白質(zhì)鑒定:稀釋蛋清液、牛奶、豆?jié){等脂肪鑒定:花生子葉徒手切片第四頁,共八頁,編輯于2023年,星期一四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟1、可溶性還原糖的鑒定(1)制備組織樣液:蘋果洗凈、去皮、切塊→取5g加少許石英砂研磨→加5mL水再研磨→漏斗墊紗布后過濾,得到樣液(2)鑒定樣液:取2mL樣液于試管中→注入2mL剛配制的斐林試劑,振蕩混合(淡藍(lán)色)→水浴煮沸2min左右,觀察溶液顏色變化(先變?yōu)樽厣僮優(yōu)榇u紅色)第五頁,共八頁,編輯于2023年,星期一2、脂肪的鑒定(1)切片制作(2)染色:在花生子葉切片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ染液→2~3min中后,吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精,再滴1~2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片(3)鏡檢鑒定:在低倍物鏡下觀察,找到花生子葉切片的最薄處,移至視野中央→轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,換用高倍物鏡觀察(脂肪滴:橘黃色的圓形小顆粒)第六頁,共八頁,編輯于2023年,星期一3、蛋白質(zhì)的鑒定(1)制備組織樣液:浸泡黃豆1~2d→去皮、切成薄片,加少許石英砂及5mL水研磨→漏斗墊紗布后過濾,得到樣液(用蛋清要稀釋10倍以上,否則實(shí)驗(yàn)后黏住試管壁不易洗凈)(2)鑒定樣液:取2mL樣液于試管Ⅰ中→加入

2mL雙縮脲試劑A液搖勻(造成一個(gè)堿性環(huán)境)→加入雙縮脲試劑B液3~4滴,搖勻,注意顏色變化(溶

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