選修一第一部分微生物的利用第1課時大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1．判斷正誤(1)大腸桿菌是革蘭氏陰性菌，對人無害。(×)(2)擴大培養(yǎng)大腸桿菌常用LB液體培養(yǎng)基。(√)(3)利用涂布分離法分離細(xì)菌時，需要先將培養(yǎng)的菌液進行梯度稀釋。(√)(4)在“大腸桿菌的培養(yǎng)和分離”所用棉花為脫脂棉。(×)2．有關(guān)劃線分離操作正確的是()A．使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌B．打開含菌種的試管需通過火焰滅菌，取出菌種后需馬上塞上棉塞C．將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可D．最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)解析考查劃線分離操作。平板劃線操作時要時刻注意兩個問題：一是防止雜菌污染；二是要盡可能地將菌種分離。答案D3．固體培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到60℃(1)如何確定制備的培養(yǎng)基滅菌是否合格？___________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在固體培養(yǎng)基凝固前擱置斜面的目的是什么？____________________________________________________________。(3)平板冷凝后，為什么要將平板倒置？___________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一定時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌產(chǎn)生。(2)增大接種面積(3)平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4．下表是用于分離純化大腸桿菌的LB固體培養(yǎng)基的配方。請回答：試劑用量蛋白胨0.5g酵母提取物0.25g氯化鈉0.5g水50mL瓊脂1g(1)上述培養(yǎng)基配方中充當(dāng)?shù)吹某煞种饕莀_______。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進行________處理。(2)分離純化微生物最常使用的接種方法是________和________兩種。在接種過程中，接種環(huán)或玻璃刮刀的滅菌方法是_________________________________________________________________。(3)假設(shè)某同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過多地連成一片，可能的原因是什么？_________________________________________________________________。答案(1)蛋白胨滅菌(2)劃線分離法涂布分離法明火灼燒(3)菌液濃度過高；培養(yǎng)過程中被雜菌污染；利用接種環(huán)劃線時，劃下一個區(qū)域前沒有對接種環(huán)進行滅菌處理5．為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問題：(1)該小組采用涂布分離法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_____________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布分離法分別接入mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。(2)該小組采用劃線分離法分離水樣中的細(xì)菌。操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是________________________。(3)示意圖A和B中，________表示的是用涂布分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。解析(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/＝380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100＝×104，則每升水樣中活菌數(shù)目為×104×1000＝×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃料層灼燒，以達到迅速徹底滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用劃線分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用涂布分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可