1、臨床檢驗講義第一章 血液標本采集和血涂片制備1血液標本采集和抗凝劑 血液在循環(huán)系統(tǒng)中不斷地流動，與全身各系統(tǒng)的組織器官均有密切的聯(lián)系，參與機體的功能活動，維持正常的新陳代謝和內(nèi)外環(huán)境的平衡。在病理情況下血液中各成分質(zhì)和量的改變不僅能反映造血系統(tǒng)的疾患，而且能直接或間接地提示全身或局部組織器官的病變。很多因素會影響到血液標本檢測，如患者的活動情況和精神狀態(tài)、藥物、年齡、性別、種族、標本采集的時間以及是否吸煙等都會明顯影響檢測結(jié)果。此外，血液標本的分析應密切結(jié)合臨床，例如，患者有嚴重腹瀉或嘔吐時，紅細胞計數(shù)可因脫水而增高。1采血方法：血標本的正確采集是獲得準確、可靠的實驗結(jié)果的關(guān)鍵。血液標本的采集

2、分為皮膚采血法、靜脈采血法和動脈采血法，所有的采血技術(shù)均要求保持血液標本的完整性。不同的采血法無論細胞成分或化學組成，多存在不同程度的差異，因此在判斷和比擬結(jié)果時必須予以考慮。1靜脈采血法：當所需血量較多或采用全自動血液分析儀測定時，通常使用靜脈采血法。位于體表的淺靜脈幾乎均可作為采血部位，通常采用肘部靜脈；如肘部靜脈不明顯時，可改用手背靜脈或內(nèi)踝靜脈，必要時也可從股靜脈采血。2皮膚采血法：此法所采之血實質(zhì)是微動脈、微靜脈和毛細血管的混合血，也含有細胞間質(zhì)和細胞內(nèi)液。主要用于各種微量檢查或一般常規(guī)檢查，多項選擇擇手指為采血部位。世界衛(wèi)生組織WHO推薦取左手無名指指端內(nèi)側(cè)血液做血液一般檢驗。嬰幼

3、兒手指太小可用腳拇趾或足跟采血。嚴重燒傷患者，應選擇皮膚完整處采血。為防止交叉感染，應嚴格實行一人一針制，有利于采血的質(zhì)量控制。皮膚采血的主要缺點是易于溶血、凝血和可能混入組織液，檢查結(jié)果重復性差。3真空采血法：又稱為負壓采血法。各種真空定量貯存抗凝試管，根據(jù)需要標有不同的色碼備用，適于不同的檢驗工程。該法采用封閉式采血，血樣無需容器之間的轉(zhuǎn)移，減少了溶血現(xiàn)象,能有效保護血液有形成分，保證待驗血標本原始性狀的完整性，使檢驗結(jié)果更接近真實,為臨床診斷提供可靠依據(jù)。但真空采血管價格較高，有待進一步降低本錢。2抗凝劑選擇：使用全血和血漿檢查，通常采集靜脈血，需要使用抗凝劑。檢查的工程不同，所使用的抗

4、凝劑也不同。實驗室常用的抗凝劑和使用方法如下。1乙二胺四乙酸EDTA 鹽：常用其鈉鹽或鉀鹽，能與血液中鈣離子結(jié)合成螯合物，而使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。EDTA鹽對血細胞形態(tài)和血小板計數(shù)影響很小，適用于多項血液學檢查。但EDTA影響血小板聚集，不適合于作凝血象檢查和血小板功能試驗。2草酸鹽：常用的有草酸鈉、草酸鉀和草酸銨，它們?nèi)芙夂蠼怆x的草酸根與標本中的鈣離子形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血功能。草酸鈉通常用0.1mol/L濃度，與血液按1：9比例使用，過去主要用于凝血象檢查。但草酸鹽對凝血V因子保護功能差，影響凝血酶原時間測定效果；草酸鹽與鈣結(jié)合形成的沉淀物，影響自動凝血儀的

5、使用。因此，凝血象檢查宜選用枸櫞酸鈉為抗凝劑。3肝素：肝素是生理性抗凝劑，廣泛存在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中。其抗凝機制較為復雜，主要是加強抗凝血酶滅活絲氨酸蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。肝素具有抗凝力強、不影響血細胞體積、不易溶血等優(yōu)點。除有些因素會干擾凝血機制檢查工程外，絕大多數(shù)的檢查都可用肝素作為抗凝劑，它是紅細胞透滲脆性試驗理想的抗凝劑。盡管肝素可以保持紅細胞的自然形態(tài)，但由于其常可引起白細胞聚集，并使血涂片在羅氏染色時產(chǎn)生藍色背景，因此肝素抗凝血不適合血液學一般檢查。4枸櫞酸鹽：主要為枸櫞酸鈉，凝血試驗時

6、枸櫞酸鹽能與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合物，從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉與血液的比例為19。枸櫞酸鹽在血中的溶解度低，抗凝力不如前幾種抗凝劑。多用于臨床血液學檢查，一般用于紅細胞沉降率和凝血功能測定。因其毒性小，也是輸血保養(yǎng)液的成分之一。2血液涂片制備和細胞染色 血液涂片和染色的好壞直接關(guān)系到檢驗的結(jié)果，必須以認真負責的態(tài)度注意操作過程中的每一個環(huán)節(jié)。1血液涂片制備：血涂片制備是血液學檢查重要的根本技術(shù)之一。對一張良好的血涂片的要求是：厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細胞分布要均勻，血膜邊緣要整齊，并留有一定的空隙。血涂片太薄，50%的白細胞集中于邊緣或尾部，血涂片過厚、細胞重疊縮小，均不利于白細胞分類

7、計數(shù)。2血液細胞染色1瑞氏染色法：為了觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，識別各種細胞及其異常變化，血涂片必須進行染色。瑞氏染色法是血細胞分析最經(jīng)典和最常用的染色法。瑞氏染料：是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍組成的復合染料。染色原理：是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程，此過程既有物理的吸附作用，又有化學的親和作用，各種細胞成分化學性質(zhì)不同，對各種染料的親和力也不一樣。因此，染色后同一血片上各種細胞可以染上各自特征性的顏色。pH值的影響：細胞各種成分均屬蛋白質(zhì)，由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì)，所帶電荷隨溶液pH而定，在偏酸性環(huán)境中下正電荷增多，易與伊紅結(jié)合，染色偏紅；在偏堿性環(huán)境中負電荷增多，易與美藍或天青結(jié)合，染色

8、偏藍。2姬姆薩染色法：姬姆薩染液由天青、伊紅組成。姬姆薩染色原理和結(jié)果與瑞氏染色根本相同，但對細胞核和寄生蟲著色較好，結(jié)構(gòu)顯示更清晰，而胞質(zhì)和中性顆粒那么染色較差。第二章 紅細胞檢查血液通過循環(huán)系統(tǒng)與全身各組織器官密切聯(lián)系，參與機體呼吸、運輸、防御、調(diào)節(jié)體液滲透壓和酸堿平衡等各項生理活動，維持機體正常新陳代謝和內(nèi)外環(huán)境的平衡。血液檢驗不僅是診斷各種血液病的主要依據(jù)，對其他系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別也可提供許多信息，是臨床醫(yī)學檢驗中最常用的，最重要的根本內(nèi)容。紅細胞是血液中數(shù)量最多的有形成分。紅細胞起源于骨髓造血干細胞CFU-S，在紅細胞生成素Epo作用下經(jīng)紅系祖細胞階段，分化為原紅細胞，經(jīng)過數(shù)次有絲

9、分裂依次發(fā)育為早幼、中幼和晚幼紅細胞。晚幼紅細胞已喪失分裂能力，它通過脫核而成為網(wǎng)織紅細胞。這一增殖、分化、成熟的過程在骨髓中進行約需72h。網(wǎng)織紅細胞再經(jīng)約48h即完全成熟。紅細胞釋放入血液后，平均壽命約120d，衰老紅細胞主要在脾臟破環(huán)，分解為鐵、珠蛋白和膽紅素。多種原因可造成紅細胞生成和破壞的平衡遭到破壞，一方面使紅細胞數(shù)量減少或增多，從而引起貧血或紅細胞增多癥。另一方面使紅細胞在質(zhì)量上發(fā)生改變。通過對紅細胞和血紅蛋白量的檢查，以及對紅細胞形態(tài)學或生化改變的檢查，對診斷和鑒別某些疾病具有重要臨床意義。1紅細胞計數(shù) 紅細胞計數(shù)(RBC)是常用的血液根本試驗。1檢測方法 1手工顯微鏡法：是傳

10、統(tǒng)的紅細胞計數(shù)法，用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，充入血細胞計數(shù)池，在顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的紅細胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中紅細胞數(shù)量。該法不需要特殊設備，但操作復雜、費時。2血液分析儀法：儀器法已成為目前細胞計數(shù)的主要方法，利用電阻抗和或光散射原理。儀器法比手工顯微鏡法更精確，且操作簡便、快速，已廣泛應用。2參考值：成年：男性 (45.5)1012/L；女性 (3.55.0)1012/L。新生兒 (6.07.0)1012/L。3臨床意義1生理性變化：增加：胎兒、新生兒、高原地區(qū)居民、劇烈的體力勞動、體育運動及情緒沖動時，紅細胞可一過性增多。減少：嬰幼兒從出生3個月起至15歲以前的兒童，因生長

11、發(fā)育迅速，血容量急劇增加而致造血原料相對缺乏，紅細胞及血紅蛋白一般比正常成人低約10%20%；局部老年人骨髓造血組織逐漸減少，其造血功能明顯減退，妊娠中、晚期為適應胎盤循環(huán)的需要，血容量劇增而引起血液稀釋，均可使紅細胞數(shù)及血紅蛋白減少，稱為生理性貧血。2病理性變化：增多：相對性增多，血漿中水分喪失，血液中有形成分也相應增加，多見于脫水致使血液濃縮。如：連續(xù)嘔吐、嚴重腹瀉、多汗、多尿、大面積燒傷或晚期消化道腫瘤長期不能進食等患者。絕對性增多，如缺氧：慢性肺心病、某些腫瘤及某些紫紺型先天性心臟病。造血系統(tǒng)增殖性疾病：如真性紅細胞增多癥。減少：見于各種貧血。按病因分類，可將貧血分成造血不良、紅細胞過

12、度破壞和失血三大類表。表2-1 貧血的病因和發(fā)病機制及形態(tài)學分類發(fā)病機制分類 主要臨床類型 形態(tài)學分類 紅細胞生成減少 造血干細胞和造血微環(huán)境的損害 再生障礙性貧血 正常紅細胞型 紅系祖細胞、幼紅細胞或紅細胞 單純紅細胞再生障礙性貧血 正常紅細胞型 生成素的免疫性破壞 骨髓被異常細胞或組織所浸潤 骨髓病性貧血 正常紅細胞型 脫氧核糖核酸合成障礙 巨幼細胞性貧血 大紅細胞型 (葉酸或維生素B12缺乏) 紅細胞生成素合成障礙 慢性疾病(炎癥性)貧血 大紅細胞型 正鐵血紅素合成障礙 缺鐵性貧血 小紅細胞低色素型 鐵粒幼細胞性貧血 鉛中毒性貧血 珠蛋白合成障礙 珠蛋白生成障礙性貧血(或型) 小紅細胞低

13、色素型 鐮形細胞性貧血 血紅蛋白C、D、E病等 紅細胞破壞增加 紅細胞膜缺陷 遺傳性球形細胞增多癥 正常紅細胞型 遺傳性橢圓形細胞增多癥 口形紅細胞增多癥 棘形紅細胞增多癥 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿 紅細胞酶缺陷 無氧糖酵解途徑紅細胞酶缺陷所致 正常紅細胞型 溶血性貧血如丙酮酸激酶缺陷等 缺乏磷酸戊糖旁路或谷胱甘肽代謝 所需酶 變異溶血性貧血如葡萄糖-6-磷酸脫 氫酶變異等 珠蛋白肽鏈量改變及分子結(jié)構(gòu)變異 (同上珠蛋白合成障礙) 小紅細胞低色素型 紅細胞被血清中抗體或補體所影響 自體免疫性溶血性貧血 正常紅細胞型 藥物誘發(fā)免疫性溶血性貧血 血型不合的輸血后溶血 新生兒同種免疫溶血病 機械性損傷

14、創(chuàng)傷性心原性溶血性貧血 正常紅細胞型 微血管病性溶血性貧血 行軍性血紅蛋白尿 化學、物理及生物因素 化學毒物及藥物引起溶血、 正常紅細胞型 大面積燒傷、毒蕈中毒、 感染、溶血性蛇毒睥臟內(nèi)阻留 脾功能亢進 正常紅細胞型 失血 急性失血 急性失血后貧血 正常紅細胞型 慢性失血 (同缺鐵性貧血) 小紅細胞低色素型 2血紅蛋白的測定 血紅蛋白(Hb)是一種微紅色的膠體物質(zhì)，其相對分子質(zhì)量為64 458。它是一種呼吸載體，每克血紅蛋白可攜帶氧1.34ml。成人紅細胞總量約有600g血紅蛋白，可攜氧800ml。研究發(fā)現(xiàn)，紅細胞內(nèi)充滿小顆粒，最小的直徑約為6.5nm，相當于1個血紅蛋白分子的直徑，此種顆粒于

15、近紅細胞膜處最多，越往細胞中央越少，這一分布與瑞氏染色血片上紅細胞的著色特點，即周邊深、中央淺呈所謂生理性中心淡染現(xiàn)象是完全一致。1檢測方法：血紅蛋白是一種色素蛋白，可以用比色法測定。血液中血紅蛋白以各種形式存在，包括氧合血紅蛋白、碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白或其他衍生物。1氰化高鐵血紅蛋白HiCN測定法：血液中除了SHb以外，其他各種血紅蛋白均可被試劑轉(zhuǎn)化、生成HiCN，其最大的吸收峰為540nm波長，可經(jīng)比色測定。此法為國際血液學標準化委員會 (ICSH)推薦的國際標準參考方法，操作簡單，顯色快且結(jié)果穩(wěn)定；但本法試劑中KCN有劇毒，測定過程中高白細胞和高球蛋白血癥易致混濁，HbCO轉(zhuǎn)化較慢。

16、2十二烷基月桂酰硫酸鈉血紅蛋白SLS-Hb法：除SHb外，血液中各種Hb均可與低濃度十二烷基月桂酰硫酸鈉SLS作用，生成SLS-Hb棕紅色化合物。SLS-Hb最大吸收波峰538nm，波谷500nm，肩峰560nm。由于摩爾消光系數(shù)尚未最后確認，因此不能用吸光度“A值直接計算血紅蛋白濃度。本法操作簡單，呈色穩(wěn)定，準確性和精確性符合要求，且無公害。但SDS質(zhì)量差異較大，并且SDS可破壞白細胞，不適合進行白細胞計數(shù)的血液分析儀使用。3疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)測定法：與HiCN法相似，但仍然有公害問題。4堿羥血紅蛋白(AHD 575nm)測定法：試劑簡單、不含有毒試劑、呈色穩(wěn)定，但由于其吸收峰在5

17、75nm，限制了此法在血液分析儀的使用。5溴代十六烷基三甲胺CTAB血紅蛋白測定法: 該法試劑溶血性強又不破壞白細胞，可同時進行白細胞計數(shù)，可用于血細胞分析儀自動檢測Hb和白細胞。缺點是對Hb測定結(jié)果的準確度和精密度較低。近年來，多參數(shù)血細胞分析儀的應用，使Hb測定逐步以儀器法取代手工法，其優(yōu)點是操作簡單、快速，同時可以獲得多項紅細胞的參數(shù)，血液分析儀法測定血紅蛋白的原理與手工法原理相似，多采用HiCN法，但由于各型號儀器使用的溶血劑不同，形成Hb的衍生物不同。某些溶血劑形成的衍生物穩(wěn)定性較差，因此要嚴格控制溶血劑參加量及溶血時間，特別是半自動血細胞分析儀應嚴格控制實驗條件。有些溶血劑內(nèi)雖參加

18、了KCN，但其衍生物并非是HiCN，儀器要經(jīng)過HiCN標準液校正后，才能進行Hb測定。儀器法測定血紅蛋白精確度CV約為1%。2參考值：成年：男性120160g /L；女性：110150g/L。新生兒：170200g/L。老年70歲以上：男性：94.2122.2g/L；女性86.5111.8g/L3臨床意義：同紅細胞計數(shù)。3紅細胞形態(tài)檢查 各種病因可作用于紅細胞生理進程的不同階段，從而引起紅細胞相應的病理變化，導致某些類型貧血的紅細胞產(chǎn)生特殊的形態(tài)變化。此種形態(tài)學改變包括紅細胞大小、形態(tài)、染色和內(nèi)涵物的異常。紅細胞形態(tài)檢查與血紅蛋白測定、紅細胞計數(shù)結(jié)果相結(jié)合可粗略地推斷貧血原因，對貧血的診斷和鑒

19、別診斷有很重要的臨床價值。紅細胞形態(tài)變化主要包括以下4個方面：1紅細胞大小不一：主要有 小紅細胞：指直徑小于6m的紅細胞。正常人偶見。血涂片中出現(xiàn)較多染色過淺的小紅細胞，提示血紅蛋白合成障礙，見于缺鐵性貧血珠蛋白生成障礙性貧血。而遺傳性球形細胞增多癥的小紅細胞，其血紅蛋白充盈良好，生理性中心淺染區(qū)卻消失。大紅細胞：指直徑大于10m的紅細胞。為未完全成熟的紅細胞，體積較大，因殘留脫氧核糖核酸，經(jīng)瑞氏染色后而呈嗜多色性或含有嗜堿性點彩。常見于巨幼細胞性貧血，也可見于溶血性貧血、惡性貧血等。巨紅細胞：指直徑大于15m的紅細胞。最常見于葉酸及維生素B12缺乏所致的巨幼細胞性貧血。由于缺乏上述因子，幼稚

20、紅細胞內(nèi)DNA合成缺乏，不能按時分裂，當這種幼稚紅細胞脫核之后，便成巨大的成熟紅細胞。血涂片如同時存在分葉過多的嗜中性粒細胞那么更有助于診斷。紅細胞大小不均：是指同一患者的紅細胞之間直徑相差一倍以上而言。大者紅細胞直徑可達12m，小者直徑僅2.5m。常見于嚴重的增生性貧血，巨幼細胞性貧血時尤為明顯，可能與骨髓粗制濫造紅細胞有關(guān)。 2紅細胞內(nèi)血紅蛋白含量改變：主要有正常色素性：紅細胞著色的深淺取決于血紅蛋白含量的多少，含量多者著色深，含量少者著色淡。正常紅細胞在瑞氏染色的血片中為淡紅色圓盤狀，中央有生理性空白區(qū)，通常稱正常色素性。除見于正常人外，還見于急性失血、再生障礙性貧血和白血病等。低色素性

21、：紅細胞的生理性中心淺染區(qū)擴大，甚至有的紅細胞僅于其周邊著色，中央不著色，成為環(huán)形紅細胞，提示其血紅蛋白含量明顯減少。常見于缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵幼粒細胞性貧血，某些血紅蛋白病。高色素性：細胞中心淡染區(qū)消失，細胞著色較深，整個紅細胞均染成紅色，而且胞體也大。其平均紅細胞血紅蛋白的含量增高，而平均血紅蛋白濃度多正常。最常見于巨幼細胞性貧血。多色性：它是剛脫核而尚未完全成熟的紅細胞，故其細胞體積較大。由于胞質(zhì)內(nèi)尚存有少量嗜堿性物質(zhì)RNA，因而紅細胞被染成灰紅色或淡灰藍色。正常人外周血中此種細胞占1%左右。嗜多色性紅細胞增多提示骨髓造紅細胞功能活潑。尤見于溶血性或急性失血性貧血。 細胞

22、著色不一：指同一血涂片中，同時出現(xiàn)低色素性和正常色素性兩種細胞，有時又稱雙形性貧血,多于鐵粒幼紅細胞性貧血。3紅細胞形狀改變：主要有球形紅細胞：該紅細胞在濕標本中為球形，而在涂片上那么顯示細胞中心著色深濃，體積較小，有球形之立體感。其主要變化為細胞厚徑加大，細胞的直徑與厚度之比減少。主要見于遺傳性和獲得性球形細胞增多癥如自身免疫溶血性貧血或直接理化損傷如燒傷等，偶爾見于小兒，但無臨床意義。橢圓形紅細胞：紅細胞呈橢圓形、桿形，兩端鈍圓，長軸增大，短軸縮短。長度可大于寬度34倍，最大直徑可達12.5m，橫徑可為2.5m。這種紅細胞生存時間一般正常，有時可縮短，但血紅蛋白并無異常。其形成機制可能與遺

23、傳所致的細胞膜異常基因有關(guān)，因為細胞只有成熟后才會呈現(xiàn)橢圓形，且將此種紅細胞置于高滲、等滲、低滲溶液或正常人血清內(nèi)，其橢圓形保持不變，而幼紅細胞，即使是網(wǎng)織紅細胞，均不呈橢圓形。見于遺傳性橢圓形細胞增多癥、大細胞性貧血；偶見于缺鐵性貧血、骨髓纖維化、巨幼細胞貧血、鐮形細胞性貧血。正常人血液約占1%，但不超過15%。靶形細胞：紅細胞中心部位染色較深，其外圍為蒼白區(qū)域，而細胞邊緣又深染，形如射擊之靶。有的中心深染區(qū)呈紅細胞邊緣延伸的半島狀或柄狀而成為不典型的靶形紅細胞。靶形細胞直徑可比正常紅細胞大，但厚度變薄，因此體積可正常。近來研究證明，此種細胞的出現(xiàn)主要是由于紅細胞內(nèi)血紅蛋白的化學成分發(fā)生變異

24、，以及鐵代謝異常所致。常見于各種低色素性貧血、尤見于珠蛋白生成障礙性貧血、HbC病，也見于阻塞性黃疸、脾切除后狀態(tài)。應注意與血涂片制作中未及時固定而引起的紅細胞形態(tài)改變相區(qū)別。口形紅細胞：紅細胞中央有裂縫，中心蒼白區(qū)呈扁平狀，頗似張開的口形或魚口。此種紅細胞有膜異常，使Na+透過性增加，細胞膜變硬，因而脆性增加，致使細胞生存時間縮短。常見于口形紅細胞增多癥，小兒消化系統(tǒng)疾患引起的貧血、也可見于酒精中毒、某些溶血性貧血及肝病患者等。正常人偶見。鐮形紅細胞：紅細胞外形呈鐮刀狀、線條狀，或L、S、V形等，形如鐮刀狀。主要原因是含有的異常血紅蛋白SHbS的紅細胞，在缺氧情況下溶解度降低，形成長形或尖形

25、的結(jié)晶體，使細胞膜發(fā)生變形。因此，檢查鐮形紅細胞需將血液制成濕片，然后參加復原劑如偏重亞硫酸鈉后觀察。普通血片中呈現(xiàn)的鐮狀紅細胞可能是在脾、骨髓或其他臟器的毛細血管中因缺氧而致變形的紅細胞。鐮狀細胞貧血HbS-S，HbS-C和鐮狀細胞特性HbA-S的血標本，在缺氧的條件下，可有大量鐮狀紅細胞。棘紅細胞：紅細胞外表有針尖狀突起，其間距不規(guī)那么，突起的長度和寬度可不一。多見于遺傳性或獲得性在-脂蛋白缺乏癥，可高達70%80%；也可見于脾切除后、酒精中毒性肝臟疾病、尿毒癥。棘紅細胞應與皺縮紅細胞區(qū)別。皺縮紅細胞，也稱鋸齒狀紅細胞可因制片不當、高滲等原因引起，紅細胞周邊呈鋸齒形，排列緊密、大小相等，外

26、端較尖。新月形紅細胞：紅細胞殘缺不全，體積大，狀如新月形，直徑約20m。此種紅細胞著色極淡，必須仔細識別，否那么不易發(fā)現(xiàn)。在蒸餾水試驗時出現(xiàn)此種細胞是由于紅細胞內(nèi)滲透壓高，將水分吸入使細胞體積脹大，又在涂片時細胞被推破所致。見于某些溶血性貧血如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥，其意義不明。正常人涂片上不見此種細胞。淚滴形紅細胞：成熟紅細胞形如淚滴樣或梨狀。其形成機制尚無定論，可能是由于細胞內(nèi)含有Heinz小體或包涵體所致；或是紅細胞膜的某一點被粘連而拉長之故。被拉長的細胞可長可短。嗜多色性紅細胞亦可有此形狀者。多見于貧血、骨髓纖維化癥時，偶見于正常人。緡錢狀紅細胞：當血漿中的某些蛋白，尤其是纖維蛋白原

27、和球蛋白增高時，可促使紅細胞正負電荷發(fā)生改變，而使其互相連接如緡錢狀，故而得名。裂紅細胞：為紅細胞碎片或不完整的紅細胞。大小不一，外形不規(guī)那么，有各種形態(tài)如刺形、盔形、三角形、扭轉(zhuǎn)形等。此系紅細胞通過因阻塞而致官腔狹小的微血管，見于彌漫性血管內(nèi)凝血、微血管病性溶血性貧血、重型珠蛋白生成障礙性貧血、巨幼細胞性貧血、嚴重燒傷。正常人血涂片中裂片細胞小于2%。紅細胞形態(tài)不整：指紅細胞形態(tài)發(fā)生各種明顯改變的情況而言，出現(xiàn)不規(guī)那么的奇異形狀，如豆狀、梨形、蝌蚪狀、麥粒狀和棍棒形等。此種細胞在某些感染或嚴重貧血時多見，最常見于巨幼細胞性貧血。異形紅細胞產(chǎn)生的原因尚未明，有人認為是化學因素，尤其是磷脂酰膽堿

28、、膽固醇和丙氨酸等對紅細胞的形態(tài)有影響，亦有人認為是物理因素所致。有核紅細胞：即幼稚紅細胞。正常時，1周之內(nèi)嬰幼兒血片中可見到少量有核紅細胞，而成人有核紅細胞均存在于骨髓之中，如見于外周血血涂片那么為病理現(xiàn)象。病理情況有：溶血性貧血：最常見于尤其是嚴重的溶血性貧血、新生兒溶血性貧血、自身免疫性溶血性貧血、巨幼細胞性貧血。因紅細胞大量破壞，機體相對缺氧，導致促紅細胞生成素水平增高，骨髓紅系增生，除了網(wǎng)織紅細胞大量入血外，一些幼稚紅細胞提前釋放入血，此種現(xiàn)象說明骨髓有良好的調(diào)節(jié)功能。造血系統(tǒng)惡性疾患或骨髓轉(zhuǎn)移性腫瘤：見于各種急、慢性白血病及紅白血病。由于骨髓中大量白血病細胞充滿而排擠釋放幼紅細胞，

29、也可因髓外造血缺乏控制能力所致，有核紅細胞以中、晚幼紅細胞為主。在紅白血病時，那么可見到更早階段的紅細胞，且伴有形態(tài)上有巨幼樣變及其他畸變的有核紅細胞。慢性骨髓增生性疾病：尤其是骨髓纖維化，周圍血涂片可階段性出現(xiàn)有核紅細胞，作為涂片中最顯著的變化，源于髓外造血和纖維化變化的骨髓。脾切除后：骨髓結(jié)構(gòu)正常時，僅有個別的有核幼稚紅細胞可能到達髓竇，并由此進入周圍血液，通常立刻被脾臟扣留。脾切除后，無此約束，因此血涂片中常可見到少量有核紅細胞。球形紅細胞主要見于遺傳性和獲得性球形細胞增多癥，偶爾見于小兒，但無臨床意義。4紅細胞內(nèi)出現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)：主要有：嗜堿性點彩紅細胞：簡稱點彩紅細胞，指在瑞氏染色條件下

30、，成熟紅細胞或幼紅細胞的胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)不一的藍色點狀物，屬于未完全成熟紅細胞，其顆粒大小不一、多少不等。其可能的原因有2種：重金屬損傷細胞膜：使嗜堿性物質(zhì)凝集。嗜堿性物質(zhì)變性：鉛中毒時，此種細胞明顯增加，常作為鉛中毒診斷篩選指標。在其他各類貧血中，亦可見到點彩紅細胞，其增加常表示骨髓造血旺盛或有紊亂現(xiàn)象。正常人血涂片中很少見到嗜堿性點彩紅細胞。豪焦小體：又稱為染色質(zhì)小體。成熟紅細胞或幼紅細胞的胞質(zhì)內(nèi)含有一個或多個直徑為12m的暗紫紅色圓形小體。已證實此小體為核碎裂或溶解后所剩剩余局部。可見于脾切除術(shù)后、無脾癥、脾萎縮、脾功能低下、紅白血病和某些貧血患者；在巨幼細胞貧血時，更易見到。卡波環(huán)：在嗜

31、多色性或堿性點彩紅細胞的胞質(zhì)中出現(xiàn)的紫紅色細線圈狀結(jié)構(gòu)，呈環(huán)形或8字形。其來源及性質(zhì)未明。現(xiàn)認為可能是胞質(zhì)中脂蛋白變性所致，常與豪焦小體同時存在。可見于白血病、巨細胞性貧血、增生性貧血、鉛中毒或脾切除后。寄生蟲：當患者感染瘧原蟲、微絲蚴、杜利什曼原蟲等時，可見紅細胞胞質(zhì)內(nèi)相應的病原體。4血細胞比容測定 血細胞比容PCV，是指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細胞在全血標本中所占體積的比值。測定的方法分為手工法和血液分析儀法。1檢測方法1手工法：手工測定血細胞比容的方法較多，如折射計法、粘度法、比重測定法、離心法和放射性核素法，其中以后者最準確，被ICSH定為參考方法，但其不適合一般實驗室常規(guī)使用。

32、微量離心法采用毛細管高速離心，離心力較大，紅細胞間殘留的血漿量較低，且標本用量小、操作簡便，現(xiàn)被WHO定為首選常規(guī)方法。2血液分析儀法：目前血液分析儀提供的參數(shù)中通常包括Hct，應注意當患者為紅細胞增多癥或血漿滲透壓異常時，儀器法常會出現(xiàn)誤差。2參考值：微量法 男性0.470.04；女性0.420.053臨床意義：血細胞比容是用于計算紅細胞3個平均指數(shù)的必要素之一，有助于貧血診斷和分類；可以評估血漿容量有無增減或稀釋濃縮程度，有助于某些疾病治療中補液量的控制，以及了解體液平衡情況。 增高：見于各種原因所致的血液濃縮，如大量嘔吐、大手術(shù)后、腹瀉、失血、大面積燒傷以及真性紅細胞增多癥可達0.80L

33、/L和繼發(fā)性紅細胞增多癥等；可用于臨床決定是否需要輸液及輸液量；減低：見于各種貧血。由于貧血種類不同，血細胞比容減少的程度并不與紅細胞計數(shù)值完全一致。 5.紅細胞平均指數(shù) 包括：紅細胞平均容積MCV，指每個紅細胞平均體積的大小，以飛升fl為單位；紅細胞血平均紅蛋白含量(MCH)，指每個紅細胞內(nèi)平均所含血紅蛋白的量，以皮克pg為單位；紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)，指平均每升紅細胞中所含血紅蛋白濃度g/L。(1)檢測方法1)手工法：對同一抗凝血標本同時計數(shù)紅細胞、測定血紅蛋白和血細胞比容，由此，可進一步計算出紅細胞3個平均指數(shù)。 每升血液中紅細胞體積 Hct MCV= = fl 每升血液中紅

34、細胞個數(shù) RBC 每升血液中血紅蛋白含量 Hb MCH= = pg 每升血液中紅細胞個數(shù) RBC 每升血液中血紅蛋白含量 Hb MCHC= = 每升血液中血細胞比容 Hct由于紅細胞3個平均指數(shù)都是間接算出的，因此，其前提是紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血細胞比容的測定必須用同一抗凝血標本，且所測定的數(shù)據(jù)必須準確，否那么誤差很大。 2)血液分析儀：能直接導出MCV的值，再結(jié)合儀器直接測定的RBC和Hb，計算出MCH和MCHCMCH=Hb/RBC，MCHC=Hb/RBCMCV。分析結(jié)果時必須注意紅細胞3個平均指數(shù)之間及與紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血細胞比容測定3個檢測指標之間的相互關(guān)聯(lián)性。 (2)參考值：

35、手工法：MCV 8092fl；MCH 2731pg；MCHC：320360g/L。血液分析儀法：MCV 80100fl；MCH 2734pg；MCHC：320360g/L (3)臨床意義：臨床上將紅細胞3個平均值測定的指標作為貧血的形態(tài)學分類依據(jù)表。表2-2 按血循環(huán)中成熟紅細胞的大小對貧血分類 貧血分類 MCV MCH MCHC 貧 血正細胞貧血 正常 正常 正常 再生障礙性貧血、急性失血性貧血、某些溶血性大細胞貧血 增高 增高 正常 各種造血物質(zhì)缺乏或利用不良的貧血單純小細胞貧血 減低 減低 正常 慢性感染、慢性肝腎疾病性貧血小細胞低色素貧血 減低 減低 減低 缺鐵性貧血及鐵利用不良貧血，

36、慢性失血性貧血6.紅細胞體積分布寬度(RDW) 是較新的紅細胞參數(shù)，由血液分析儀根據(jù)紅細胞體積的直方圖導出，反映所測標本中紅細胞體積大小的異質(zhì)程度，常用變異系數(shù)CV表示。它比血涂片顯微鏡觀察紅細胞形態(tài)大小不均的判斷更為客觀和準確。1檢測原理 血液分析儀多采用電阻抗原理檢測紅細胞大小，然后對被測所有紅細胞體積進行統(tǒng)計學分析，導出RDW值，其曲線形態(tài)可見于紅細胞直方圖。2參考值 成人11.6%14.6%3臨床意義 Bessman提出用MCV和RDW兩項參數(shù)作為貧血形態(tài)學分類的新指標。根據(jù)不同病因引起貧血的紅細胞形態(tài)特點的不同，可將貧血分成6類見表。表2-3 貧血的MVC/RDW分類法 貧血類型 M

37、CV/RDW特征 常見原因或疾病小細胞均一性 MCV減低，RDW正常 輕型珠蛋白生成障礙性貧血、某些繼發(fā)性貧血小細胞不均一性 MCV減低，RDW增高 缺鐵性貧血、-珠蛋白生成障礙性貧血非輕型、HbH病正常體積均一性 MCV、RDW均正常 再生障礙性貧血、白血病、某些慢性肝病、腎性貧血、急性失血后、長期或大劑量化學治療后、遺傳性球形紅細胞貧血正常體積不均一性MCV正常，RDW增高 混合型營養(yǎng)性缺乏性貧血、局部早期鐵缺乏尚無貧血、血紅蛋白病性貧血、骨髓纖維化、鐵粒幼細胞貧血等大細胞均一性 MCV增大，RDW正常 骨髓增生異常綜合征、局部再生障礙性貧血、局部肝病性貧血、某些腎病性貧血大細胞不均一性

38、MCV、RDW均增高 巨幼細胞貧血、某些肝病性貧血貧血時，RDW異常比其他紅細胞參數(shù)異常早出現(xiàn)，故可用于貧血早期的分類，特別可用于鑒別缺鐵性貧血和單純雜合子珠蛋白生成障礙性貧血：缺鐵性貧血RDW增高、MCV減低；單純雜合子珠蛋白生成障礙性貧血RDW正常、MCV減低。但需注意：單獨用RDW指標缺乏以鑒別診斷貧血，應結(jié)合其他檢驗才能明確診斷。7.網(wǎng)織紅細胞計數(shù) 網(wǎng)織紅細胞Ret是晚幼紅細胞脫核后到完全成熟紅細胞間的過渡細胞，其胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)RNA，經(jīng)煌焦油藍等活體染色后，嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍黑色顆粒，顆粒與顆粒連綴成線，線連接成網(wǎng)，故而得名。這種細胞屬于尚未完全成熟的紅細胞，仍在骨髓內(nèi)停留一定

39、的時間，然后再釋放入血流。因此骨髓中的網(wǎng)織紅細胞數(shù)不但比外周血高，而且亦較幼稚，體積通常比成熟紅細胞大，一般為79m。紅細胞中網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)愈多，表示細胞越幼稚，Heilmyer根據(jù)其發(fā)育階段把它分為5型，用此表示造血功能的盛衰：0型，是有核網(wǎng)織紅細胞，胞質(zhì)內(nèi)含有網(wǎng)織物者，僅見于正常骨髓中；I型，紅細胞幾乎被網(wǎng)織物充滿，又稱為絲球型，亦僅見于正常骨髓中；II型，位于紅細胞中央線團樣結(jié)構(gòu)開始松散，又稱為網(wǎng)型，此型大量存在于骨髓中；型，網(wǎng)織結(jié)構(gòu)稀小，呈不規(guī)那么枝點狀排列，又稱為破網(wǎng)型，周圍血中可見少量；IV型：胞質(zhì)中嗜堿物質(zhì)很少，呈分散的細顆粒、短絲狀，又稱為點粒型，多見于正常周圍血。目前，ICSH將網(wǎng)

40、織紅細胞分為IIV 4型，而不包括Heilmyer分型法中0型。1檢測方法1普通光學顯微鏡法：用煌焦油藍等活體染色方法顯示紅細胞內(nèi)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，并在顯微鏡下計數(shù)1000個紅細胞中所占的網(wǎng)織紅細胞數(shù)，以百分比或分數(shù)數(shù)表示。可分為試管法和玻片法，試管法操作簡便，容易掌握，重復性較好，被列為手工網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的參考方法；玻片法取血量少，但染色時混合血液中的水分容易蒸發(fā)，造成染色時間偏短，結(jié)果偏低，因其攜帶方便，適宜于床邊采血操作。顯微鏡法受主觀因素影響較多，且耗時費力。2網(wǎng)織細胞計數(shù)儀法：用熒光染料使含RNA的網(wǎng)織紅細胞著色，用流式細胞儀FCM計數(shù)并計算出網(wǎng)織紅細胞的百分比，并客觀地將網(wǎng)織紅細胞分成高熒

41、光強度網(wǎng)織紅細胞HFR、中熒光強度網(wǎng)織紅細胞MFR、低熒光強度網(wǎng)織紅細胞LFR，熒光強度越高，網(wǎng)織紅細胞越幼稚。這種分型對于化療、放療及移植患者治療過程的監(jiān)測、骨髓造血功能的分型有臨床價值。3血液分析儀法：最新型的血液分析儀，采用流式細胞法也可對Ret作分類計數(shù)，并提供與網(wǎng)織紅細胞相關(guān)的多個參數(shù)，包括紅細胞絕對值Rct、網(wǎng)織 紅細胞百分比Rct%、網(wǎng)織紅細胞平均體積MCVr、網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白分布寬度HDWr、網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白濃度HCR、網(wǎng)織紅細胞平均血紅蛋白濃度MCHCr；低熒光強度RetLFR、中熒光強度RetMFR、高熒光強度RetHFR、Ret成熟指數(shù)RMI RMI=MFR+HFR/

42、LFR100。2參考值手工法：成人：0008002或絕對值(2575)109L。初生兒：0020063臨床意義：網(wǎng)織紅細胞計數(shù)反映骨髓造血功能的重要指標。正常情況下，骨髓中網(wǎng)織紅細胞均值為150109/L，而血液中那么為65109/L。當骨髓網(wǎng)織紅細胞增多而外周血網(wǎng)織紅細胞減少時，可提示釋放障礙；如骨髓和外周血兩者網(wǎng)織紅細胞均增加，數(shù)量比為1：1時，那么認為釋放增加。還可從網(wǎng)織紅細胞發(fā)育過程中獲得的有關(guān)紅細胞生成活性的其他信息：除測定網(wǎng)織紅細胞數(shù)量外，有必要確定網(wǎng)織紅細胞的成熟類型。正常時，周圍血型網(wǎng)織紅細胞約為0.20.3，IV型約0.70.8，但骨髓紅系明顯增生時，可出現(xiàn)I型和II型網(wǎng)織紅

43、細胞。 1判斷骨髓紅細胞系統(tǒng)造血情況：溶血性貧血，網(wǎng)織紅細胞高達020或更高。急性失血后5l0天，網(wǎng)織紅細胞達頂峰，2周后恢復正常。典型再生障礙性貧血，網(wǎng)織紅細胞百分比常低于0005絕對值低于5109L 為診斷再生障礙性貧血的標準之一。 2作為貧血療效觀察指標：骨髓增生功能良好的患者，在給予有關(guān)抗貧血藥物后，網(wǎng)織紅細胞在l周左右可達頂峰，貧血愈嚴重，網(wǎng)織紅細胞數(shù)升得越高，其增高往往在紅細胞恢復之前；如果網(wǎng)織紅細胞不見增高，說明治療無效或骨髓造血功能有障礙。因此網(wǎng)織紅細胞計數(shù)是為貧血患者隨訪檢查工程之一。3網(wǎng)織紅細胞生成指數(shù)(RPI)：表示網(wǎng)織紅細胞的生成相當于正常人的多少倍。公式：RPI網(wǎng)織紅

44、細胞比值1002患者血細胞比容/正常人血細胞比容。或用網(wǎng)織紅細胞校正值公式：校正值網(wǎng)織紅細胞比值 患者血細胞比容/正常人血細胞比容8點彩紅細胞計數(shù) 尚未完全成熟的紅細胞在發(fā)育過程中受到損害，其胞質(zhì)中殘存變性的嗜堿性的RNA在染色時出現(xiàn)大小，形狀不一的藍色顆粒，此紅細胞稱為點彩紅細胞。1檢測方法：點彩紅細胞計數(shù)操作目前仍用顯微鏡血涂片染色傳統(tǒng)的檢查法，操作簡便。用堿性亞甲基藍液作血涂片染色，紅細胞呈淡藍綠色，點彩顆粒顯深藍色；如用瑞氏染色，顆粒那么呈藍黑色。通常用油鏡下計數(shù)1000個紅細胞中的點彩紅細胞數(shù)，換算成百分率。由于點彩紅細胞較少且分布不均，必要時可擴大紅細胞計數(shù)的數(shù)量。2參考值：310

45、-43臨床意義：在鉛、汞、鉍等金屬中毒及硝基苯、苯胺等中毒時，顯著增高。常作為鉛中毒的診斷篩選指標。溶血性貧血、巨幼細胞性貧血、惡性貧血、骨髓纖維化、惡性腫瘤及遺傳性嘧啶-5核苷酸酶缺乏等也可見增高。點彩紅細胞計數(shù)增高主要見于：9紅細胞沉降率測定 紅細胞沉降率ESR簡稱血沉，是指離體抗凝血靜置后，紅細胞在單位時間內(nèi)沉降的速度。雖然紅細胞在血漿中有一定的懸浮穩(wěn)定性，但因紅細胞含蛋白量比血漿高，比重大于血漿，所以在離體抗凝血中能自然下沉。在血管內(nèi)流動的紅細胞，因細胞間相互撞擊和紅細胞外表負電荷的互相排斥而減緩沉降。血沉過程一般分為3期：緡錢狀紅細胞形成期，一般要經(jīng)過數(shù)分鐘至10min。快速沉降期，

46、形成緡錢狀紅細胞以等速下降，約40min。細胞堆積期，又稱緩慢沉積期或擠緊期，此時紅細胞堆積在試管底部。健康人血沉值波動于一個較狹窄范圍內(nèi)，而在許多病理情況下血沉可明顯增快。1檢測方法：魏氏法Westergren法 將離體抗凝血液置于特制刻度測定管內(nèi)，垂直立于室溫中，1h準紅細胞層下沉的距離，用毫米mm數(shù)值報告。血沉儀法 血液經(jīng)抗凝靜置后，紅細胞下降，出現(xiàn)紅細胞與血漿別離現(xiàn)象，紅細胞與血漿的界面隨時間而下移，血沉儀用發(fā)光二極管和光電管檢測此界面的透光度改變，得到血沉值并顯示紅細胞沉降高度H與對應時間t相關(guān)的H-t曲線。2影響因素：紅細胞沉降是多種因素互相作用的結(jié)果。主要因素有： 1血漿中各種蛋

47、白的比例：一般認為，血沉加快主要是血漿中各種蛋白質(zhì)的比例改變，而與總蛋白濃度無關(guān)。白蛋白帶負電荷，球蛋白與纖維蛋白原帶正電荷，正常情況下，血漿蛋白所帶的正、負電荷呈平衡狀態(tài)。紅細胞因細胞膜外表的唾液酸而帶負電荷，彼此排斥間距為25nm，較為穩(wěn)定。小分子蛋白主要是血漿清蛋白等因其帶負電荷較多，使細胞相互排斥，不利于紅細胞緡錢狀的形成，使紅細胞沉降速度減緩；而大分子蛋白，如纖維蛋白原、急性反響蛋白、免疫球蛋白和巨球蛋白等，能促進紅細胞緡錢狀的形成，加快紅細胞的沉降。現(xiàn)已公認，血漿中帶有正電荷的不對稱的大分子物質(zhì)纖維蛋白原是最強有力的促緡錢狀聚集的物質(zhì)，其次為球蛋白，再次為、球蛋白以及膽固醇、甘油三

48、酯等；而清蛋白及卵磷脂那么抑制紅細胞緡錢狀的形成而減緩血沉。2紅細胞數(shù)量和形狀：紅細胞數(shù)量：一般情況下，紅細胞沉降率和血漿阻逆力保持一定的平衡狀態(tài)，如紅細胞數(shù)量減少，其總面積減少，所承受的血漿逆阻力也減少，因此血沉加快；但如紅細胞數(shù)量太少，那么影響紅細胞緡錢狀形成，血沉也減慢；反之，紅細胞增多時，血沉減慢。紅細胞直徑：直徑愈大血沉愈快，球形紅細胞、鐮形紅細胞不易聚集，因而血沉減慢。3血沉管與血沉架：血沉管與血沉架規(guī)格必須符合標準。血沉管置血沉架上應完全直立，血沉管傾斜時，紅細胞沿管壁一側(cè)下沉，而血漿沿另一側(cè)下降,會加速紅細胞沉降。經(jīng)研究，血沉管傾斜3，沉降率可增加30%，所以血沉測定時，血沉管

49、必須保證垂直。4血標本：必須防止脂肪血；抗凝濃度必須準確，抗凝劑濃度增加使血沉減慢，最好每周配制1次，置冰箱中保存。血與抗凝劑比例41要準確。抽血應在30s內(nèi)完成，不得混入消毒劑，防止形成凝塊，血液凝固使血漿纖維蛋白原減少，血沉減慢。5溫度： 可影響紅細胞沉降率。血沉應于1825的室溫下測定。室溫過高時血沉加快，可以按溫度系數(shù)校正。室溫過低時血沉減慢，無法校正。3參考值 手工魏氏法：成年男性015mmh 成年女性020mmh。4臨床意義 1生理性增快：婦女月經(jīng)期、妊娠3個月以上到分娩后3周，可達30 mmh以上。60歲以上因血漿纖維蛋白原含量逐漸增高等。2病理性增快：常見病因有：各種炎癥：細菌

50、性急性炎癥，炎癥發(fā)生后23天即可見血沉增快。風濕熱活動期、慢性炎癥如結(jié)核病，血沉明顯增快。組織損傷及壞死：較大手術(shù)創(chuàng)傷可導致血沉增快；心肌梗死時常于發(fā)病后34天血沉增快，持續(xù)l3周；心絞痛時血沉正常。惡性腫瘤：與腫瘤組織壞死、繼發(fā)感染及惡液質(zhì)貧血等因素有關(guān)。良性腫瘤血沉多正常，故常用血沉作為惡性腫瘤的普查篩選試驗，特別是非體表腫瘤及一般X線檢查等所不能查見的惡性腫瘤。惡性腫瘤手術(shù)切除或化療、放療較徹底血沉趨正常，復發(fā)或轉(zhuǎn)移時又增快。各種原因?qū)е碌母咔虻鞍籽Y：亞急性感染性心內(nèi)膜炎、黑熱病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡；各種原因引起的相對性球蛋白增高如慢性腎炎、肝硬化。多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥時，漿細胞惡性

51、增殖病血沉增快。貧血：血紅蛋白低于90g/L的貧血，血沉增快，貧血越嚴重，血沉增快越明顯。但需注意：低色素性貧血時，因紅細胞體積減小、血紅蛋白量缺乏而下沉緩慢；遺傳性球形細胞增多癥、鐮形細胞性貧血時，紅細胞形態(tài)不利于緡錢狀聚集，血沉反而減慢。高膽固醇血癥：血沉增快。3血沉減慢：意義較小，可因紅細胞數(shù)量明顯增多及纖維蛋白原含量嚴重減低所致。見于：各種原因所致的脫水血濃縮、真性紅細胞增多癥和彌散性血管內(nèi)凝血等。第三章 白細胞檢查1白細胞計數(shù)1檢測原理：用白細胞計數(shù)稀釋液(多用稀乙酸溶液)，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細胞后，滴入計數(shù)盤中，在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的白細胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中各種白

52、細胞的總數(shù)。2方法學評價1顯微鏡計數(shù)法：根底方法，簡便易行，不需昂貴儀器，在嚴格標準的條件下可用于校準血液分析儀；但其影響因素較多，故重復性和準確性較差。2血液分析儀計數(shù)法：易于標準化，精確性較高，速度快，特別適合大規(guī)模的健康人群的體檢及篩查；但需特殊儀器。某些人為或病理情況可干擾白細胞計數(shù)。(3)質(zhì)量控制：有經(jīng)驗控制、常規(guī)考核標準(RCS)、變異百分數(shù)評價法、兩差比值評價法、雙份計數(shù)標準差評價法。 (4)參考值：成人(4l0)109/L ，初生兒(1520)109/L ，6月2歲(1112)109/L(5)臨床應用：通常白細胞數(shù)高于l0109/L稱白細胞增高,低于4109/L稱白細胞減少。由

53、于中性粒細胞占白細胞總數(shù)的5070，其增高或減低直接影響白細胞總數(shù)的變化。2白細胞分類計數(shù) 白細胞分類計數(shù)是將血液制成涂片，經(jīng)染色后在油鏡下進行分類，求得各種類型白細胞的比值百分數(shù)。分析白細胞變化的意義時，必須計算各種類型白細胞的絕對值絕對值=白細胞總數(shù)分類計數(shù)的百分數(shù)，才有診斷參考價值。1檢測原理：將血液涂成薄膜，經(jīng)Wright染色后，于顯微鏡下，按白細胞形態(tài)學特征逐個分類計數(shù)，得出各種白細胞的比值或所占百分比。結(jié)合白細胞計數(shù)結(jié)果，可間接求出每升血液中各種白細胞的絕對值。2方法學評價1顯微鏡白細胞分類法：能準確地根據(jù)細胞形態(tài)特征進行分類計數(shù)，并可發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)、染色有無變化，是白細胞分類計數(shù)的

54、參考方法；但耗時，影響因素較多，重復性較差，不適應大量健康人群的篩檢。2血液分析儀分類計數(shù)法：主要有三分群部及五分類兩法，其速度快，準確性高，易于標準化。儀器對異常結(jié)果報警，提示了診斷方向，檢測結(jié)果以數(shù)據(jù)、圖形及文字等多種形式展示，是白細胞分類和篩檢的首選方法。但其結(jié)果只起到篩選作用，迄今尚無一臺儀器能完全代替顯微鏡血涂片進行白細胞分類檢查。 3質(zhì)量控制 1影響分類計數(shù)準確性的因素：分類不準確主要由于細胞在涂片中的分布不均和觀察者對細胞識別的錯誤。 2影響分類計數(shù)精確性的因素：可能與常規(guī)工作中分類計數(shù)細胞數(shù)較少有關(guān)。被計細胞占總計數(shù)細胞的比例越大，誤差越小。 3分類計數(shù)的參考方法：迄今世界上尚

55、無統(tǒng)一的分類計數(shù)參考方法。美國國家臨床實驗室標準化委員會NCCLS使用的參考方法是：使用EDTA-K3為抗凝劑的靜脈血，人工制成血涂片，以Romanowaky液進行染色，使用“城垛移動法，油鏡下分類計數(shù)200個白細胞。當以此法作為標準與其他分類法進行比擬時，需要4個熟練的技術(shù)人員在同一涂片中各計數(shù)200個白細胞(即總數(shù)為800個細胞)后，求出平均值來作為各類白細胞的靶值。4參考值 (成人)白細胞分類百分比絕對值中性桿狀核粒細胞0.010.05(0.040.5)109/L中性分葉核粒細胞0.50.7 (27)109/L嗜酸性粒細胞0.0050.05(0.050.5)l09/L嗜堿性粒細胞00.0

56、1(00.1)109/L淋巴細胞0.200.4(0.84)109/L單核細胞0.030.08(0.120.8)l09/L5臨床應用1中性粒細胞：根據(jù)其發(fā)育階段而將粒細胞群人為地劃分為分裂池、成熟池、貯備池、循環(huán)池和邊緣池等。分裂池：包括原始粒細胞、早幼粒細胞和中幼粒細胞，這些細胞可合成DNA，均具有分裂能力。成熟池：包括晚幼粒及桿狀核粒細胞。粒細胞自晚幼粒開始失去分裂能力，逐漸發(fā)育成熟。貯備池：包括局部桿狀核粒細胞及分葉核粒細胞，其數(shù)量可為外周血的520倍。貯備池中的粒細胞，在機體受到感染或其他應激反響時，可釋放入循環(huán)血液。循環(huán)池：進入外周血的成熟粒細胞有一半隨血液而循環(huán)，白細胞計數(shù)時所得的白

57、細胞值實際上僅為循環(huán)池的粒細胞數(shù)。邊緣池：進入血液的半數(shù)粒細胞，因微靜脈邊緣血流較慢而粘附于血管壁。邊緣池及循環(huán)池的粒細胞之間可以互相換位，保持著動態(tài)平衡。 中性粒細胞動力學有助于分析外周血中性粒細胞增高或減少的原因：暫時性白細胞增高，常見于嚴寒或暴熱刺激后，其白細胞增高是由于邊緣池細胞釋放入循環(huán)池所致。持續(xù)性白細胞增高，見于化膿性感染，晚期腫瘤(常伴壞死、繼發(fā)感染)，其白細胞增高是趨化因子吸引貯備池粒細胞入血所致，而慢性粒細胞白血病時的白細胞增高那么與核分裂池增大及細胞周期延長、在血中運轉(zhuǎn)時間延長有關(guān)。 = 3 * GB3 暫時性白細胞減少，見于傷寒感染時，可能由于細菌內(nèi)毒素抑制骨髓釋放成熟

58、粒細胞入血有關(guān)。持續(xù)性白細胞減少，見于原發(fā)性和繼發(fā)性再生障礙性貧血，這是由于粒細胞生成缺乏所致白細胞減少，系統(tǒng)性紅斑狼瘡和脾功能亢進病人那么因粒細胞破壞過多所致白細胞減少。中性粒細胞增高：中性粒細胞分葉核70%，絕對值7l09/L稱為中性粒細胞增高。生理性增高：中性粒細胞生理性增高通常不伴有白細胞質(zhì)量的改變。年齡：初生兒白細胞較高，約保持3個月，然后逐漸降低至成人水平。初生兒外周血白細胞主要為中性粒細胞。到第69天逐漸下降至與淋巴細胞大致相等，以后淋巴細胞逐漸增高，整個嬰兒期淋巴細胞數(shù)均較高，可達70。到23歲后，淋巴細胞逐漸下降，中性粒細胞逐漸上升，到45歲二者又根本相等，形成中性粒細胞和淋

59、巴細胞變化曲線的兩次交叉，至青春期時與成人根本相同。日間變化：在安靜和休息時白細胞數(shù)較低，活動和進食后較高；早晨較低，下午較高；一日之間最高值與最低值之間可相差一倍。運動、疼痛和情緒的影響：一般的腦力和體力勞動、冷熱水浴、日光或紫外線照射等均可使白細胞輕度增高；嚴寒、酷熱可使白細胞數(shù)高達15109/L或更高；劇烈運動、劇痛和情緒沖動可使白細胞顯著增高。妊娠與分娩：妊娠期白細胞常見增高；分娩時因產(chǎn)痛和產(chǎn)傷可使白細胞進一步增高，有的可高達34l09/L。分娩后25日內(nèi)恢復正常。 病理性增高：可歸納為反響性增高和異常增生性增高兩大類。反響性增高是機體對各種病因刺激的應激反響，發(fā)動骨髓貯備池中的粒細胞

60、釋放或邊緣池粒細胞進入血循環(huán)。增高的粒細胞大多為成熟的分葉核粒細胞或較成熟的桿狀核粒細胞；而異常增生性增高為造血干細胞克隆性疾病，造血組織中粒細胞大量增生，見于粒細胞白血病和骨髓增殖性疾病。粒細胞白血病造血組織中原始或幼稚粒細胞大量增生，釋放至外周血中的主要是病理性粒細胞(如白血病細胞)。 反響性增高可見于：急性感染或炎性：為引起中性粒細胞增高最常見的原因，化膿性球菌引起的局部炎癥或全身性感染最為明顯。某些桿菌如大腸桿菌、綠膿桿菌，真菌和放線菌，病毒如流行性出血熱、流行性乙型腦炎、狂犬病等，立克次體如斑疹傷寒，螺旋體如鉤端螺旋體、梅毒，寄生蟲如肺吸蟲等感染都可使白細胞總數(shù)增高和中性粒細胞增高。