.革蘭氏染色的機理和步驟機理：、主要由其

化學成分的差異而引起對乙醇的通透性，抗脫色能力的差異。主要有肽聚糖的厚度和結構所決定。的

肽聚糖層厚，脂質含量低。乙醇脫色時

脫水，孔徑減少，透性降低，不易脫色，呈初染得藍紫色。的

透性升高，細胞被復染顯紅色。涂布于水中。②固定：將玻片靠近酒精燈火焰，蒸干水分，但不要烤焦。③初染：用堿性顏料結晶紫對菌液涂片進行初染。④媒染:

以碘液媒染

，水洗，吸干水分。細胞內形成結晶紫與碘的復合物，增強相互作用）⑤脫色

的乙醇脫色

是乙醇脫色完全。⑥水洗，吸干。⑦復染：第

張）復染

，水洗吸干。⑧干燥鏡檢。、用滲透皮層膨脹學說解說芽孢耐熱機制。芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差，以及..失水的核心才賦予芽孢極強的耐熱性。、引起微生物培養過程中

變化的幾種可能反應，并說明如何能夠維持微培

穩定。會導致

變化。（第

張中的圖）還與培養基的

比有關，

高，經培養基后

顯著下降，低，經培養基后

明顯上升。K

常用:一氫二氫磷酸鹽，

呈堿性KKH

酸性，只在一定的

范圍內調節（）②大量產酸的菌株，加

調節，

難溶于水，不會使培養液的

過度增加，但可不斷中和微生物產的酸。③培養液中存在天然的緩沖系統，如AA，肽，

均屬兩性電解質，也起緩沖的作用。④過酸：治標

加

、

中和，治本

加適量氮源：、、·；增加通風量。⑤過堿：治標、

中和，治本加適量碳源:G

類，脂類;減小通風量。、抗生素法和菌絲過濾法為何能濃縮營養缺陷型突變株？

，野生型B

處于正常生長繁殖，所以對青霉素敏感，可被抑制或殺死；營缺

B

在基本培養基上休眠狀態..存活下來，從而達到濃縮營缺型目的。制霉菌素法適用于真菌，其可與

上？（第

張）醇作用，引起

損傷，因為它只能殺死生長繁殖著的真菌，所以......菌絲過濾法:基本培上，野生型霉菌，？菌的孢子能萌發并長成菌絲，而缺型孢子一般不萌發，或不能長成菌絲，因此培養一段時間后，用生型，從而……、生產蛋白酶的枯草芽孢桿菌發生遺傳變異，使得產量性狀下降，你如何解決？寫出具體實驗方案。答：將一定量的枯草芽孢桿菌培養液，做一定濃度的稀釋，涂布在含有酪素蛋白質的基本培養基上，°

菌。、以磺胺為例，說明化學治療機的作用機制。（答：機理:磺胺是葉酸組成部分對氨基苯甲酸的結構類似物，

磺胺類（藥物取代對氨基苯甲酸，干擾葉酸的合成，抑制了轉甲基反應，導致代謝紊亂，從而抑制B

基苯甲酸合成葉酸的相關酶二氫葉酸合成酶，不能用外界提供的（長。磺胺類（..

張）、微生物的共性？哪個最基本答：①體積小，面積大（最基本）②吸收多，轉化快③生長旺，繁殖快思適應性強，易變異⑤分布廣，種類多。、比較

， B

在

結構，組成，對溶菌酶，青霉素的敏感性

方面的異同點。結構 成分 對溶菌酶 青霉素

肽聚糖（

）磷

敏感

生

長

期

的簡單，厚 壁酸（）

外

敏感

對其敏感不敏感復雜，薄 脂蛋白、表型延遲現象？如何克服？答：表型延遲：表型的改變落后于？（第四張）改變的現象，分為①分離性延遲;突變的？經

型才能表現出來。②生理性延遲;雜合狀態→純合狀態，仍不能表現定下來，克服表型延遲。、培養

B

常用的斜面培養基是什么？簡述配制程序。答：牛肉膏蛋白胨培養基..①稱量;按配方依次準確稱量②融化:

的蛋白胨，加熱溶解，加的牛肉膏，加熱溶解，加的

熱熔，

至

⑤分裝入試管，加塞，包扎，高壓滅菌⑥擱置斜面（斜面長度不超過試管一半）⑦無菌檢查：將滅菌的培養基放入

°

的溫室中培養，以檢查滅菌是否徹底。、啤酒酵母在分批發酵中的生長曲線分哪幾個時期？在菌種擴培時，哪個時期做種子？為什么？答：延滯期，對數生長期，穩定期，衰退期。對數期做種子。利于縮短延滯期。、菌種衰退的根本原因？防治措施？答：？的自發突變。傳代④采取良好的菌種保藏措施、菌種衰退的根本原因，防止措施。如何區分衰退和飾變？例占優勢，③培養條件）防止措施見上題。區分：衰退：指隨著菌體的不斷生長，負突變菌株的數量占整個菌體數量的比例增大，最終導致菌株的生產性能大幅下降的現象。..宿主侵襲力下降⑤抵抗力下降飾變:遺傳物質結構不發生變化，而只在轉錄與轉譯水平上的表型變化，可以同一條件繼續培養，觀察子代的情況。飾變特點：暫時性，不可遺傳性，表現為全部個體的行為。變異：遺傳性，群體中極少數個體的行為。、gone？突變的特點？答：①自發性②非對應性③稀有性（突變率

）④獨立性⑤

10~10^5

<=>突變型）、（第三張）的特點。答：①形體微小，能通過細胞濾器（見②不具有細胞機構，主要成分，③V

只含有一種核酸，或

④無核糖體，即無產能酶系，也無

合成酶系，專性活細胞內寄生⑤無個體生長，也不進行二分裂，以

等“元件”裝多數抗生素不敏感，對干擾素敏感。、？月元病毒的致病機理。答：月元病毒是一種

侵染顆粒，僅有

組成，稱作

。細胞型

對蛋白酶敏感，無凝聚能力，而致病型

對蛋白酶有一定抗性，可凝集成纖維狀組織，

進

復合體，

構型發生改變，轉化成，

數量呈指數增加，其潛伏期長，對中樞神經損害嚴重。..估菌計數法及其特點（筆記）乳糖操縱子（）、營養價值 融化溫度（℃）凝固溫度（℃）

常用

瓊脂明膠

無氮源

、伴孢晶體？它在何種B

中產生？為伴孢晶體。對約

種昆蟲無為鱗翅目幼蟲有毒殺作用，可制成B

殺蟲劑。、霉菌菌落的特征？答：①質地疏松，呈絮狀，網狀，絨毛狀，地毯狀。②形態大，分為局限性生長（青、曲）和蔓延性生長（根毛）③菌落干燥（孢子）在一定培養基上，形成的菌落大小，形狀，顏色相對穩定，為分類依據之一。、利用磷酸鹽或碳酸鈣如何維持

穩定性？答：①磷酸氫二鉀略呈堿性，磷酸氫二鉀略呈酸性，兩物質以等摩爾濃度溶液

為

，其緩沖能力一般在

范圍內有效。磷酸氫二鉀

陽離子磷酸氫二鉀

陽離子..磷酸二氫鉀

陽離子

→磷酸氫二鉀②大量產酸的菌株，加入碳酸鈣調節，碳酸鈣難溶于水，不會使培養基

過度升高，但可不斷中和微生物產的酸，同時放出二氧化碳，而降培養基

控制在一定范圍。、單倍體酵母細胞經（第

張）誘變后，得到一系列的突變株，欲從中分離篩選出一株（請設計合理的試驗程序。答：淘汰型野生型→（制霉菌素法）→檢出→鑒定（濾紙片法）將單倍體酵母細胞突變株，制成菌懸液，均勻涂布于完全培養基上，心，水洗之后制成適當濃度的菌懸液，與基本培養基均勻混合后，傾注于平板中，干燥凝固之后，在板上劃分幾個區，在區中加入蘸有色AA

的濾紙片，經培養后，在紙片周圍有渾濁的生長圈的，說明為色AA

營養缺陷株。、實驗的原理。答：：用來檢測由

產生的有機酸，如甲酸，乙酸，乳酸等，細菌代謝糖產酸，

降低，甲基紅指示劑由橙色（）變成紅色（）大腸桿菌陽性：利用乳糖產生乳酸，培養后大腸桿菌陰性：早起產有機酸，后轉化有機酸→乙醇，丙酮酸。②

用來測定細菌利用

產生非酸性或中性末端產物的能力，如..丙酮酸。丙酮酸經縮合→乙酰甲基甲醇（經堿性、氧化）→二乙酰。二乙酰與蛋白胨中精AA

陽性，大腸桿菌陰性。、什么叫生長曲線？單細胞微生物的典型生長曲線分幾期？劃分依據？標作圖，得到一條反應在整個培養期間菌數變化規律的曲線。分為延滯期，對數期，穩定期，衰亡期。根據生長速率常數劃分，即單位時間內分裂次數的不同。、為什么誘變時，要制成充分分散的單細胞或單孢子懸液？對放線菌進行誘變育種時，宜處理其孢子還是菌絲細胞？為什么？答：使每個細胞均勻接觸誘變劑，減少表型延遲現象，并避免長出不純菌落。 多使用單核無性孢子，由于孢子生理上處于休眠狀態，單核區基中了大部分的，減少分離表型延遲，提高突變效果。

條件⑤控制氧化還原電位⑥原料來源經濟節約⑦滅菌處理、青霉素的作用機制？答：原理：β內酰胺環的結構與肽聚糖單體五肽尾末端的

二肽結構相近，因而可競爭性的抑制轉肽酶的活性，抑..制單體間交聯，形成缺損的

。青霉素對生長旺盛的

有明顯的抑制作用，對休眠期的無抑制，對的作用比

強得多。、篩選抗代謝結構類似物突變株的意義是什么？產物，所以采取一定的方法，篩選到抗代謝結構類似物突變株，即可獲得終產物的高產菌株。

、烈性噬菌體？生活史包括幾個過程？噬菌體。吸附→侵入→增殖（

復制，

的生物合成）→裝配（成熟）→裂解（釋放）、縮短延滯期的措施答：①利用遺傳學方法改變種的遺傳特性，使延滯期縮短，②利用對差太大④適當擴大接種量、計算代時R）答：見第七張、誘變育種？舉例①非電離輻射誘變劑②電離輻射誘變劑③烷化劑④插入誘變劑⑤間接引起堿基置換的誘變劑..其突變率顯著提高，然后從中選取少數符合育種目的的突變株的方法。①紫外線②

射線，γ射線③，④吖啶類顏料，ICR

類⑤堿基類似物

等（直接引起：①亞硝酸②羥胺:只引起

③烷化劑

）、什么是鑒別培養基？利用EMB

培養正常大腸桿菌和沙門氏菌時，菌落現象？為什么？答;鑒別培養基：用于鑒別不同類型微生物的培養基，在培養集中加能將該種微生物的菌落與外形相似的其他微生物菌落相區分的培養基。金屬閃光。沙門氏菌不能利用乳糖，菌落無色通明。、微生物的產能方式有？與食品發酵工業密切相關的微生物的代謝方式有哪幾種？答：微生物產能方式分為：發酵，有氧呼吸，無氧呼吸。化不徹底，產能水平低，為厭氧條件，兼性厭氧菌在有氧的條件下，..從發酵→呼吸作用，對發酵作用抑制（巴氏效應）、高壓蒸汽滅菌法的操作步驟和注意事項？答：步驟：①取出內層鍋，外層鍋加水至與三角擱架相平②放回內層

℃計時，控制熱源

℃

開蓋取物⑥無菌檢查注意；①切勿忘記加水，水量不可過少②三角瓶，試管口不要與桶壁接觸③切勿忘記打開排氣閥排鍋內空氣④壓力降為

才能打開排氣閥，開蓋、培養基應包括哪幾種營養物質？如何控制？答；碳源，氮源，能源，生長因子，無機鹽，水治標 過酸、·過堿、治本 酸加氮源，增大通風量

，堿加堿？（第

張）源，減小通風量加緩沖劑：加碳酸鈣、如何延長對數生長期？答;補充營養物質，調整，取走代謝產物，改善物化條件，調整營養配比，

比

時，菌體大量繁殖。、簡述烈性噬菌體一步生長曲線制作過程，并繪制曲線圖。答:適量噬菌體接種于培養好的高濃度敏感細胞中，②經數

吸附后，將培養物高倍稀釋，或加入抗

V

抗血清，中和給定時間內未吸..附的噬菌體，從而使因吸附噬菌體建立同步感染③適溫下繼續培養，定時取樣，測樣品中

V

的效價。感染

T

橫坐標，V

效價縱坐標，繪

張）、利用物理化學誘變劑對微生物進行誘變的目的有哪些？中間培養的目的？用簡圖表示利用

對微生物進行誘變育種的過程？株（檢致癌物，高產次代產物

）中間培養為了克服表型延遲現象。（甲基磺酸乙酯）烷化劑直接引起堿基置換（烷化后的堿基引起堿基配對錯誤，也能使嘌呤整體直接從

鏈堿基，從而引起轉換或顛換）選擇出發菌株→前培養，制作菌懸液→

合適劑量誘變處理→中間培養→初篩培養基涂布→劃線分離→菌種鑒定、意圖，并對主要步驟作簡要說明。答：見第

張常用培養基：細菌牛肉膏蛋白胨培養基（）放線菌高氏

號培養基（）酵母菌麥芽汁培養基

（）霉菌查氏合成培養基（）..、放線菌的培養：℃，，

染

褶，小不蔓延，不易挑起。、酵母菌培養：℃，，，染色：美藍活體染色

B

的大且厚，多為乳白色，表面濕潤，粘稠，邊緣整齊，易被挑起。、霉菌培養：℃，5~7

天，，染色：乳酸碳酸棉簽染液。

觀察：見第

張、酵母菌①大小測定：測微尺，酵母培養物制成水漫片，高倍鏡測出寬長與目鏡測微尺的格數，再乘以目鏡微尺每格代表長度。②計數：血球計數板：死菌+活菌總數，

總菌數=5

中方格總數中方格數稀釋倍數平板菌落計數法：只活菌、革蘭氏染色:機理+步驟

真題①）、，試驗（

真題⑥）吲哚試驗檢驗水解色

AA，水解色

AA（經水解）→丙酮酸+吲哚大腸桿菌陽性，產氣腸桿