實用標準文案2017年臨床檢驗技師考試生化檢驗第十章重要考點肝膽疾病的實驗室檢查本章考點：1.肝膽生化肝臟的代謝肝臟的生物轉化功能膽汁酸代謝紊亂與疾病膽紅素代謝與黃疸2.肝膽疾病的檢查酶學檢查方法學評價、參考值及臨床意義膽紅素代謝產物和膽汁酸測定的方法學評價及臨床意義肝纖維化標志物的測定及其臨床意義肝昏迷時的生化變化及血氨測定3.肝細胞損傷時的其他有關檢查及臨床意義蛋白質代謝異常的檢查精彩文檔實用標準文案糖代謝異常的檢查脂代謝異常的檢查各種急、慢性肝病時綜合考慮應選擇的試驗及其臨床意義肝是人體重要的代謝器官，對維持機體內外其環境的穩定起著十分重要的作用 .其主要功能有：1.代謝功能，參與糖、脂類、蛋白質、維生素的合成、分解和儲存 ;核酸代謝;激素的生物轉化;膽紅素和膽酸的代謝。2.排泄功能，如膽紅素、膽酸、藥物、某些陰離子染料等的運輸和排泄。3.解毒功能，參與對藥物、毒物等化合物的氧化、還原、水解、結合等。4.凝血和纖溶因子、纖溶抑制因子的生成及對活性凝血因子的清除等。在正常情況下，肝臟各種功能有條不紊地進行， 當肝臟受到各種致病因素侵襲時， 其功能狀態和組織結構必然受到影響。肝的病理狀態大致可分為肝細胞損傷， 間質反應，膽汁淤積，局限性肝損害及肝血管系統損害五種。以上病理改變往往合并存在， 但有所側重，從而出現各種肝病的實驗室檢查特征，導致有關的試驗結果異常。第一節 肝膽生化一、肝臟的代謝功能精彩文檔實用標準文案1.糖代謝:肝臟是維持血糖濃度相對穩定的重要器官。肝臟通過肝糖原的合成分解及糖異生作用維持血糖濃度的恒定。2.蛋白質代謝：合成與分泌90%以上的血漿蛋白質，其中合成量最多的是白蛋白。肝臟合成的許多凝血因子和纖維蛋白原等，在血液凝固功能上起重要作用。轉化和分解氨基酸合成尿素。3.脂類代謝：肝臟在脂類的消化、吸收、分解、合成及運輸等代謝過程中均起重要作用。肝分解甘油三酯和脂肪酸的能力很強，參與脂肪酸的β氧化，并且進行酮體合成肝細胞是合成膽固醇、甘油三酯和磷脂的最重要的器官.合成某些脂蛋白和載脂蛋白及脂蛋白代謝的酶類，參與脂蛋白的代謝和脂類的運輸。(二)維生素及激素代謝1.維生素精彩文檔實用標準文案(1)肝臟能儲存多種維生素，如維生素 A、B、D、E、K及B12等。肝臟是維生素轉化的場所胡蘿卜素轉變成維生素 A，維生素 D3在25位上羥化，維生素 PP合成NAD+和NADP+，維生素 B1合成TPP等過程均在肝內進行。2.激素激素的滅活主要在肝臟進行。血漿中的類固醇激素進入肝臟，被肝細胞攝取后，進行一系列轉化反應，改變了活性，最后生成易于排泄的代謝終末產物。許多蛋白質及多肽激素的滅活和氨基酸衍生的激素 (腎上腺素及甲狀腺素等 )分解代謝主要是在肝臟。二、肝臟的生物轉化功能(一)概念：機體對非營養物質進行代謝的過程生物轉化主要在肝臟進行。肺、腸、腎等組織也具有一定的生物轉化能力。(二)意義：精彩文檔實用標準文案肝臟的生物轉化過程， 常在肝細胞的微粒體、 線粒體及胞質等處有關酶的催化下， 使非極性化合物轉化為極性基團，使脂溶性極強的物質增加水溶性，有利于代謝產物、 藥物、毒物等從腎臟和膽道排出。(三)反應：兩相反應。第一相反應：氧化、還原、水解反應。這些反應直接改變物質的基團或使之分解第二相反應：結合反應有些物質經過第一相反應即可充分代謝或迅速排出體外， 但還有許多物質經過第一相反應后，極性的改變仍不大，必須與某些極性更強的物質 (如葡萄糖醛酸、硫酸、氨基酸等 )結合，增加溶解度，或者甲基化、乙酰化等改變了反應，才能最終排出體外。這種肝內的結合反應稱為第二相反應。三、膽汁酸代謝膽汁酸是膽汁的主要成份，在肝細胞內由膽固醇轉化生成。成年人每日合成400～600mg，均存在膽汁中。(一)分類：(二)膽汁酸的功能精彩文檔實用標準文案膽汁酸在脂肪的吸收、轉運、分泌和調節膽固醇代謝方面起重要作用。膽汁酸是脂類消化吸收的乳化劑，也是脂肪酶的激活劑。(三)膽汁酸的肝腸循環肝細胞分泌的初級膽汁酸大部分以結合形式分泌人膽汁，再排入小腸，約 95%的膽汁酸在回腸末端被重吸收經門靜脈至肝， 經過肝細胞變為結合膽汁酸后， 連同新合成的初級膽汁酸一起再分泌至膽汁中，上述這種由腸至肝的過程，稱為腸肝循環。肝腸循環使有限的膽汁酸發揮最大的作用。四、膽紅素代謝與黃疸 (肝對膽紅素的攝取、轉化及排泄 )(一)膽紅素代謝1.生成：體內的膽紅素主要來自衰老紅細胞中血紅蛋白分解產生的血紅素。2.血中運輸主要以膽紅素白蛋白復合物的形式存在和運輸。 (不能被腎小球濾過 )3.肝內代謝：肝臟對膽紅素有攝取、轉化、排泄的功能。攝取：膽紅素隨血運輸到肝后，在膜上與白蛋白解離，并被肝細胞攝取。精彩文檔實用標準文案肝細胞內有 Y蛋白和Z蛋白的兩種色素受體蛋白。 Y蛋白是肝細胞主要的膽紅素轉運蛋白，Z蛋白對長鏈脂肪酸具有很強的親和力。 Y、Z蛋白與進入胞質的膽紅素結合，并將它運至內質網。(2)轉化：肝細胞對膽紅素的轉化在滑面內質網上進行，在膽紅素 -尿嘧啶核苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶的催化下， 膽紅素被轉化為單、 雙葡萄糖醛酸結合膽紅素， 形成水溶性的結合膽紅素(可通過腎臟)。排泄：結合膽紅素隨膽汁排泄至腸道。4.腸內變化：在回腸末端至結腸部位， 在腸道菌的作用下大部分被水解而脫下葡萄糖醛酸， 還原成無色的膽素原。正常人每天從糞便排出 40～280mg 膽素原，它在腸管下段接觸空氣后被氧化成為棕黃色膽素，隨糞便排出，成為糞便的主要色素。一部分膽素原可被腸黏膜重吸收進入肝門靜脈， 其中大部分以原形再排入膽道， 小部分(0.4～4mg)經體循環隨尿排出。(二)黃疸正常人血清總膽紅素 <10mg/L當各種原因導致血液中游離膽紅素或結合膽紅素升高時，可導致黃疸。精彩文檔實用標準文案根據機制分成三類1.溶血性黃疸來源增多血中游離膽紅素濃度明顯升高，尿膽原升高 ,尿中膽紅素陰性 .2.阻塞性黃疸排泄受阻血中結合膽紅素明顯升高，尿膽原降低，尿膽紅素陽性。3.肝細胞性黃疸處理障礙血中兩種膽紅素都升高，尿膽原正常或升高，尿膽紅素陽性。習題1.有關生物轉化敘述錯誤的是主要在肝臟進行主要在腎臟進行C.第一相反應包括氧化、還原、水解第二相反應是結合反應使脂溶性極強的物質增加水溶性有利于排出『正確答案』B精彩文檔實用標準文案2.共用備選答案血中結合膽紅素和未結合膽紅素均升高，尿膽原正常或升高，尿膽紅素陽性B.血中結合膽紅素正常，未結合膽紅素升高，尿膽原正常或升高，尿膽紅素陽性C.血中結合膽紅素高度升高， 未結合膽紅素輕度升高或正常，尿膽原降低， 尿膽紅素陽性血中結合膽紅素正常，未結合膽紅素明顯升高，尿膽原升高，尿膽紅素陰性E.血中結合膽紅素升高，未結合膽紅素正常，尿膽原升高，尿膽紅素陰性溶血性黃疸時，何種結果正確『正確答案』D肝細胞性黃疸時，何種結果正確『正確答案』A梗阻性黃疸時，何種結果正確『正確答案』C第二節 肝膽疾病的檢查肝臟疾病的生化改變包括膽紅素代謝障礙、 膽汁酸代謝障礙、 血漿酶異常、血漿蛋白異常。精彩文檔實用標準文案一、酶學檢查方法學評價及臨床意義(一)血清轉氨酶及其同工酶測定氨基轉移酶是催化α -氨基酸和α-酮酸之間氨基轉移的酶。用于檢測肝細胞損傷程度的主要是丙氨酸氨基轉移酶 (ALT)和天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)。兩種酶的檢測現采用酶動力學方法，診斷酶學一章已作介紹1.概況(1)ALTALT廣泛存在于多種器官中，按含量多少順序為肝臟、腎臟、心臟、骨骼肌等。肝細胞的ALT主要存在于細胞質中，只有少量在線粒體中。由于肝細胞中 ALT活性約比血清高 2850倍，故有1%的肝細胞損傷，就足以使血液中ALT活性升高 1倍。(2)ASTAST也廣泛存在于多種器官中，按含量多少順序為心臟、肝臟、骨骼肌和腎臟等。肝細胞中AST大部分(60%)存在于線粒體中，少部分存在于胞質中。AST有兩種同工酶，存在于胞質中的稱為胞質 AST(cAST);精彩文檔實用標準文案存在于線粒體中的稱為線粒體 AST(m-AST)。正常血清中大部分為 c-AST，m-AST 僅占l0%以下。2.參考值：ALT：<40u/L(37 ℃)(酶速率法)AST：<45U/L(37 ℃)(酶速率法)AST/ALT：1.15左右3.臨床意義：ALT和AST均屬于肝細胞內非特異性功能酶，生理情況下血清轉氨酶活性很低 .急性病毒性肝炎：ALT雖不特異，但是最敏感的指標。在急性肝炎過程中，血清 ALT活性高低多與臨床病情輕重相平行。肝炎患者血清 ALT變化規律一般為三種：①急性病毒性肝炎， 早期ALT升高，出現黃疸后 ALT急劇升高，高峰可達正常人的 10倍以上，至黃疸極期， ALT迅速下降。某些無黃疽患者早期 ALT也可急劇升高，達高峰后迅速下降至 100～200U/L 時，常常持續一段時間后恢復正常 ;精彩文檔實用標準文案②部分無黃疸型肝炎患者早期 ALT升高不明顯，長期留于較高水平，持續數月或數年而轉為慢性肝炎 ;③輕型無黃疸型肝炎常常只有一過型 ALT升高，很快恢復正常。ALT的半壽期為 47±10小時，AST的半壽期為 17±5小時，急性肝炎恢復期 AST先于ALT恢復正常。急性肝炎和亞急性重癥肝炎早期， ALT明顯增高，隨病情惡化，大量肝細胞壞死， 致血中ALT下降，甚至在正常范圍內，與此同時膽紅素卻進行性升高，呈現“酶膽分離”現象，此為重癥肝炎臨終期的表現，預后極差。在急性肝炎時肝細胞輕度損害，線粒體未受破壞，血中 ALT升高程度大于 AST，AST/ALT 比值降低，而且血清中 AST大部分為 c-AST，如損害嚴重，線粒體受到破壞，血清m-AST才升高，故m-AST升高是肝細胞壞死的指征。慢性肝炎和脂肪肝：慢性遷延型肝炎 ALT、AST輕度上升，一般不超過參考值的 3倍，有時可降至正常，其他肝功能試驗正常。當病變累及線粒體時 AST升高程度可超過 ALT。慢性活動型肝炎， ALT多數升高至參考值 3～5倍以上，且長期維持在較高水平。如伴有肝壞死時 ALT可升高到參考值 10倍以上。脂肪肝，ALT可持續輕度升高并伴有高脂血癥。精彩文檔實用標準文案肝硬化：肝硬化代償期患者血清 ALT可輕度增高或正常，失代償期 ALT可持續升高。膽汁淤積性肝硬化 ALT活性較高可與黃疸平行， AST升高不及 ALT顯著。肝硬化病變累及線粒體時，多數 AST升高程度超過 ALT。原發性肝癌：ALT可正常或輕中度升高，提示可能并發肝壞死，預后嚴重。膽道疾病：正常時肝細胞內 ALT、AST的一部分可通過肝細胞膜到肝竇狀隙而進入血液，一部分通過溶酶體分泌進入毛細膽管排入小腸， 故當各種原因引起膽道梗阻時， 后部分酶反流入血，可致ALT中度升高，梗阻緩解后 l～2周即可恢復正常。其他疾病：ALT廣泛存在于各組織中，機體器官有實質性損害時， ALT均可增高。如急性心肌梗死、右心功能不全、多發性肌炎、肌營養不良、急性腎盂腎炎、大葉性肺炎、支氣管炎、傳染性單核細胞增多癥、潰瘍性結腸炎、細菌性或阿米巴性肝膿瘍等疾病、瘧疾、血吸蟲病，外傷、手術等均可造成血清 ALT和AST增高。某些化學藥物如異菸肼、 氯丙嗪、利福平、環磷酰胺和某些抗生素等也可引起血清 ALT增高，所以 ALT單項增高，需要結合病情綜合分析。精彩文檔實用標準文案(7)m-AST 的意義：m-AST 可協助判斷肝實質損害的嚴重程度。當急性肝炎病變嚴重累及線粒體時， AST/ALT 比值升高，此時應注意是否發展為慢性肝炎。肝硬化時可達 2.0。在Reye綜合征、妊娠脂肪肝、心肌梗死、做導管肝動脈栓塞術后，m-AST 也可升高。(二)堿性磷酸酶(ALP)及其同工酶1.概況：堿性磷酸酶是一組在 pH9-10.5 的堿性環境中催化有機磷酸酯水解的酶。血清中的ALP主要來源于肝臟、骨骼、少部分來自小腸和妊娠期胎盤組織，腎臟也有極少量，肝細胞產生的 ALP一般從膽道排人小腸。等位基因型(ALP)分為非組織特異形、胎盤型和腸型。非組織特異形 ALP分布于肝臟、骨骼、腎臟等組織器官。瓊脂糖凝膠電泳可將 ALP分為6種同工酶，從陽極向陰極按泳動速度快慢依次分為ALP1～ALP6，ALP1是細胞膜組分和 ALP2的復合物;ALP2來自肝臟;ALP3來自骨骼;ALP4來自妊娠期胎盤 ;ALP5來自小腸;ALP6是IgG和ALP2的復合物。檢測原理前已述及。2.參考值：精彩文檔實用標準文案成人40～150U/L(37 ℃)臨床意義：生理性增高：妊娠3個月時胎盤即可產生 ALP，9個月達高峰，可為同齡婦女的 3～4倍，分娩后一個月左右即恢復正常 ;絕經期后婦女 ALP水平有所上升 ;新生兒、兒童、青少年骨骼生長期比成人要高，1～5歲有一個高峰，是成人的2～4倍;10～18歲再有一個高峰，是成人的4～5倍。(ALP水平受年齡影響)肝膽管梗阻的疾患：血清ALP水平可增高。肝中ALP經膽汁排入小腸。梗阻性黃疸時，由于肝內、外梗阻使膽汁排出不暢， 再加上膽汁具有表面活性劑作用可洗脫ALP反流入血，使血中濃度增高。毛細膽管內壓亢進時，可誘發 ALP生成增加，患者血中 ALP濃度呈明顯持續性升高，可達正常上限的 10倍之多。(3)肝炎或肝硬化時， ALP可輕度增高，很少超過正常上限 3倍。(4)原發或繼發肝癌時， ALP明顯升高。精彩文檔實用標準文案腫瘤組織壓迫附近膽小管使之阻塞，腫瘤組織或炎癥可刺激周圍肝細胞過多產生 ALP。ALP持續輕度升高應考慮肝有無占位性病變。骨骼系統病變時，血清ALP可有程度不同的升高。成骨細胞增生活躍的狀況下，如成骨細胞瘤、骨折恢復期、變形性骨炎、佝僂病、轉移性骨腫瘤(前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌、原發性肝癌 )等;其他疾病：甲狀旁腺功能亢進、高維生素 D血癥、肢端肥大癥等，血中 ALP均升高。堿性磷酸酶同工酶的檢測對肝外阻塞性黃疸及肝內膽汁淤積性黃疸， 原發與繼發性肝癌具有鑒別意義。ALP1升高可見于肝外膽管梗阻， ALP2升高見于轉移性肝癌、肝膿腫、肝淤血等。而肝內膽管梗阻所致膽汁淤積，如原發性肝癌及急性黃疸性肝炎患者則以 ALP2的增高為主，ALP1相對減少。(三)γ-谷氨酰轉肽酶測定 (GGT)1.概況：γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)是在氨基酸吸收中，參與 r-谷氨酰基循環的一個重要的酶。該酶在體內分布較廣，按其活性強度的順序排列依次為：腎臟、前列腺、胰腺、肝臟、脾臟、腸、腦等。精彩文檔實用標準文案不同器官的 GGT的理化性質有差異，血清中的 GGT主要來自肝臟，少量來自腎臟、胰腺。GGT在肝內由肝細胞線粒體產生， 90%為膜結合型，分布在肝細胞膜及毛細膽管的上皮，在膽汁淤積時、肝內合成亢進 (如慢性肝炎、肝硬化 )、肝癌產生特異性的 GGT同工酶等情況下可升高。目前國內主要采用 IFCC和歐洲常規 Szasz法。二者均是以γ谷氨酰 -3-羧基-4-對硝基苯胺和雙甘肽為底物的酶動力。 GGT作用于γ-谷氨酰-3-羧基-4-對硝基苯胺和雙甘肽產生γ一谷氨酰雙甘肽和 5-氨基2-硝酸苯甲酸鹽，在 405nm 處檢測吸收峰，計算出血清中 GGT的濃度。2.參考值：男<64U/L 女<45U/L(37 ℃)(IFCC/法)男11～50U/L 女7～30U/L(歐洲常規 Szasz法)GGT在新生兒至 6個月以內小嬰兒明顯高于成人 3～5倍左右，在成人中呈明顯偏態分布，故采用九十五百分位數為參考值上限。3.臨床意義：病毒性肝炎：急性肝炎肝細胞可合成和釋放 GGT增加，使血清 GGT輕度升高，變化一般與 ALT平行，但升高幅度較低。精彩文檔實用標準文案若在恢復期其他肝功能指標都已正常，而 GGT仍未復原，提示肝炎尚未痊愈，如反復波動或長期維持較高水平，則應考慮肝炎有慢性化趨勢。原發性或轉移性肝癌：GGT和AFP同樣具有癌胚蛋白的性質，特別是在結節性增生時出現強活性，是反映肝內占位性病變。95%的患者血清中 GGT明顯增高，且為胎期肝細胞產生 GGT增多(GGT-2)，可大于正常幾倍或幾十倍。癌組織的大小及范圍和 GGT的升高有關，如腫瘤切除后 GGT可下降至正常，復發時則又升高。故監測血中 GGT的濃度可觀察腫瘤療效和預后。還可觀察乳腺癌、早期直腸癌、睪丸癌的患者是否有肝轉移的情況。梗阻性黃疸：由于各種原因引起的肝內、外梗阻， GGT排泄受阻而反流入血，血中 GGT升高明顯，可高達正常上限的 5～30倍。GGT是膽汁淤積，膽道梗阻最敏感的酶。 GGT活性與阻塞的時間和程度相關，阻塞時間越長，程度越重， GGT上升幅度越大。一旦阻塞解除， GGT可恢復正常。急、慢性酒精性肝炎：精彩文檔實用標準文案乙醇能誘導微粒體生物轉化系統，使血清 GGT升高。但 GGT升高幅度與飲酒量無明顯相關性。急性酒精性肝炎者 GGT可達1000U/L 以上，慢性酒精性肝炎者血清 GGT也在100U/L 左右。(5)肝硬化：在代償期GGT多正常，若失代償期或伴有炎癥、進行性纖維化則 GGT可升高，其升高程度與纖維化成正比。其他：系統性紅斑狼瘡、單核細胞增多癥等患者血清 GOT均可輕度增高。測定ALP、GGT有助于鑒別 ALP的來源：GGT與ALP同時增高常源于肝臟疾患，而GGT正常，ALP升高源于肝外疾患，如骨骼系統疾病等。某些藥物能使血中GGT活性升高：如：抗癲癇藥 (撲癲酮)、鎮靜藥(巴比妥、苯妥英鈉 )、三環類抗抑郁藥、對乙酰氨基酚或其他能誘導肝微粒體生物轉化系統的藥物均可致 GGT升高，停藥后血中 GGT水平降至正常。(四)假性膽堿酯酶測定 (PCHE)1，概況：膽堿酯酶分為兩大類：精彩文檔實用標準文案真性膽堿酯酶也稱乙酰膽堿酯酶 (ACHE)存在于紅細胞、肺、腦組織、交感神經節等處，主要作用是水解乙酰膽堿。假性膽堿酯酶存在于血清或血漿中， 除可作用于乙酰膽堿外， 還可作用于其他膽堿類化合物。檢測原理：PCHE是一種糖蛋白，由肝臟合成。此酶將膽堿酯水解為膽堿和有機酸臨床上即根據其水解產物多少測算出 PCHE的活性。含有機磷的殺蟲劑能抑制紅細胞內真性膽堿酯酶和血清中的假性膽堿酯酶。CHE作用于硫代丁酰膽堿，最后生成 5，5’一二硫雙 2一硝基苯甲酸是黃色化合物，動態檢測410nm 處的最大吸收峰，即可得出血清膽堿酯酶的活性。2.參考值：參考范圍根據檢測方法的不同而不同， 嬰兒血清PCHE水平較正常成人偏低。成人4250～12250U/ml(37 ℃)3.臨床意義：肝臟疾病：在病情嚴重的肝炎患者中，其 PCHE降低與肝病變程度成正比，與血清白蛋白平行 ;慢性肝炎、肝硬化、肝癌時如 PCHE持續降低則提示預后不良 ;肝功能不全時 PCHE明顯降低。(2)口服雌激素或避孕藥時，血清 PCHE可略降低。精彩文檔實用標準文案(3)遺傳性血清 PCHE異常病、營養不良、有機磷中毒、血清 PCHE均降低。(4)腎臟疾病(排泄障礙)、肥胖、脂肪肝、甲亢和遺傳性高 PCHE血癥者，血清 PCHE水平均可升高。乳酸脫氫酶同工酶檢測在肝臟疾病診斷上也有一定以意義。二、膽紅素的檢測及臨床意義(一).膽紅素的分類1.基于化學反應的分類：1913年VandenBergh根據膽紅素是否直接與重氮試劑反應，將其分為直接膽紅素和間接膽紅素。前者是經過肝細胞加工后的膽紅素，其實質是由膽紅素分子與 1到2個葡萄糖醛酸分子單獨酯化的結構，易溶于水，可通過腎臟排泄，能直接與重氮試劑反應，后者是紅細胞破壞后形成的膽紅素， 在循環中主要與白蛋白結合， 間接膽紅素不能與重氮試劑直接反應，必須有“加速劑”的參與，例如：甲醇、咖啡因等試劑，才能反應。兩種膽紅素的區別游離膽紅項目 結合膽紅素素間接膽紅直接膽紅素，別名 素，肝膽紅素血膽紅素精彩文檔實用標準文案與葡萄糖醛酸結合未結合結合慢或間接迅速直接反與重氮試劑反應反應應水中溶解度小大經腎隨尿排出不能能通透細胞膜對腦的毒大無性作用2.高效液相色譜法分類α組分膽紅素：即未結合膽紅素，它通過與血清白蛋白結合運輸到肝。α一膽紅素與白蛋白結合是可逆的。血中可呈現未和白蛋白結合也未和葡萄糖醛酸結合的游離膽紅素， 稱為蛋白非結合型膽紅素(MB)，這種膽紅素有毒性，正常人血清含量甚微，如增加可發生膽紅素腦病或稱核黃疸;β組分膽紅素：即單葡萄糖醛酸結合膽紅素(mBc);γ組分膽紅素：精彩文檔實用標準文案即雙葡萄糖醛酸結合膽紅素 (dBc);δ組分膽紅素(Bd)：即結合膽紅素和白蛋白以共價鍵結合者，這一部分可與重氮試劑呈直接反應。總膽紅素 = 未結合膽紅素 +單、雙葡萄糖醛酸結合膽紅素 + δ組分膽紅素(二)血清總膽紅素測定1.反應原理：血清膽紅素可在加速劑 (甲醇、咖啡因)的作用下，與重氮試劑反應生成偶氮膽紅素，出現顏色反應，顏色的深淺與膽紅素的濃度成正比， IF-CC推薦目前總膽紅素測定采用偶氮反應方