免疫血液學第五章血液成分制備第一頁，共三十五頁，2022年，8月28日輸血前檢查的目的和要求選擇與患者血型配合的各種血液成分，使之能在患者體內有效地存活，無不良反應。即輸入的紅細胞在患者體內必須不溶血，輸入的血漿成份不導致患者紅細胞破壞，也就是供者與患者之間的血液在免疫血液學方面“相溶”從而達到安全、有效輸血的目的。第二頁，共三十五頁，2022年，8月28日二、輸血前檢查的內容包括以下幾個方面：1、患者的病史和標本等的檢查、核對及處理。2、受血者、獻血者ABO和Rh血型鑒定。3、不規則抗體的篩選和鑒定。4、交叉配血試驗5、標簽和發血。第三頁，共三十五頁，2022年，8月28日（一）標本的要求1、標本必須經鑒定和標記，確實來自患者和獻血者。2、符合患者體內狀態，能代表患者當前的免疫學情況，3、防止血樣的稀釋和溶血的產生。（輸液患者對側抽血）4、最好用血清（血漿有纖維蛋白原的干擾）配血5、輸血后所有標本（患者及供者）保存2-8℃一周。第四頁，共三十五頁，2022年，8月28日（二）ABO血型鑒定用抗A和抗B試劑檢測紅細胞抗原，稱之正定型，用A型和B型、O型紅細胞檢測血清中抗體稱之反定型人ABO血型由紅細胞抗原和血清抗體所決定，其正、反定型相符。見表ABO血型常規定型

正定型（檢查紅細胞抗原）反定型（檢查血清中抗體）血型紅細胞標本+抗體試劑血清標本+標準紅細胞試劑抗A抗BA細胞B細胞O細胞A型+--+-B型-++--O型--++-AB型++---第五頁，共三十五頁，2022年，8月28日2、ABO血型正反定型不符及其原因可能因為操作技術，管理上問題也可能是紅細胞和血清標本問題第六頁，共三十五頁，2022年，8月28日（1）技術操作、管理錯誤假陰性結果：試管中未加入抗體試劑或血清未能認識溶血也是陽性反應血清或試劑與紅細胞比例太小離心速度時間不夠使用了失效的抗體和紅細胞試劑沒能正確地記錄和解釋試驗結果。假陽性結果：離心速度過大和離心時間過長使用了受到細菌污染的試劑使用了不干凈的試管、器皿錯誤記錄、解釋試驗結果第七頁，共三十五頁，2022年，8月28日（2）紅細胞標本相關問題①某些ABO亞型、白血病或其它惡性疾病病人紅細胞ABO抗原太弱（或缺乏），抗A抗B試劑未能出現預期的凝集反應。②紅細胞獲得性或遺傳性的異常，如獲得性B抗原紅細胞或Tn/T多凝集紅細胞，試劑可與這些異常的紅細胞反應③懸浮紅細胞的血清或血漿中含的型物質濃度高，中和了抗體試劑，出現假陰性，如卵巢囊腫病例。④病人紅細胞自凝，病人血清中高活性，高濃度自身凝集嚴重致敏（包被）自身紅細胞，以至在稀釋液存在下，自發地發生凝集，而不是抗體試劑的特異性作用。⑤近期輸血：輸入過與自身血型不一致的血液，使標本成為“混合外觀凝集”第八頁，共三十五頁，2022年，8月28日（3）血清標本的問題①異常的血漿蛋白：受檢查血漿中異常的白蛋白，球蛋白比例（某些肝病、傳染病如結核、多發性骨髓瘤等疾病患者球蛋白增加）高濃度的纖維蛋白原（心梗、感染、外傷、腫瘤患者）均易使紅細胞發生緡錢狀凝集現象。②免疫抑制疾病或免疫抑制治療的病人血清中ABO抗體減少或消失。③年齡：老年人隨年齡增高，ABO抗體減弱，嬰兒血清抗體是陰性或很弱（0-6月不做反定型）④不規則抗體的存在：反復多次輸血者妊娠者血清中有ABO血型以外的同種異型抗體，如鹽水抗M、高效價冷凝集素抗I。第九頁，共三十五頁，2022年，8月28日（三）Rh（D）定型和定型中應注意的問題假陽性結果：受檢細胞已被免疫球蛋白致敏，受檢細胞與血清孵育的時間過長多凝集細胞造成定型的假陽性器材或抗血清被污染，造成的假陽性假陰性結果：受檢細胞濃度太高，與抗血清比例失調漏加或錯加定型血清定型血清使用方法錯誤抗血清保存不當，導致失效第十頁，共三十五頁，2022年，8月28日關于弱D（傳統稱Du型）弱D型（Du型）是D的弱抗原，這種抗原與大部分鹽水抗D試劑不產生直接凝集反應，而與部分的IgG抗D血清用間接抗球蛋白試驗反應陽性弱D（Du型）鑒定：三種不同批號的IgG抗D定型—如果全部陰性方可認定患者為RhD陰性，否則為弱D弱D臨床意義：作為供血者Du→RhD陽性作為受血者Du→RhD陰性第十一頁，共三十五頁，2022年，8月28日（四）不規則抗體篩選和鑒定1對受血者的血清做抗體篩選，以發現有臨床意義的不規則抗體，不規則抗體是指抗A抗B以外的血型抗體抗體篩選的原則讓受檢血清與已知的試劑紅細胞起反應，以發現在37℃中有反應的抗體方法：鹽水法、凝膠法、聚凝胺法、抗球蛋白試驗等抗體篩選陽性的，則須做鑒定試驗，以確定其特異性第十二頁，共三十五頁，2022年，8月28日（五）交叉配血試驗1、要求及內容主側：受血者血清+供者紅細胞——檢測對供者紅細胞起反應的抗體。次側：供者血清+受者紅細胞——檢測對受者紅細胞起反應的抗體。自身對照：Rs+Rc——顯示自身抗體、直抗陽性。第十三頁，共三十五頁，2022年，8月28日2、方法

鹽水交叉配血試驗：檢出IgM類抗體。檢測不完全抗體的交叉配血試驗蛋白酶（木瓜酶、波蘿酶）傳統抗人球蛋白試驗新方法：促凝劑（凝聚胺）微柱凝膠試驗第十四頁，共三十五頁，2022年，8月28日3、配血中異常原因與處理①緡線狀假凝集特點：顯微鏡下紅細胞膜完整，細胞界限清晰地成線串聚集37℃、室溫結果一樣，不受溫度影響，但加鹽水即可散開。解決方法：被檢細胞用鹽水洗滌后再配血。②自身抗體造成配血不合，共同特點是患者血清能凝集自身紅細胞天然自身冷凝激素獲得性病理性自身冷抗體：直抗陽性/室溫較37℃強/Rs+Oc>Rs+Rc自免溶貧血清中的溫型自身抗體，直抗陽性/37℃≥室溫③血清中的不規則凝集素第十五頁，共三十五頁，2022年，8月28日三、常規和緊急情況下的發血程序血液的申請：醫生填寫輸血申請單護士抽取血樣，送至血庫檢驗師進行血型鑒定、抗體篩選選擇血液，交叉配血填寫輸血記錄單發血給護士第十六頁，共三十五頁，2022年，8月28日第七節新生兒溶血病一、新生兒溶血病的發病機制二、新生兒溶血病的臨床癥狀三、新生兒溶血病的血清學檢查四、新生兒溶血病治療與預防五、新生兒換血和輸血第十七頁，共三十五頁，2022年，8月28日什么是新生兒溶血病？新生兒溶血病（hemolyticdiseaseofthenewborn）簡稱HDN。指母嬰血型不合，孕母體內存在著與胎兒紅細胞不配合的IgG性質的血型抗體，該抗體通過胎盤進入胎兒體內，作用于胎兒紅細胞使之產生不同程度溶血。第十八頁，共三十五頁，2022年，8月28日二、臨床癥狀

被IgG抗體體致敏的胎兒紅細胞在分娩前后加速破壞，這在臨床上有多種表現，嚴重可致胎兒宮內死亡，輕者只在血清學中有所表現，嬰兒卻很健康，HDN的病理變化主要同紅細胞溶解所引起的，大量紅細胞破壞使紅細胞數目減少，引起貧血，組織和臟器因供氧減少而發生缺氧、并可影響其功能主要表現為水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大、核黃疸。第十九頁，共三十五頁，2022年，8月28日水腫——全身性、伴低蛋白血癥；胸水、腹水、心包積液。黃疸——進行性黃疸增高膽紅素51.3mol/L（3mg%）臍帶膠質黃疸（4-6mg%）面部淡黃（15-18mg%）面部+軀干橙黃，手心足底、呈淡黃

>342（>20mg%）手足橙黃色第二十頁，共三十五頁，2022年，8月28日貧血——組織缺氧：心律快、組織增高、嗜睡、少吃、少哭、心衰。肝脾腫大——骨髓外造血組織來代償引起核黃疸——未結合膽紅素是對中樞神經系統有毒害的物質，嬰兒大腦發育未成熟，血腦屏障不健全，過多的未結合膽紅素可影響腦組織——腦神經基底核，使腦神經細胞發生變性——表現為發熱、嗜睡、吸吮反射弱、痙攣、肌張力病死率高，存活后有智力不全，運動障礙。第二十一頁，共三十五頁，2022年，8月28日三、血清學檢查1、測母子（父）ABO血型，確定ABO相合/不相合2、患兒標本檢查：（1）直接抗球蛋白試驗：ABO溶血病患兒紅細胞上抗體結合得很少，常得到陰性結果（2）釋放試驗：陽性，紅細胞上有IgG抗體（3）游離抗體：陽性，就證明新生兒病情會繼續加重第二十二頁，共三十五頁，2022年，8月28日

新生兒血清中游離抗體檢查與指示紅細胞反應結果判定

AcBcOc

＋－－有游離的抗A抗體－＋－有游離的抗B抗體＋＋－有游離的抗A、抗B或抗A，B抗體＋／－＋／－＋有游離的ABO系統以外抗體－－－無游離的抗體第二十三頁，共三十五頁，2022年，8月28日

患兒紅細胞抗體釋放試驗與指示紅細胞反應結果判定AcBcOc

＋－－釋放出IgG抗A抗體－＋－釋放出IgG抗B抗體＋＋－釋放出IgG抗A、抗B或抗A，B抗體－－－未釋放出抗體＋＋＋釋放出ABO血型系統以外的抗體第二十四頁，共三十五頁，2022年，8月28日

新生兒ABO

HDN血清學試驗直接抗球游離抗體抗體釋放結果意義蛋白試驗試驗試驗判定＋＋＋確診ABO

HDN

＋－＋確診ABO

HDN

－－＋確診ABO

HDN

＋－－可疑可疑ABO

HDN

－＋－可疑可疑ABO

HDN

－－－否定血清學試驗未能證實HDN第二十五頁，共三十五頁，2022年，8月28日四、治療（一）藥物治療：葡萄糖、白蛋白（二）光照（藍光照射）：膽紅素能吸收光，以波長450-460m作用最強，未結合膽紅素（Z）轉化為異物體（E）后者不能進入腦組織，為無毒水溶性，雙吡咯，易從尿內排出，使血清膽紅素濃度降低。（三）換血：換出抗體和致敏紅細胞，減輕溶血，糾正貧血，防心衰，換血清膽紅素，防核黃疸。ABO系HDN：O型洗滌細胞加AB血漿/同型漿Rh系HDN：ABO血型同患兒，Rh血型同母親如子B型母Accdee血清含有抗D選B型D陰性血。第二十六頁，共三十五頁，2022年，8月28日（一）宮內輸血（二）提早分娩>64妊娠期內的治療：（三）藥物治療孕婦服Vc、VE、VK注射葡萄糖，吸氧，苯巴比妥為酶的誘導劑，促進肝臟清除膽紅素，新生兒輸白蛋白，能結合膽紅素防核黃疸。預防：對未致敏的Rh陰性婦女在分娩Rh陽性嬰兒72小時內，肌注30mg（145-435mg）抗Rh(D)IgG，通常可預防Rh陰性婦女發生同種免疫。第二十七頁，共三十五頁，2022年，8月28日第五章血液成份制備第一節血液的生理功能輸送氧氣和二氧化碳，在肺臟和人體組織間進行氣體交換。輸送養分到組織，從組織帶走代謝產物。輸送激素，維生素和各種藥物。維持滲透壓、酸堿度以及電解質平衡保持體溫恒定防御微生物或異物入侵有效的凝血和纖維蛋白溶解機制第二十八頁，共三十五頁，2022年，8月28日細紅細胞——人體的內呼吸，向機體組織運送O2、帶走CO2、由

Hb完成胞白細胞——粒細胞——中性、嗜酸、嗜堿、免疫系統，吞噬破壞入侵細胞成淋巴細胞——T細胞參與細胞免疫B細胞參與體液免疫分40-45%血小板——粘附，釋放凝固、收縮非（血漿）白蛋白保持滲透壓和體液平衡；載體蛋白的作用，傳遞運輸細胞免疫球蛋白——血漿中具有抗體活性的球蛋白的統稱，它包括所有血液中的抗體。成分凝血因子共14個、血漿中含除組織因子（FIII）外所有因子55-60%凝血過程分三個階段，凝血酶原激活物的形成，凝血酶原激活形成凝血酶；纖維蛋白原分解形成纖維蛋白。分內源性途徑、外源性途徑和共同途徑。第二十九頁，共三十五頁，2022年，8月28日第二節全血保養液ACDCPDCPDA-1組成成分枸櫞酸-枸櫞酸三鈉、葡萄糖Acid-Cutrate-Dextrose枸櫞酸鹽、磷酸鹽、葡萄糖Citrate-Phosphate-Dextrose

添加腺嘌呤（A）枸櫞酸鹽：抗凝葡萄糖：維持紅細胞代謝枸櫞酸：降PH到5.0解決葡萄糖焦糖化磷酸鹽：調節PH到5.6以利于維持血液中2、3-DPC（2，3二磷酸甘油酸）維持細胞放氧能力。腺嘌呤（A）是ATP的一個成分，能增加ATP合成

保存期限*21天21天35天第三十頁，共三十五頁，2022年，8月28日

血液成分的最佳保存條件紅細胞：4℃±2℃血小板：22℃±2℃水平振蕩，如4℃貯存，24h50%以上喪失功能，48h減小顯著，72h基本無止血作用，5天全部遭破壞。白細胞：室溫，24h微量減弱，3-5天顯著減弱，7天完全消失凝血因子：-20℃以下冷凍保