PCR技術應用進展及存在問題衛生部臨床檢驗中心李金明PCR技術應用進展及存在問題衛生部臨床檢驗中心李金明PCR?

PCR只是一個簡單的不起眼玩藝

——凱利·穆利斯（KaryMullis)

PCR只是一個概念，所發生的奇跡是：PCR概念變成了可操作的實驗系統，變成了一項成熟的技術，后者又上升成為新的概念?！?/p>

它最大的特點就是能不斷推出新形式。

——摘自[MakingPCR:AStoryofBiotechnologybyPaulRabinow]PCR?PCR只是一個簡單的不起眼玩藝KaryMullisKaryMullis什么是PCR?

我不認為PCR能夠用兩種“革命”(政治革命和科學革命)加以說明。……它的發明并沒有改變基因操作的本質。有了PCR，我們能在更廣的范圍內更快、更容易地進行基因操作，學術界也完全不用等到某人死去或退休后才能接受PCR。它只不過是一種新工具。

——凱利·穆利斯（KaryMullis)什么是PCR?我不認為PCR能夠用兩種““…真正驚人的是PCR完全不是為解決某一個難題而設計的,該技術成熟之后,它所能解決的難題才開始涌現…”

-史蒂文·沙夫“…真正驚人的是PCR完全不是為解決某一個難題而設計的,該PCR技術的特點：高特異性引物的特異性。引物延伸時，堿基配對的正確性。TaqDNA聚合酶合成反應的忠實性。靶基因的特異性與保守性。選擇擴增特異性和保守性高的靶基因區域，擴增產物的特異性程度就更高。作為臨床測定的PCR方法，還有一個影響特異性的決定性因素是寡核苷酸雜交探針。PCR技術的特點：高特異性引物的特異性。PCR技術的特點：高靈敏度從理論上，其能在2~3小時內，將1個分子靶DNA，擴增至10億個分子。而就特定的擴增反應來說，從理論上，只要反應管中有1個分子，就能將其擴增至能檢出的水平。如將一些干擾因素考慮在內，一個反應體系中，如有2~3個以上的靶分子，即可成功的通過PCR擴增，將其檢測出來。PCR技術的特點：高靈敏度從理論上，其能在2~3小時內，將1PCR技術的特點：簡便快速整個PCR的擴增在一個小小的離心管中完成，過程也只是簡單的溫度變化，耐高溫的TaqDNA聚合酶的應用，避免了DNA聚合酶的反復加入。整個擴增反應可在2～4小時完成。

PCR技術的特點：簡便快速特定的低純度標本也可使用某些靶基因含量高的標本，如人的組織、細胞、毛發、血液、培養后的細菌和病毒等病原體等，DNA粗制品及總RNA即可作為擴增模板，但在具體的擴增時，可對標本進行適當的稀釋，在不影響靶基因模板的擴增濃度下，降低標本中PCR抑制物的濃度，以利于靶基因的擴增。特定的低純度標本也可使用某些靶基因含量高的標本，如人的組織、PCR技術的應用病原體核酸的檢測：定量（抗病毒藥物治療療效監測）；定性（耐藥突變、基因分型、血液篩查等）。遺傳病腫瘤個體鑒定其他（SNP及涉及核酸的科研等）PCR技術的應用病原體核酸的檢測：定量（抗病毒藥物治療療效監在感染性疾病病原體檢測中的應用病毒的檢測

定量(感染狀況判斷、抗病毒藥物治療療效監測）定性(耐藥突變、基因分型、血液篩查等）細菌及其它微生物的檢測難培養菌耐藥基因寄生蟲的檢測在感染性疾病病原體檢測中的應用病毒的檢測在遺傳病及其它基因相關疾病診斷中的應用α地貧β地貧血友病藥物性耳聾在遺傳病及其它基因相關疾病診斷中的應用α地貧地中海貧血地中海貧血是一種常染色體遺傳性溶血性貧血,是世界上最常見和發生率最高中的一種單基因遺傳病。地中海貧血是由于珠蛋白肽鏈合成障礙所致，出現一種或幾種珠蛋白肽鏈數量不足或完全缺乏，從而造成這種珠蛋白鏈參與的血紅蛋白合成量的減少。各珠蛋白鏈本身的氨基酸順序并無異常。其中α珠蛋白鏈合成受抑者，叫做“α地中海貧血”；β珠蛋白鏈合成受抑者，叫做“β地中海貧血”。地中海貧血地中海貧血是一種常染色體遺傳性溶血性貧血,是世界上α地中海貧血α地貧的發生是由于α珠蛋白鏈基因突變的結果，α珠蛋白基因定位于第16染色體短臂，每條染色體上均有兩個α珠蛋白基因，該基因總長30Kb，共包含七個連鎖的α類基因或假基因。在α-基因的突變中，以缺失型突變最為常見。α-基因的另一突變即為點突變，目前已發現的突變有18種以上，它包括錯義突變、無意突變、剪接部位突變及起始信號突變。α地貧的產前診斷目前一般采用PCR-探針雜交或限制性長度多態性（RFLP）方法進行。α地中海貧血α地貧的發生是由于α珠蛋白鏈基因突變的結果，α珠β地中海貧血β地中海貧血（簡稱β地貧）:β地貧由β珠蛋白鏈基因突變所引起，該基因定位于第11染色體短臂，總長度約60Kb，其中有許多胚胎性基因及假基因，而β珠蛋白基因有兩個內含子和3個外顯子，總長約為1.126Kb.β-基因的突變以點突變為主，亦有堿基的插入和缺失。目前在世界范圍內發現的點突變達160余種，其中在中國發現的有21種。β地貧的產前診斷目前一般采用PCR-探針雜交或限制性長度多態性（RFLP）或等位基因特異的PCR方法進行。β地中海貧血β地中海貧血（簡稱β地貧）:β地貧由β珠蛋白鏈基血友病血友病是一種X連鎖隱性遺傳病，分為血友病甲和血友病乙，幾乎全部發生在男性身上。血友病甲是由于凝血因子Ⅷ的缺乏所致，而血友病乙則是因為缺乏凝血因子Ⅸ。控制產生凝血因子Ⅷ和Ⅸ的基因位于X性染色體上。血友病血友病是一種X連鎖隱性遺傳病，分為血友病甲和血友病乙，母親為血友病基因攜帶者時致病基因遺傳每個兒子患血友病及每個女兒為致病基因攜帶者的機會均為50%母親為血友病基因攜帶者時致病基因遺傳每個兒子患血友病及每個女父親為血友病患者時的致病基因遺傳

所有兒子都正常，所有女兒都是攜帶者父親為血友病患者時的致病基因遺傳所有兒子都正常，所有女兒都父親為血友病患者母親為攜帶者時的致病基因遺傳每個兒子和女兒患血友病及每個女兒為致病基因攜帶者的機會均為50%，兒子有一半正常

父親為血友病患者母親為攜帶者時的致病基因遺傳每個兒子和女兒患血友病的分子診斷大多數血友病突變的大量變異和近代起源使遺傳篩選過程錯綜復雜。目前基本上使用PCR方法檢測。診斷攜帶者的最佳途徑是檢測其家庭成員的特異基因缺陷。策略：根據全國性可信基因突變和譜系數據庫進行篩選，鑒定并記錄每一個家庭中的病人或攜帶者的突變。這樣，根據個人所屬家庭，只有小部分血友病基因需要檢查，所以可以迅速而準確地篩選每一個家庭成員并降低成本。英國和瑞典完全使用這種策略，它代表了利用各種遺傳缺陷譜系鑒定遺傳性疾病的篩選模式。血友病的分子診斷大多數血友病突變的大量變異和近代起源使遺傳篩藥物性耳聾我國目前聾啞患者約有1770萬，居殘疾人之首。耳聾分先天性和后天性兩種。在后天性耳聾中，藥物性致聾發生率占40％。而在藥物引起的耳聾者中，3歲前發病為50％，7歲前可達82％。其元兇是氨基糖甙類藥物，如鏈霉素、丁胺卡那霉素與慶大霉素、妥布霉素及核糖霉素等，它們均能摧毀毛細胞與螺旋形神經節，以而使聽覺傳導系統受到嚴重損害，并導致病人耳聾。

藥物性耳聾我國目前聾啞患者約有1770萬，居殘疾人之首。耳聾藥物性耳聾氨基糖甙類抗生素所致的耳聾可分為兩類：一類因接受了中毒劑量而致聾；另一類是有遺傳背景，即帶有線粒體125rRNA基因AI555G均質性點突變基因。由細胞線粒體的遺傳基因發生變異之故。即家族的變異基因可能通過母親遺傳給她的子孫，使之具有潛在的過敏性，此稱母系遺傳。該突變使原有的BsmAI酶切位點消失藥物性耳聾氨基糖甙類抗生素所致的耳聾可分為兩類：一類因接受了藥物性耳聾檢測方法主要是運用PCR技術，結合限制性內切酶進行分析，其更新的技術包括變性高效液相色譜分析等。藥物性耳聾檢測方法主要是運用PCR技術，結合限制性內切酶進在親子鑒定中的應用每個人的遺傳物質一半來自父親，另一半則來自母親。根據孟德爾遺傳分離和自由組合定律，親代基因型決定子代基因型，在沒有基因突變和分型錯誤的前提下，孩子不可能帶有雙親均沒有的等位基因。父系遺傳的Y染色體的標記，子代的分型必定與父親的相同，而且同一父系的所有個體的分型一致。母系遺傳的線粒體DNA，子代的分型與母親的分型一致，并且同一母系的所有個體的分型一致。

在親子鑒定中的應用每個人的遺傳物質一半來自父親，另一半則來自在親子鑒定中的應用父與子之間僅有一個遺傳標志不符合遺傳規律尚不能排除親子關系，因為有可能是突變所致。必須有2個以上不同基因座同時不符才能否定其親子關系。親子鑒定的手段主要有兩大類:(1)血液中各種抗原成分的遺傳多態性標志物檢驗,如人類白細胞抗原分型、紅細胞抗原分型、紅細胞酶型及血清型；（2）DNA多態性檢驗。主要包括有單基因座探針限制性片段長度多態性（DNA指紋）和單基因座擴增片段長度多態性（包括用多聚酶鏈反應(PCR)檢測的可變數目串聯重復多態性(VNTR)和短串聯重復多態性(STR)）。

在親子鑒定中的應用父與子之間僅有一個遺傳標志不符合遺傳規律尚在親子鑒定中的應用DNA多態性檢驗是目前親子鑒定中最準確的一種方法。如果孩子和被測試男子的DNA模式在兩個或多個DNA探針上不吻合,那么被測試男子便被100%排除,即他是親生父親的可能性是0%。反之，如果孩子和被測試父親的DNA模式完全吻合,則在理論上不能100%肯定其為親生父親，只能計算出99.95%或更大的概率。事實上也發生過DNA模式完全吻合但實際并非為生父的情況，但這種情況的可能性極低。在親子鑒定中的應用DNA多態性檢驗是目前親子鑒定中最準確的一在個體鑒別中的應用基因指紋又稱DNA指紋，指的單基因座探針限制性片段長度多態性。DNA所含有的遺傳信息是由遺傳密碼字母A、C、G和T的序列決定的。人類含有總數約30億個這種字母，它們在人體每個細胞的染色體上都以一定的次序排列，排列次序的不同使得一個個體與另一個個體完全不同。個體間的親緣關系相距越遠，基因組的核苷酸字母排列差異就越大。相反，遺傳上相關的個體（如同胞、父子）相應地在其字母序列上有很大的相似性。在個體鑒別中的應用基因指紋又稱DNA指紋，指的單基因座探針限在個體鑒別中的應用DNA指紋就是通過分析這種差異來確定個體。DNA指紋是最可靠的個體確認方法，現已在司法實踐中廣泛應用，有很多案例的唯一證據就是留在現場的這些藏在細胞內的DNA。在個體鑒別中的應用DNA指紋就是通過分析這種差異來確定個體。在惡性腫瘤診斷中的應用腫瘤診斷腫瘤療效觀察腫瘤的轉移在惡性腫瘤診斷中的應用腫瘤診斷在個體化治療中的應用細胞色素氧化酶P450（CYP450基因的多態性細胞色素P4502D6（CytochromeP4502D6，CYP2D6）是細胞色素藥物代謝酶中較為重要的一種，由497個氨基酸組成。主要參與多種重要藥物的代謝，包括多種抗心律失常藥、β1受體阻滯藥、抗高血壓及三環類抗抑郁藥等。CYP2D6參與代謝的藥物占總P450代謝藥物的30%。CYP2D6的基因多態性會導致患者代謝藥物能力的很大差別。當患者的基因型是CYP2D6*1/*1時，屬于強代謝型（EM）；當患者的基因型是CYP2D6*1/*10時，屬于中等代謝型（IM）；當患者的基因型是CYP2D6*10/*10時，屬于弱代謝型（PM）。同樣是美托洛爾用藥的常規劑量為25mg/次，2次/d，對于EM者，推薦劑量為常規劑量的140%；對于IM者，推薦劑量為常規劑量的60%；對于PM者，推薦劑量為常規劑量的30%?？沙Ｒ幍貞貌煌腜450基因型來評價新藥在臨床試驗中的療效。在個體化治療中的應用細胞色素氧化酶P450（CYP450基因在血液篩檢中的應用HCV和HIV感染“窗口期”HBVDNAPCR檢測篩檢血液的意義在血液篩檢中的應用其它Immuno-PCR其它Immuno-PCRPCR應用存在的問題病原體遺傳病腫瘤PCR應用存在的問題病原體定量PCR測定的臨床應用

及應注意的問題：病原體為什么要做定量測定？定性和定量測定結果報告上的混淆。定量PCR測定的臨床應用

及應注意的問題：病原體為什么要做定量測定？用于已知病毒感染患者抗病毒治療效果的動態觀察及抗病毒藥物的臨床研究；細菌、支原體、衣原體等一般不需要做定量檢測。用于基因表達方面的研究，如特定的mRNA的定量測定。為什么要做定量測定？定量測定的結果報告定量測定測定的是量的“多”或“少”.用于已知患者的抗病毒治療的動態觀察.定量測定結果報告：根據所使用的測定方法的測定范圍報告結果，如樣本測定結果高出此范圍，則可報告>多少，也可對樣本稀釋后再檢測；如低于此范圍，則報告<多少，如<103拷貝數/ml，而不能報告為0拷貝數/ml或陰性。定量測定的結果報告定量測定測定的是量的“多”或“少”.用于已定性測定定性測定則是測定某種物質的“有”或“無”，用于未知病人的確認診斷。什么樣的病原體感染用定性測定?

細菌性感染、一過性的急性病毒性疾病、支原體和衣原體感染、寄生蟲病等。定性測定遺傳病檢測的問題認識的簡單化、依賴于商品試劑盒檢測與臨床結合不足遺傳病檢測的問題腫瘤檢測的問題濫用沒有經過批準的商品試劑腫瘤檢測的問題個體化治療的檢測問題“概念”個體化治療的檢測問題基因芯片“概念”哪個項目需要多個指標同時進行檢測的，這種同時檢測能帶來什么樣的方便或快捷，并且將新方法與現有方法比較，有什么樣的優點。技術或方法的成熟程度判斷的最簡單的方法：找3~5份含不同濃度特定分析物的臨床標本，用其重復檢測20次，觀察結果是否一致，如出現不一致（哪怕是只有1次不一致），就不能用于臨床檢測。基因芯片“概念”臨床PCR檢驗的標準化方法試劑的標準化

核酸提取“內標”(Internalcontrol)的應用工作程序的標準化

標本采集、運送、管理、檢測、質量控制、結果報告和解釋標準物質的研究臨床PCR檢驗的標準化方法試劑的標準化臨床PCR檢驗應用的發展趨勢核酸提取方法的簡便化和自動化項目的多樣化：從病原體、到基因疾病的診斷、多標志物同時檢測、疾病基因指紋不同原理的實時核酸擴增儀的普遍應用擴增試劑的改進：標準化、防污染、有內標陰性質控臨床PCR實驗室質量理念不斷增強臨床PCR檢驗應用的發展趨勢核酸提取方法的簡便化和自動化謝謝！謝謝！PCR技術應用進展及存在問題衛生部臨床檢驗中心李金明PCR技術應用進展及存在問題衛生部臨床檢驗中心李金明PCR?

PCR只是一個簡單的不起眼玩藝

——凱利·穆利斯（KaryMullis)

PCR只是一個概念，所發生的奇跡是：PCR概念變成了可操作的實驗系統，變成了一項成熟的技術，后者又上升成為新的概念。…

它最大的特點就是能不斷推出新形式。

——摘自[MakingPCR:AStoryofBiotechnologybyPaulRabinow]PCR?PCR只是一個簡單的不起眼玩藝KaryMullisKaryMullis什么是PCR?

我不認為PCR能夠用兩種“革命”(政治革命和科學革命)加以說明。……它的發明并沒有改變基因操作的本質。有了PCR，我們能在更廣的范圍內更快、更容易地進行基因操作，學術界也完全不用等到某人死去或退休后才能接受PCR。它只不過是一種新工具。

——凱利·穆利斯（KaryMullis)什么是PCR?我不認為PCR能夠用兩種““…真正驚人的是PCR完全不是為解決某一個難題而設計的,該技術成熟之后,它所能解決的難題才開始涌現…”

-史蒂文·沙夫“…真正驚人的是PCR完全不是為解決某一個難題而設計的,該PCR技術的特點：高特異性引物的特異性。引物延伸時，堿基配對的正確性。TaqDNA聚合酶合成反應的忠實性。靶基因的特異性與保守性。選擇擴增特異性和保守性高的靶基因區域，擴增產物的特異性程度就更高。作為臨床測定的PCR方法，還有一個影響特異性的決定性因素是寡核苷酸雜交探針。PCR技術的特點：高特異性引物的特異性。PCR技術的特點：高靈敏度從理論上，其能在2~3小時內，將1個分子靶DNA，擴增至10億個分子。而就特定的擴增反應來說，從理論上，只要反應管中有1個分子，就能將其擴增至能檢出的水平。如將一些干擾因素考慮在內，一個反應體系中，如有2~3個以上的靶分子，即可成功的通過PCR擴增，將其檢測出來。PCR技術的特點：高靈敏度從理論上，其能在2~3小時內，將1PCR技術的特點：簡便快速整個PCR的擴增在一個小小的離心管中完成，過程也只是簡單的溫度變化，耐高溫的TaqDNA聚合酶的應用，避免了DNA聚合酶的反復加入。整個擴增反應可在2～4小時完成。

PCR技術的特點：簡便快速特定的低純度標本也可使用某些靶基因含量高的標本，如人的組織、細胞、毛發、血液、培養后的細菌和病毒等病原體等，DNA粗制品及總RNA即可作為擴增模板，但在具體的擴增時，可對標本進行適當的稀釋，在不影響靶基因模板的擴增濃度下，降低標本中PCR抑制物的濃度，以利于靶基因的擴增。特定的低純度標本也可使用某些靶基因含量高的標本，如人的組織、PCR技術的應用病原體核酸的檢測：定量（抗病毒藥物治療療效監測）；定性（耐藥突變、基因分型、血液篩查等）。遺傳病腫瘤個體鑒定其他（SNP及涉及核酸的科研等）PCR技術的應用病原體核酸的檢測：定量（抗病毒藥物治療療效監在感染性疾病病原體檢測中的應用病毒的檢測

定量(感染狀況判斷、抗病毒藥物治療療效監測）定性(耐藥突變、基因分型、血液篩查等）細菌及其它微生物的檢測難培養菌耐藥基因寄生蟲的檢測在感染性疾病病原體檢測中的應用病毒的檢測在遺傳病及其它基因相關疾病診斷中的應用α地貧β地貧血友病藥物性耳聾在遺傳病及其它基因相關疾病診斷中的應用α地貧地中海貧血地中海貧血是一種常染色體遺傳性溶血性貧血,是世界上最常見和發生率最高中的一種單基因遺傳病。地中海貧血是由于珠蛋白肽鏈合成障礙所致，出現一種或幾種珠蛋白肽鏈數量不足或完全缺乏，從而造成這種珠蛋白鏈參與的血紅蛋白合成量的減少。各珠蛋白鏈本身的氨基酸順序并無異常。其中α珠蛋白鏈合成受抑者，叫做“α地中海貧血”；β珠蛋白鏈合成受抑者，叫做“β地中海貧血”。地中海貧血地中海貧血是一種常染色體遺傳性溶血性貧血,是世界上α地中海貧血α地貧的發生是由于α珠蛋白鏈基因突變的結果，α珠蛋白基因定位于第16染色體短臂，每條染色體上均有兩個α珠蛋白基因，該基因總長30Kb，共包含七個連鎖的α類基因或假基因。在α-基因的突變中，以缺失型突變最為常見。α-基因的另一突變即為點突變，目前已發現的突變有18種以上，它包括錯義突變、無意突變、剪接部位突變及起始信號突變。α地貧的產前診斷目前一般采用PCR-探針雜交或限制性長度多態性（RFLP）方法進行。α地中海貧血α地貧的發生是由于α珠蛋白鏈基因突變的結果，α珠β地中海貧血β地中海貧血（簡稱β地貧）:β地貧由β珠蛋白鏈基因突變所引起，該基因定位于第11染色體短臂，總長度約60Kb，其中有許多胚胎性基因及假基因，而β珠蛋白基因有兩個內含子和3個外顯子，總長約為1.126Kb.β-基因的突變以點突變為主，亦有堿基的插入和缺失。目前在世界范圍內發現的點突變達160余種，其中在中國發現的有21種。β地貧的產前診斷目前一般采用PCR-探針雜交或限制性長度多態性（RFLP）或等位基因特異的PCR方法進行。β地中海貧血β地中海貧血（簡稱β地貧）:β地貧由β珠蛋白鏈基血友病血友病是一種X連鎖隱性遺傳病，分為血友病甲和血友病乙，幾乎全部發生在男性身上。血友病甲是由于凝血因子Ⅷ的缺乏所致，而血友病乙則是因為缺乏凝血因子Ⅸ。控制產生凝血因子Ⅷ和Ⅸ的基因位于X性染色體上。血友病血友病是一種X連鎖隱性遺傳病，分為血友病甲和血友病乙，母親為血友病基因攜帶者時致病基因遺傳每個兒子患血友病及每個女兒為致病基因攜帶者的機會均為50%母親為血友病基因攜帶者時致病基因遺傳每個兒子患血友病及每個女父親為血友病患者時的致病基因遺傳

所有兒子都正常，所有女兒都是攜帶者父親為血友病患者時的致病基因遺傳所有兒子都正常，所有女兒都父親為血友病患者母親為攜帶者時的致病基因遺傳每個兒子和女兒患血友病及每個女兒為致病基因攜帶者的機會均為50%，兒子有一半正常

父親為血友病患者母親為攜帶者時的致病基因遺傳每個兒子和女兒患血友病的分子診斷大多數血友病突變的大量變異和近代起源使遺傳篩選過程錯綜復雜。目前基本上使用PCR方法檢測。診斷攜帶者的最佳途徑是檢測其家庭成員的特異基因缺陷。策略：根據全國性可信基因突變和譜系數據庫進行篩選，鑒定并記錄每一個家庭中的病人或攜帶者的突變。這樣，根據個人所屬家庭，只有小部分血友病基因需要檢查，所以可以迅速而準確地篩選每一個家庭成員并降低成本。英國和瑞典完全使用這種策略，它代表了利用各種遺傳缺陷譜系鑒定遺傳性疾病的篩選模式。血友病的分子診斷大多數血友病突變的大量變異和近代起源使遺傳篩藥物性耳聾我國目前聾啞患者約有1770萬，居殘疾人之首。耳聾分先天性和后天性兩種。在后天性耳聾中，藥物性致聾發生率占40％。而在藥物引起的耳聾者中，3歲前發病為50％，7歲前可達82％。其元兇是氨基糖甙類藥物，如鏈霉素、丁胺卡那霉素與慶大霉素、妥布霉素及核糖霉素等，它們均能摧毀毛細胞與螺旋形神經節，以而使聽覺傳導系統受到嚴重損害，并導致病人耳聾。

藥物性耳聾我國目前聾啞患者約有1770萬，居殘疾人之首。耳聾藥物性耳聾氨基糖甙類抗生素所致的耳聾可分為兩類：一類因接受了中毒劑量而致聾；另一類是有遺傳背景，即帶有線粒體125rRNA基因AI555G均質性點突變基因。由細胞線粒體的遺傳基因發生變異之故。即家族的變異基因可能通過母親遺傳給她的子孫，使之具有潛在的過敏性，此稱母系遺傳。該突變使原有的BsmAI酶切位點消失藥物性耳聾氨基糖甙類抗生素所致的耳聾可分為兩類：一類因接受了藥物性耳聾檢測方法主要是運用PCR技術，結合限制性內切酶進行分析，其更新的技術包括變性高效液相色譜分析等。藥物性耳聾檢測方法主要是運用PCR技術，結合限制性內切酶進在親子鑒定中的應用每個人的遺傳物質一半來自父親，另一半則來自母親。根據孟德爾遺傳分離和自由組合定律，親代基因型決定子代基因型，在沒有基因突變和分型錯誤的前提下，孩子不可能帶有雙親均沒有的等位基因。父系遺傳的Y染色體的標記，子代的分型必定與父親的相同，而且同一父系的所有個體的分型一致。母系遺傳的線粒體DNA，子代的分型與母親的分型一致，并且同一母系的所有個體的分型一致。

在親子鑒定中的應用每個人的遺傳物質一半來自父親，另一半則來自在親子鑒定中的應用父與子之間僅有一個遺傳標志不符合遺傳規律尚不能排除親子關系，因為有可能是突變所致。必須有2個以上不同基因座同時不符才能否定其親子關系。親子鑒定的手段主要有兩大類:(1)血液中各種抗原成分的遺傳多態性標志物檢驗,如人類白細胞抗原分型、紅細胞抗原分型、紅細胞酶型及血清型；（2）DNA多態性檢驗。主要包括有單基因座探針限制性片段長度多態性（DNA指紋）和單基因座擴增片段長度多態性（包括用多聚酶鏈反應(PCR)檢測的可變數目串聯重復多態性(VNTR)和短串聯重復多態性(STR)）。

在親子鑒定中的應用父與子之間僅有一個遺傳標志不符合遺傳規律尚在親子鑒定中的應用DNA多態性檢驗是目前親子鑒定中最準確的一種方法。如果孩子和被測試男子的DNA模式在兩個或多個DNA探針上不吻合,那么被測試男子便被100%排除,即他是親生父親的可能性是0%。反之，如果孩子和被測試父親的DNA模式完全吻合,則在理論上不能100%肯定其為親生父親，只能計算出99.95%或更大的概率。事實上也發生過DNA模式完全吻合但實際并非為生父的情況，但這種情況的可能性極低。在親子鑒定中的應用DNA多態性檢驗是目前親子鑒定中最準確的一在個體鑒別中的應用基因指紋又稱DNA指紋，指的單基因座探針限制性片段長度多態性。DNA所含有的遺傳信息是由遺傳密碼字母A、C、G和T的序列決定的。人類含有總數約30億個這種字母，它們在人體每個細胞的染色體上都以一定的次序排列，排列次序的不同使得一個個體與另一個個體完全不同。個體間的親緣關系相距越遠，基因組的核苷酸字母排列差異就越大。相反，遺傳上相關的個體（如同胞、父子）相應地在其字母序列上有很大的相似性。在個體鑒別中的應用基因指紋又稱DNA指紋，指的單基因座探針限在個體鑒別中的應用DNA指紋就是通過分析這種差異來確定個體。DNA指紋是最可靠的個體確認方法，現已在司法實踐中廣泛應用，有很多案例的唯一證據就是留在現場的這些藏在細胞內的DNA。在個體鑒別中的應用DNA指紋就是通過分析這種差異來確定個體。在惡性腫瘤診斷中的應用腫瘤診斷腫瘤療效觀察腫瘤的轉移在惡性腫瘤診斷中的應用腫瘤診斷在個體化治療中的應用細胞色素氧化酶P450（CYP450基因的多態性細胞色素P4502D6（CytochromeP4502D6，CYP2D6）是細胞色素藥物代謝酶中較為重要的一種，由497個氨基酸組成。主要參與多種重要藥物的代謝，包括多種抗心律失常藥、β1受體阻滯藥、抗高血壓及三環類抗抑郁藥等。CYP2D6參與代謝的藥物占總P450代謝藥物的30%。CYP2D6的基因多態性會導致患者代謝藥物能力的很大差別。當患者的基因型是CYP2D6*1/*1時，屬于強代謝型（EM）；當患者的基因型是CYP2D6*1/*10時，屬于中等代謝型（IM）；當患者的基因型是CYP2D6*10/*10時，屬于弱代謝型（PM）。同樣是美托洛爾用藥的常規劑量為25mg/次，2次/d，對于EM者，推薦劑量為常規劑量的140%