凝血四項檢查APTT【檢驗原理】37APTT試劑，即以腦磷脂作為血小板的替代物參加貧血小板血漿中，在Ca2+的參與下，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測定凝固所需要的時間，即APTT。【樣本制備】采血與抗凝：采血后馬上與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕9：1。離心：抗凝血以2500xg離心10待測血漿。保存：血漿樣本應(yīng)馬上測試。22～24℃條件下保存，應(yīng)2小時內(nèi)測定，2～43小時內(nèi)測定。【檢驗方法】儀器預(yù)熱：開機，依據(jù)儀器使用說明書預(yù)熱，到達要求穩(wěn)定溫度，進入正常工作狀態(tài)。試劑配制：嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑，將直立在18～25℃中靜置3037℃預(yù)溫槽。正常質(zhì)控血漿制備：依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說明書。測定：以半自動高性能血凝儀為例：①將測試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在每個測試杯中放一粒鋼珠。②試劑放相應(yīng)位置，37℃預(yù)溫，需混勻放攪拌子。100l〔患畜或者質(zhì)控血漿〕參加測試杯，再將APTT試劑100l參加測試杯，混勻，啟動預(yù)溫時間計時，37℃，5分鐘，將測試杯從預(yù)溫槽移至測試槽。④使用聯(lián)動加樣器參加氯化鈣100l，儀器自動啟動計時器開頭計時并自動打印結(jié)果。【正常值參考范圍】圍。【檢驗結(jié)果解釋】APTT延長見于ＦⅧ、ＦⅨ、ＦⅪ血漿水平減低。APTT縮短見于高凝狀態(tài)、血栓性疾病。口服避孕藥會影響檢測結(jié)果。PT【檢驗原理】在待檢血漿中參加過量的組織凝血活酶和鈣離子，使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟福甘估w維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測定凝固所需要的時間，即為待測血漿的凝血酶原時間〔PT〕。PT與血漿中的外源性凝血因子含量呈負(fù)相關(guān)。【樣本制備】采血與抗凝：采血后馬上與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕比例為9：1EDTA、肝素不適于作抗凝劑。2500xg10分鐘。保存：血漿樣本應(yīng)馬上測試。22～24℃條件下保存，應(yīng)2小時內(nèi)測定，2～4℃條件下保存，應(yīng)3小時內(nèi)測定。如不能60分鐘內(nèi)分別血漿。【檢驗方法】儀器預(yù)熱：開機，依據(jù)儀器使用說明書預(yù)熱，進入正常工作狀態(tài)。試劑配制：嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑，將試劑瓶直立在室溫中靜置30分鐘，使用前輕輕旋轉(zhuǎn)至完全溶解，勿猛烈振搖。正常質(zhì)控血漿制備：依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說明書。測定：以半自動高性能血凝儀為例：①將測試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在每個測試杯中放一粒鋼珠。②試劑放相應(yīng)位置，37C預(yù)溫，混勻需放攪拌子。100l〔患畜或者質(zhì)控血漿〕參加測試杯。分鐘，將測試杯從預(yù)溫槽中移至測試槽中。⑤使用聯(lián)動加樣器參加試劑100l，儀器自動啟動計時器開頭計時進展測試。記錄結(jié)果。【正常值參考范圍】犬：5.0～15.0秒，建議各試驗室建立自己的正常值參考范圍。質(zhì)量掌握程序：試驗室應(yīng)建立質(zhì)量掌握程序，使用質(zhì)控血漿測定。FIB【檢驗原理】在待檢稀釋血漿中參加高濃度的凝血酶，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測定凝固所需要的時間，在以參比血漿制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得待測血漿的纖維蛋白原濃度，即為待測血漿的纖維蛋白原〔FIB〕含量。【樣本制備】采血與抗凝：采血后馬上與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕9：1。2500xg10分鐘。1：5比例稀釋血漿。保存：血漿樣本應(yīng)馬上測試。22～24℃條件下保存，應(yīng)2小時內(nèi)測定，2～43小時內(nèi)測定。【檢驗方法】儀器預(yù)熱：開機，依據(jù)儀器使用說明書預(yù)熱，進入正常工作狀態(tài)。試劑配制：嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑，并放室溫靜置30分鐘，使用前輕輕旋轉(zhuǎn)至完全溶解，勿猛烈振搖。定標(biāo)血漿制備：以蒸餾水復(fù)溶血漿，參加量標(biāo)識在上。正常質(zhì)控血漿制備：依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說明書。FIB標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：以半自動血凝儀為例：①按下表稀釋標(biāo)準(zhǔn)血漿〔FIB2.57g/L〕：標(biāo)準(zhǔn)血比例咪唑緩沖液〔l〕總體積FIB濃〔l〕〔g/L〕1:51004005005.141:10504505002.571721:20305706001.281:40207808000.64②每份稀釋血漿宜重復(fù)測試4次〔至少測定2次〕，求秒數(shù)均值。③進入FIB標(biāo)定菜單，選錄入，將不同稀釋度血漿凝固時間FIB濃度輸入儀器。④選計算，按2次確認(rèn)，標(biāo)準(zhǔn)曲線輸入完成并打印。則檢測g/L。更換試劑批號時應(yīng)重做標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定：以半自動高性能血凝儀為例：①將測試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在測試杯中放一粒鋼珠。②將5倍稀釋血漿100l〔患畜或者質(zhì)控血漿參加測試杯，37C3分鐘，將測試杯移至測試槽。100l，啟動計時器，儀器記錄時間并自動打印結(jié)果。【正常值參考范圍】秒。建議各試驗室建立自己的正常值參考范圍。TT【檢驗原理】在待檢血漿中參加標(biāo)定的凝血酶，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測定凝固所需要的時間，即為待測血漿的凝血酶時間〔TT〕。【樣本制備】采血與抗凝：采血后馬上與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑〔0.109mmol/L枸櫞酸鈉〕9：1。2500xg10分鐘。保存：血漿樣本應(yīng)馬上測試。22～24℃條件下保存，應(yīng)2小時內(nèi)測定，2～43小時內(nèi)測定。【檢驗方法】儀器預(yù)熱：開機，依據(jù)儀器使用說明書預(yù)熱，到達要求穩(wěn)定溫度，進入正常工作狀態(tài)。試劑配制：嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)示量參加蒸餾水復(fù)溶試劑，將試劑瓶直立在室溫中靜置30分鐘，使用前輕輕旋轉(zhuǎn)至完全溶解，勿猛烈振搖。正常質(zhì)控血漿制備：依據(jù)質(zhì)控血漿試劑盒使用說明書。測定：以半自動高性能血凝儀為例：①將測試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在每個測試杯中放一粒鋼珠。②將待測血漿100l〔患畜或者質(zhì)控血漿〕參加測試