1、發(fā)布日期 20041207 欄目 化藥藥物評價>>非臨床安全性和有效性評價 標題 土溫80的安全性研究進展 作者 王慶利 部門 正文內容 藥理毒理組 王慶利    土溫80 (Tween 80, polyoxyethylene 80 sorbitan monooleate, 聚山梨醇酯80),是一種非離子型表面活性劑，可用作乳化劑、分散劑、增溶劑或穩(wěn)定劑等，廣泛應用于藥物、食品等，其含量從不足1%到12%不等。國外對土溫80的安全性進行了深入的研究，已經積累了大量的資料，現(xiàn)對國外土溫80安全性研究結果進行總結，以供藥物非臨床研究及臨床研究參考。非臨床安

2、全性研究一般藥理學研究    家兔、貓、猴靜脈注射土溫80 50 mg/kg導致輕微的一過性的血壓降低，但犬的降壓效應會明顯加強。這可能與犬血漿組胺水平升高有關2。研究發(fā)現(xiàn)，靜脈注射土溫80后犬釋放組胺，而其他實驗動物或人卻不釋放3, 4。即使劑量在低達0.3 mg/kg（30秒內）時，仍可導致組胺釋放，繼而發(fā)生心動過緩和低血壓5。胺碘達隆（Aminodarone）是一種抗心律失常藥物，水溶性較差，因而采用了土溫80作為輔料制成靜脈注射液。犬分別注射給予商品化胺碘達隆注射液、自制的含有乙醇或土溫80的注射液，胺碘達隆的劑量相當，助溶劑分別為土溫80 100 mg/

3、kg、乙醇 5mg/kg、土溫80 10mg/kg。結果可見，土溫80組動物平均血壓降低至少60%，而乙醇組未見降低，提示低血壓主要是由溶劑土溫80所致6。    單次給藥毒性研究    目前已在多種動物中進行了多項單次給藥毒性試驗。大鼠單次注射給予土溫80乳劑56 mg/kg，未見毒性癥狀，未見血漿組胺水平升高。    家兔單次給予土溫80 200、500、800 mg/kg，200 mg/kg組未見明顯影響。500 mg/kg組動物出現(xiàn)血管內溶血、血漿脫色、血細胞壓積減小，在給藥后3 h內血清膽固醇和

4、磷脂（卵磷脂）水平迅速升高，612 h達到高峰， 2448 h后恢復到正常水平。800 mg/kg組動物則出現(xiàn)死亡7。    犬靜脈注射給予土溫80乳劑，出現(xiàn)了輕度到重度臨床癥狀，反應強度與土溫80的劑量與給藥速率相關。土溫80微乳劑615 mg/kg，34 min給完，可見嚴重反應，表現(xiàn)為齒齦、腹部、口鼻部和/或眼發(fā)紅，面部和耳部周圍膨脹，明顯的煩躁不安，這可能與血漿組胺水平升高有關。但以較低的速率給藥時（25100 mg/kg，1.52 h），僅出現(xiàn)輕微的組胺反應。以含有土溫80（8 mg/kg）的溶劑單次給予依托泊苷(40 mg/m2，30 min輸注)，出

5、現(xiàn)一過性低血壓（收縮壓、舒張壓、平均脈壓顯著降低）和皮膚反應（重度瘙癢等) 8。由于依托泊苷的劑量顯著低于臨床有效劑量，故認為該反應是溶劑土溫80的毒性所致。    從文獻資料中獲得的土溫80的半數(shù)致死劑量（LD50）與最小致死劑量（MLD）見下表9, 10：土溫80在不同動物種屬中的LD50和MLD 動物種屬  給藥途徑  LD50 (g/kg)  MLD (g/kg)  小鼠  靜脈注射  5.8   小鼠  腹腔注射  8.1  大鼠 &#

6、160;靜脈注射  1.79  1  大鼠  腹腔注射  6.8-10   犬  靜脈注射    0.5    貓  靜脈注射    0.5      從以上研究結果可見，土溫80有一定的安全范圍，但犬對土溫80十分敏感。重復給藥毒性研究經口給藥毒性11    小鼠和大鼠，給予含有土溫80 0、3000、6000、12500、25000或50000 ppm的飼料，連續(xù)

7、給藥14天。試驗過程中未見動物死亡，50000 ppm 組雄性大鼠平均體重增量明顯低于對照組。未見與土溫80相關的臨床改變、絕對臟器重量或相對臟器重量改變。以上述劑量連續(xù)給藥13周，未見動物死亡，各給藥組小鼠和大鼠的平均體重改變與其對照組相似。未見與土溫80相關的臨床改變、絕對臟器重量或相對臟器重量改變、大體觀察或顯微觀察損傷。以上研究結果提示，長期給予土溫80含量高達5%的飼料時，未見明顯毒性。消化道外途徑給藥    Fischer 344 大鼠靜脈輸注（20 min）給予土溫80，劑量為100175 mg/kg/天（按體表面積推算，約相當于60kg人（以下同）

8、9721701 mg/天），連續(xù)1個月，可見嗜酸性粒細胞計數(shù)輕微升高。    犬采用三種不同的給藥方案分別給予土溫8012 ：第1組，肌肉注射40 mg/kg（相當于人1298mg）（3雄/5雌），每月給藥1次，連續(xù)給藥6個月；第二組，肌肉注射 5 mg/kg（相當于人162 mg）（1雄/2雌），每3天1次，共3次；第三組，連續(xù)輸注52 mg/kg/hr（相當于人1688mg/hr）（1雄/1雌），連續(xù)3天。第1組犬出現(xiàn)面部膨脹，全身充血，攝水增多。但從第三次給藥開始，以上觀察結果的發(fā)生率與頻率明顯降低。1只犬在單次給藥后，出現(xiàn)嘔吐、斜躺以及直腸出血而被殺死。顯

9、微鏡檢查發(fā)現(xiàn)胃腸道充血、炎癥、出血和壞死。第2、3組動物出現(xiàn)的臨床指征與第1組相似。第3組的動物也出現(xiàn)了明顯的貧血和白細胞增多。臨床化學檢查發(fā)現(xiàn)AST、膽紅素顯著升高，BUN和肌酐輕微升高，血清鉀明顯降低。大體觀察和顯微檢查發(fā)現(xiàn)肝臟、腎臟、肺臟和皮膚發(fā)生與土溫80相關的改變。肝臟改變包括肝細胞空泡化、竇狀隙出現(xiàn)嗜酸性物，嗜酸性小體，膽管綠/棕色染，肝細胞壞死，腎曲小管上皮細胞空泡化；肺部水腫，壞死，急性炎癥；皮膚充血、水腫、壞死，炎癥。    食蟹猴靜脈輸注（20 min）給予土溫80 75 mg/kg/天（相當于人1458mg/天），連續(xù)30個月，未見異常。&#

10、160;   以上研究結果提示，土溫80經口或消化道外途徑給藥的安全窗相對較寬。遺傳毒性研究11在有或無代謝活化（S9）時，土溫80在沙門氏傷寒菌株TA100、TA1535、TA1537和TA98中未見致突變作用。生殖與發(fā)育毒性研究    妊娠CD大鼠自妊娠第019 d靜脈注射給予土溫80 12.5、50、75 mg/kg，給藥時間約為11.5 min，各劑量下均未見母體毒性或發(fā)育毒性。妊娠新西蘭白兔自妊娠第719 d注射給予土溫80 37.5、50、62.5 mg/kg（5 ml/kg, 50 ml/hr)，或187.5 mg/kg（10 m

11、l/kg, 100 ml/hr）。187.5 mg/kg組出現(xiàn)明顯的母體毒性（體重抑制，攝食量減少）和胎仔毒性（體重抑制）。     新生雌性大鼠，自出生后第47 d腹腔注射給予土溫80 1、5、10 mg/kg，在5月齡時進行解剖觀察發(fā)現(xiàn)土溫80可促進成熟，延長發(fā)情周期，發(fā)情持續(xù)期縮短，卵巢無黃體，出現(xiàn)退變卵泡。與未給藥對照組比較，給藥動物的子宮和卵巢相對重量減輕。子宮上皮層鱗狀上皮細胞化生，該子宮細胞學改變提示有長期雌激素樣刺激13。但后來Williams等人14研究發(fā)現(xiàn)，雌性大鼠在出生后2022 d經口給予土溫80，劑量高達5 g/kg/d，未見對

12、動物子宮重量的影響。致癌性研究11    B6C3F1小鼠和F344/N大鼠，60只/性別/組，給予含有土溫80 0、25000或50000 ppm的飼料，連續(xù)給藥103周。在給藥15個月后進行中期評估，50000 ppm組雌性小鼠出現(xiàn)前胃增生和炎癥的發(fā)生率增加，未見其他化合物相關異常。試驗終期分析可見50000 ppm組雌性小鼠的平均體重低于對照組11%，未見與土溫80相關的臨床表現(xiàn)。給藥組雄性大鼠的存活率低于對照組（0 ppm, 29/50; 25000 ppm, 18/50; 50000 ppm, 18/50），其他組的存活率與對照組相當（雌性大鼠: 23/

13、50, 25/50, 25/50; 雄性小鼠: 33/49, 34/50, 32/50; 雌性小鼠: 30/50, 28/50, 26/50）。雄性大鼠腎上腺髓質嗜鉻細胞瘤的發(fā)生率略有升高（21/50, 19/50, 29/50）。低劑量組雄性大鼠腎上腺髓質增生發(fā)生率增加，但高劑量組未見升高（11/50, 22/50, 12/50）。雄性和雌性小鼠中未見土溫80相關的腫瘤發(fā)生率增加。高劑量組雄性和雌性小鼠前胃磷狀上皮增生和炎癥的發(fā)生率明顯增加；高劑量組雌性小鼠前胃潰瘍發(fā)生率明顯增加。    結論認為，在此試驗條件下，雄性大鼠僅見腎上腺髓質嗜鉻細胞瘤發(fā)生率增加，因此

14、，土溫80對雄性大鼠的致癌性意義不明確，而對雌性小鼠或大鼠未見致癌性。臨床安全性研究    臨床研究中比較了靜脈注射胺碘達隆對心血管系統(tǒng)的影響，提示給予5或10 mg/kg的胺碘達隆出現(xiàn)的一過性心動過速（給藥后前4分鐘），是由溶劑土溫80（10或20 mg/kg）引起的15, 16，土溫80也與左心室收縮壓降低有關。1例服用含有土溫80的完全胃腸外營養(yǎng)餐的患者出現(xiàn)超敏感應（蕁麻疹）17。討論與展望    土溫80已經在大量的經口途徑或非消化道途徑的藥物制劑中應用，對其安全性進行了較為深入的研究。研究結果顯示土溫80具有較寬的安全窗，妊娠家兔靜脈注射給予含有土溫80 187.5 mg/kg可導致明顯的母體毒性，對胎仔體重有一定的影響，當劑量小于等于62.5 mg/kg時未見影響。單次給藥時，劑量為80（猴）、56（大鼠）或188（家兔）mg/kg時，未見明顯毒性指征。犬對土溫80十分敏感，可產生明顯的組胺反應，因此犬可能不適合于含有土溫80制劑的安全性研究，特別是注射制劑