1、會計學1學高考生物大一輪復習生物技術實踐第學高考生物大一輪復習生物技術實踐第講微生物的利用講微生物的利用考綱要求考綱要求1.微生物的分離和培養。2.某種微生物數量的測定。3.培養基對微生物的選擇作用。考點一微生物的實驗室培養考點二微生物的篩選和計數矯正易錯強記長句重溫高考 演練模擬內容索引課時作業微生物的實驗室培養考點一1.培養基培養基(1)概念：人們按照微生物對 的不同需求，配制出供其 的營養基質。(2)營養組成：一般都含有 和無機鹽。此外，還需要滿足微生物生長對 、 以及氧氣的要求。(3)種類按照物理性質可分為 培養基、固體培養基、半固體培養基。按照成分的來源可分為天然培養基和 培養基。按

2、照功能用途可分為選擇培養基、 培養基等。知識梳理生長繁殖營養物質水、碳源、氮源pH特殊營養物質液體合成鑒別選擇培養基與鑒別培養基的比較選擇培養基與鑒別培養基的比較歸納歸納提升提升種類原理用途舉例選擇培養基依據某些微生物對某些物質或環境條件的嗜好、抗性而設計從眾多微生物中分離所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養基依據微生物產生的某種代謝產物與培養基中的特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計鑒別不同種類的微生物伊紅美藍培養基可以鑒別大腸桿菌2.無菌技術無菌技術(1)含義：在培養微生物的操作中，所有防止 的方法。(2)常用方法雜菌污染化學藥劑消毒法外來雜菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌

3、項目條件結果常用方法應用范圍消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源滅菌強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法 玻璃器皿、金屬工具高壓蒸汽滅菌法培養基及容器的滅菌消毒和滅菌的辨析消毒和滅菌的辨析歸納歸納提升提升計算_溶化調pH_3.大腸桿菌的純化培養大腸桿菌的純化培養(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養基_(2)純化大腸桿菌的方法平板劃線法：通過接種環在瓊脂固體培養基表面_的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。稀釋涂布平板

4、法：將菌液進行一系列的_，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。稱量滅菌倒平板梯度稀釋連續劃線(3)菌種的保存方法對于頻繁使用的菌種，可以采用 的方法。對于需要長期保存的菌種，可以采用 的方法。臨時保藏甘油管藏判斷關于微生物培養技術的敘述(1)培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，有時還需要加入一些特殊的物質( )(2)倒平板時，應將打開的皿蓋放到一邊，以免培養基濺到皿蓋上( )(3)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害( )常考基礎診斷常考基礎診斷(4)為了防止污染，接種環經火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落( )(5)用稀釋涂布平板法純化大腸桿

5、菌時，只要稀釋度足夠高，就能在培養基表面形成單個菌落( )如圖是采用純化微生物培養的兩種接種方法接種后培養的效果圖，請分析：提示教材熱點拓展教材熱點拓展提示提示獲得效果A的接種方法為稀釋涂布平板法，獲得效果B的接種方法為平板劃線法。(1)獲得圖A效果和圖B效果的接種方法分別是什么？(2)某同學在純化土壤中的細菌時，發現培養基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？應當怎樣操作才可避免此種現象？提示提示提示最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時在劃下一區域前未將接種環灼燒滅菌；采取的措施是增大稀釋倍數或每次劃新區域前先將接種環灼燒滅菌。(3)接種操作為什么一定要在火焰附近進行？提示提示火焰附近存在著

6、無菌區域。A.從物理性質看該培養基屬于液體培養基，從用途看該培養基屬于選擇 培養基B.該培養基中屬于碳源的物質主要是葡萄糖，屬于氮源的物質是蛋白胨C.該培養基缺少提供生長因子的物質D.該培養基調節合適的pH后就可以接種使用命題點一微生物的培養和無菌技術分析命題點一微生物的培養和無菌技術分析1.下表為某培養基的配方，下列敘述正確的是命題探究答案解析成分 蛋白胨 葡萄糖 K2HPO4伊紅美藍蒸餾水含量10 g10 g2 g0.4 g 0.065 g1 000 mL解析解析分析表中成分可知，該培養基中沒有凝固劑，為液體培養基，該培養基的營養成分齊全，但存在伊紅、美藍等鑒別物質，屬于鑒別培養基，A項錯

7、誤；該培養基中的蛋白胨既是唯一的氮源，也是碳源，而葡萄糖是絕大多數生物最常利用的碳源，B項正確；該培養基中存在的無機鹽和蛋白胨中的某些物質可以看作是生長因子，C項錯誤；培養基調節完pH還要進行滅菌等操作后才能使用，D項錯誤。2.(2018柳州模擬)微生物培養過程中，要十分重視無菌操作。現代生物學實驗中的許多方面也要進行無菌操作，防止雜菌污染。請分析下列操作中錯誤的是煮沸消毒可以殺死微生物的營養細胞和部分芽孢接種操作要在酒精燈火焰附近進行無菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進行消毒家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進行滅菌培養基要進行高壓蒸汽滅菌加入培養基中的指示劑和染料不需要滅菌A. B.C. D.解

8、析答案解析解析無菌操作包括消毒和滅菌。需進行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等，需進行滅菌的有器皿、培養基、添加劑(指示劑或染色劑)等。煮沸可以殺死微生物的營養細胞和一部分芽孢，屬于消毒；為防止空氣中雜菌污染，接種操作要在酒精燈火焰附近進行；家庭制作葡萄酒時所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能滅菌；培養基常進行高壓蒸汽滅菌。故操作錯誤。3.高溫淀粉酶在大規模工業生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選出了能高效生產高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。請據圖回答下列問題：(1)號培養基從物理狀態來看，屬于固體培養基，配制時要加入_作為凝固劑，從用途來看屬于選擇培養基，應以_作為

9、唯一碳源。解析答案淀粉瓊脂解析解析固體培養基通常加入瓊脂作為凝固劑。本實驗的目的是獲得產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，故其選擇培養基中應以淀粉作為唯一碳源。(2)配制固體培養基的基本步驟是A.計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B.計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C.計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D.計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板解析答案解析解析配制固體培養基的基本步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(3)溶化時，燒杯中加入瓊脂后要不停地_，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養基滅菌的方法一般為_。答案高壓蒸汽滅菌攪拌解析解析解析配制培養基加熱溶化時，要注意加入瓊脂后要不斷攪拌，防止瓊脂糊底。對培養基的滅菌一般

10、采用高壓蒸汽滅菌法。(4)過程是_，過程所使用的接種方法是_法。答案涂布平板稀釋解析解析解析仔細觀察題圖可知過程，是菌液稀釋過程，是采用涂布平板法接種。(5)部分嗜熱菌在號培養基上生長時可釋放_分解培養基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，挑選相應的菌落，接種到號培養基進一步分離純化后，再對菌種進行_培養。答案擴大淀粉酶解析解析解析能產生淀粉酶的部分細菌能分解利用淀粉，其菌落周圍會出現透明圈，取這樣的菌落再分離純化可獲得相應菌種，以后可以對菌種進行擴大培養用于生產。歸納歸納整合整合1.培養基的配制原則培養基的配制原則(1)目的要明確：配制時應根據微生物的種類、培養目的等確定配制的培養基種類。(2)

11、營養要協調：注意各種營養物質的濃度和比例。(3)pH要適宜：細菌為6.57.5，放線菌為7.58.5，真菌為5.06.0，培養不同微生物所需的pH不同。2.微生物對主要營養物質的需求特點微生物對主要營養物質的需求特點(1)自養型微生物所需的主要營養物質是無機鹽，碳源可來自大氣中的CO2，氮源可由含氮無機鹽提供。(2)異養型微生物所需的營養物質主要是有機物，即碳源必須由含碳有機物提供，氮源也主要是由有機物提供，部分異養型微生物也可以利用無機氮源。下列敘述中錯誤的是A.甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才 能取菌液B.對于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數僅為102， 則所得的菌落不一定是由單一的細胞

12、或孢子繁殖而成C.乙培養皿中所得的菌落都符合要求D.乙中的連續劃線的起點是上一次劃線的末端命題點二大腸桿菌的純化方法及過程分析命題點二大腸桿菌的純化方法及過程分析4.右圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法的操作結果。答案解析解析解析灼燒后的涂布器如果沒有冷卻就接觸菌種，會將菌體殺死，A項正確；稀釋倍數過低會導致多個菌體聚集在一起繁殖成菌落，B項正確；平板劃線法中最后一次劃線的末端處形成的菌落才是由單一的細胞或孢子繁殖而成，這種菌落才符合要求，C項錯誤；連續劃線中，除了第一次劃線外，每一次劃線的起點是上一次劃線的末端，目的是使得菌體的密度越來越小，保證最后劃線末端處的菌落是由單一的

13、細胞或孢子繁殖而成的，D項正確。5.牛奶是微生物培養的良好培養基，牛奶在飲用前都要經過巴氏消毒，以殺死有害微生物，為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況，做如圖1所示操作。用無菌吸管從錐形瓶中吸取1 mL生牛奶稀釋液至盛有9 mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復2次。請回答下列有關問題：(1)巴氏消毒的方法是_，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是_。解析答案牛奶的營養成分不被破壞在7075 煮30 min(或在80 煮15 min)解析解析巴氏消毒的方法是在7075 煮30 min或在80 煮15 min，可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營養成分不被破壞。(2)取最終的牛奶稀釋液0.

14、1 mL滴在培養基上進行涂布，應選擇的涂布工具是圖2中的_。解析答案B解析解析涂布使用的工具是涂布器，圖B正確。(3)圖1中所示方法為稀釋涂布平板法，理想情況下，培養一段時間后可在培養基表面形成菌落。若用該方法培養設置了3個培養皿，菌落數分別為35個、33個、34個，則可以推測生牛奶中每毫升含細菌數為_個，運用這種方法統計的結果往往較實際值_(填“偏大”或“偏小”)，原因是_。解析答案3.4106偏小個別菌落可能是由2個或多個細菌形成的解析解析菌落的平均數是34個，生牛奶中每毫升含細菌數菌落平均數/涂布量稀釋倍數34個/0.1mL1043.4106個/mL。在統計菌落時，當兩個或多個菌落連在一

15、起時，平板上觀察到的只是單個菌落，所以運用這種方法統計的結果往往比實際值偏小。(4)消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數量，則在操作步驟上應做什么改動？_。答案減少稀釋次數解析解析解析由于消毒后牛奶中絕大部分細菌被殺死，所以可減少稀釋次數。(5)從生牛奶取樣培養得到的菌落中混有各種雜菌，從中檢測出大腸桿菌的方法是在培養基中加入_，菌落具有_特征的可以認定為大腸桿菌。(金屬光澤的紫)黑色伊紅美藍解析解析大腸桿菌的代謝產物會使伊紅美藍鑒別培養基出現金屬光澤的紫黑色。微生物的篩選和計數考點二1.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(1

16、)分離原理：土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成 ，這種物質在把尿素分解成無機物的過程中起到 作用。知識梳理催化脲酶(2)統計菌落數目一般用 法。統計菌落數目時，培養基表面生長的1個菌落，來源于樣品稀釋液中 個活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在 的平板進行計數。從平板上的菌落數推測出每克樣品中的菌落數的計算方法_。利用稀釋涂布平板法成功統計菌落數目的關鍵是恰當的 。(3)實驗流程：土壤取樣 微生物的培養與觀察細菌的計數。稀釋涂布平板303001稀釋度(平均菌落數涂布的稀釋液體積)稀釋倍數樣品的稀釋知識知識拓展拓展用顯微鏡直接計數法計數：血細胞計數板法用顯微鏡直接計數法計數：血細

17、胞計數板法結構：常用的是1 mm1 mm0.1 mm方格的計數板(如圖)。每個計數板上有兩個計數室，每個計數室上刻有9個大方格，其中只有中間的大方格為計數室，大方格的長和寬各為1 mm，深度為0.1 mm，其容積為0.1 mm3；大方格內分為25個中方格，每一中方格又分為16個小方格，即大方格是由400個小方格組成的。操作：在清潔干燥的血細胞計數板的計數室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的菌液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養液自行緩緩滲入，充滿計數室。計數：在顯微鏡下計數45個中方格內的菌體數，求出每個小方格所含有的細菌的平均數，按照以下公式計算：每毫升原液含有的菌數每小方格平均細菌數400104

18、原液被稀釋倍數。2.分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離(1)纖維素酶組成：纖維素酶是一種_，一般認為它至少包括三種組分，即_ 。作用纖維素 _ _復合酶C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖(2)纖維素分解菌的篩選原理纖維素分解菌篩選方法： 染色法，即通過是否產生 來篩選纖維素分解菌。培養基：以 為唯一碳源的選擇培養基。 紅色消失，出現 。紅色復合物透明圈剛果紅透明圈纖維素實驗流程土壤取樣：富含 的環境選擇培養：用 培養，以增加纖維素分解菌的濃度 ：制備系列稀釋液涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養基上挑選產生 的菌落纖維素選擇培養基梯度稀釋透明圈(1)選擇培養基可以鑒

19、定某種微生物的種類( )(2)對細菌進行計數只能采用稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線法( )(3)篩選能分解尿素的細菌所利用的培養基中，尿素是唯一的氮源( )(4)分解尿素的細菌在分解尿素時，可以將尿素轉化為氨，使得培養基的酸堿度降低( )(5)剛果紅可以與纖維素形成透明復合物，所以可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌( )常考基礎診斷常考基礎診斷研究人員在剛果紅培養基平板上，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落如圖1所示，將篩選到的纖維素酶高產菌株J1和J4在不同的溫度和pH條件下進行發酵，測得發酵液中酶活性的結果如圖2，請分析：教材熱點拓展教材熱點拓展提示提示剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物

20、，但并不與纖維素降解產物纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。細菌分泌的纖維素酶能將培養基中的纖維素降解成纖維二糖和葡萄糖，形成透明圈。提示(1)透明圈是如何形成的？(2)圖中透明圈大小代表什么？降解纖維素能力最強的菌株是哪種？提示提示透明圈大小與纖維素酶的量和活性有關，降解纖維素能力最強的是菌株。(3)結合圖2推測哪種菌株更適合用于人工瘤胃發酵？提示提示J4菌株在較高溫度和酸性環境下酶的活性更高，更適合用于人工瘤胃發酵。提示命題點一選擇培養基成分及配制方法的分析命題點一選擇培養基成分及配制方法的分析1.選擇培養基是根據某一種或某一類微生物的特殊營養要求或對一些物理、化學抗性而設計的培養基。利用這種培

21、養基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。為選擇酵母菌和硝化細菌，應選用的培養基分別為A.伊紅美藍培養基、含青霉素的培養基B.含青霉素的培養基、含氨的無機培養基C.含氨的無機培養基、含青霉素的培養基D.含青霉素的培養基、伊紅美藍培養基命題探究答案解析解析解析酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培養基進行選擇培養，因為青霉素抑制細菌生長，但不能抑制真菌生長。硝化細菌為自養型生物，能夠利用氨轉變為亞硝酸和硝酸過程所釋放的能量，把無機物轉變為有機物以維持自身生命活動，利用含氨的無機培養基可進行硝化細菌的選擇培養。2.苯酚是工業生產排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產生的

22、廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，為土壤樣品。請據圖回答下列問題：(1)中培養目的菌株的選擇培養基中應加入_作為碳源，中不同濃度碳源的培養基_(填“影響”或“不影響”)細菌的數量，如果要測定中活細菌數量，常采用_法。稀釋涂布平板苯酚影響答案解析解析解析選擇降解利用苯酚的細菌的培養基是以苯酚為唯一碳源的培養基；苯酚是唯一的碳源，當苯酚消耗盡時，菌株因缺少碳源而不能繼續繁殖，所以中不同濃度的碳源會影響細菌數量；一般采用稀釋涂布平板法來測定中活菌數目。(2)為對照，微生物在中不生長，在中生長，與培養基的主要區別在于_；

23、使用_法可以在上獲得單菌落。采用固體平板培養細菌時進行倒置培養的原因是_。答案解析的培養基中沒有加入苯酚作為碳源，的培養基中加入了苯稀釋涂布平板法或平板劃線酚作為碳源水珠滴落在培養基上污染培養基防止冷凝后形成的解析解析與培養基的主要區別在于的培養基中沒有加入苯酚作為碳源，的培養基中加入了苯酚作為碳源；使用稀釋涂布平板法或平板劃線法可以在上獲得單菌落。采用固體平板培養細菌時要倒置培養，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基。(3)實驗過程中如何防止其他微生物的污染？_。答案解析菌，接種過程進行無菌操作培養基滅菌，接種環境滅解析解析從制備培養基到接種與培養等全部實驗過程要無菌操作：無菌操作

24、泛指在培養微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。獲得純凈培養物的關鍵是防止外來雜菌的入侵：a.實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒；b.將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等進行滅菌；c.為避免周圍環境中微生物污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；d.實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。規律規律方法方法選擇培養基的制作方法選擇培養基的制作方法(1)在培養基全部營養成分具備的前提下，加入物質：依據某些微生物對某些物質的抗性，在培養基中加入某些物質，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，如培養基中加入高濃度食鹽時可抑制多種細菌的生長，但不影響金黃

25、色葡萄球菌的生長，從而可將該菌分離出來；而在培養基中加入青霉素時可抑制細菌、放線菌的生長，從而分離得到酵母菌和霉菌。(2)通過改變培養基的營養成分達到分離微生物的目的：培養基中缺乏氮源時，可分離自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而無法生存；培養基中若缺乏有機碳源則異養微生物無法生存，而自養微生物可利用空氣中的CO2制造有機物生存。(3)利用培養基的特定化學成分分離特定微生物：如當石油是唯一碳源時，可抑制不能利用石油的微生物生長，使能夠利用石油的微生物生長，從而分離出能消除石油污染的微生物。(4)通過某些特殊環境分離微生物：如在高鹽環境中可分離耐鹽菌，其他菌在鹽濃度高時易失水而不能生存；

26、在高溫環境中可分離得到耐高溫的微生物，其他微生物在高溫環境中因酶失活而無法生存。命題點二微生物的分離與計數命題點二微生物的分離與計數3.(2014新課標，39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成_。答案纖維二糖 葡萄糖解析解析解析纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)在含纖維素的培養基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成_色復合物。用含有CR的該種培養基

27、培養纖維素分解菌時，培養基上會出現以該菌的菌落為中心的_。答案紅解析解析解析剛果紅是一種染料，可以與培養基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物就無法形成，培養基中就會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。透明圈(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養基(成分見下表)： 酵母膏 無機鹽 淀粉 纖維素粉瓊脂CR溶液水培養基甲培養基乙注：注：“”表示有，“”表示無。據表判斷，培養基甲_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養基乙_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別

28、纖維素分解菌，原因是_。液體培養基不能用于分離單菌落不能形成CR纖維素紅色復合物，即使出現單菌落也不能確定其為纖維素分解菌不能培養基中沒有纖維素，不會答案解析解析解析纖維素分解菌的選擇培養基為液體培養基，而用于分離和鑒別纖維素分解菌的培養基為固體培養基，并且培養基中需含有纖維素，才能與CR形成紅色復合物，有纖維素分解菌時才能形成以纖維素分解菌為中心的透明圈。4.為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作。回答下列問題：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌的含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是_；答

29、案檢測培養基平板滅菌是否合格解析解析解析在涂布接種前，隨機選取若干滅菌后的空白平板先行培養一段時間，目的是檢測培養基平板滅菌是否合格。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環需通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_。答案將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落灼燒解析解析解析用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，接種環需通過灼燒滅菌，在第二次及以后的劃線時，應從上一次劃線末端開始劃線，目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)示意圖A和B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養后得到的結果。答案B解析解析解析稀釋涂布平板法接種培

30、養后得到的結果應為圖B。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養基中并混勻，一部分進行靜置培養，另一部分進行振蕩培養。結果發現：振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養能提高培養液中_的含量，同時可使菌體與培養液充分接觸，提高_的利用率。答案營養物質溶解氧解析解析解析振蕩可以使細菌分散，更有利于細菌利用培養液中的營養物質，并且可以使培養液中的溶解氧增多。比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法關鍵操作接種環在固體平板培養基表面連續劃線一系列的梯度稀釋涂布平板法操作注意事項每次劃線前后均需灼燒接種環稀釋度要足夠高，為確保實驗成功可以增加稀釋度的范圍菌體獲取在具有顯著菌落特征的區域的

31、菌落中挑取菌體從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優點可以根據菌落的特點獲得某種微生物的單細胞菌落既可以獲得單細胞菌落，又能對微生物進行計數缺點不能對微生物計數操作復雜，需要涂布多個平板歸納歸納總結總結兩種純化細菌方法的辨析兩種純化細菌方法的辨析矯正易錯強記長句1.灼燒接種環，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。2.劃線時最后一區不要與第一區相連。3.劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養基劃破。4.用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低 ，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。5.尿素分解菌和纖維素分解菌的分離都運用了選擇培養基，前者所用的培養

32、基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培養基中纖維素是唯一的碳源。易錯警示突破選擇題下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請回答相關問題：長句應答突破簡答題1.圖甲是利用平板劃線平板劃線法進行微生物接種，圖乙是利用稀釋涂布平板稀釋涂布平板法進行微生物接種。對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是灼燒灼燒滅菌和酒精酒精消毒。2.接種操作要在火焰附近進行的原因是火焰附近存在著無菌區域火焰附近存在著無菌區域。3.接種后，在固體培養基上培養細菌時進行倒置培養的目的是防止冷凝防止冷凝后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基。重溫高考 演練模擬答案解析1.(2017全國，37)

33、某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題：(1)有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生_。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物CO2作為碳源，原因是_，但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是_(答出兩點即可)。123提供能量，為其他有機物的合成提供原料脲酶分解尿素的細菌是異養型生物，不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動解析解析細菌分解尿素是由于細菌體內能合成脲酶，尿素是有機物，分解尿素的細菌是分解者，屬于異養型生物，因此不能利用CO2作為碳源合成有機物。葡萄糖通常既作為碳源，也作為能源。132答案(2)為了篩選可分解尿素的細菌，

34、在配制培養基時，應選擇_ (填“尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。123 其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用尿素解析解析解析篩選分解尿素的細菌，通常只能用尿素作為唯一氮源，“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”均含有無機氮源NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用。答案(3)用來篩選分解尿素細菌的培養基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_(答出兩點即可)。123為細菌生長提供無機營養，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩定解析

35、解析解析KH2PO4和Na2HPO4可為微生物提供P元素和無機鹽離子如鉀離子和鈉離子，還可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩定。2.(2016全國，39)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：配制培養基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；制作無菌平板；設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作；將各組平板置于37 恒溫箱中培養一段時間，統計各組平板上菌落的平均數。132回答下列問題：(1)該培養基中微生物所需的氮來源于_。若要完成步驟，該培養基中的成分X通常是_。(2)步驟

36、中，實驗組的操作是_。132牛肉膏、蛋白胨瓊脂將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間解析解析牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質的水解產物，都可以作為氮源；平板為固體培養基，故需要加入凝固劑瓊脂。解析解析實驗探究的是教室內“不同高度空氣”中微生物的分布，其中變量為不同高度，故需在不同高度下放置開蓋平板。同時，為了保證單一變量，需要保證開蓋放置時間一致。為了保證實驗可靠性，需要設置多個平行組。答案解析答案(3)若在某次調查中，某一實驗組平板上菌落平均數為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現了6個菌落，這種結果說明在此次調查中出現了_現象。若將30(即366)個/平板作為本組菌

37、落數的平均值，該做法_(填“正確”或“不正確”)。132不正確污染解析解析解析在完全正確的操作情況下，空白對照組中不應出現菌落。若出現菌落，表明操作過程中存在雜菌污染，屬于實驗失誤，所有實驗數據均不應采用。答案3.(2016四川，10)圖甲是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉錄的mRNA部分序列。(1)圖中選擇培養基應以_為唯一氮源；鑒別培養基還需添加_作指示劑，產脲酶細菌在該培養基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成_色。解析132尿素紅酚紅解析解析脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養基應以尿素作為唯一氮源。由于尿素被分解成了氨，氨會使培養基的堿性增強，pH升高，使酚紅

38、指示劑變成紅色。132答案(2)在5個細菌培養基平板上，均接種稀釋倍數為105的土壤樣品液0.1 mL，培養一段時間后，平板上長出的細菌菌落數分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是_，每克土壤樣品中的細菌數量為_108個；與血細胞計數板計數法相比，此計數方法測得的細菌數較_。解析132少稀釋涂布平板法1.75解析解析用于計數細菌菌落數的接種方法是稀釋涂布平板法，統計的菌落數應介于30300之間，故選擇細菌菌落數為156、178和191的平板計數，每克土壤樣品中的細菌數為(156178191)30.11051.75108個。由于兩個或多個細菌連接在一起時，往往統計的是

39、一個菌落，故用此方法測得的細菌數偏少。132答案(3)現有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸，使圖乙序列中出現終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉錄的mRNA中，終止密碼為_，突變基因表達的蛋白質含_個氨基酸。解析132115UGA解析解析密碼子由三個相鄰的堿基組成，271個堿基和后面2個堿基一起共構成91個密碼子，箭頭處插入的70個核苷酸和后面2個堿基一起共構成24個密碼子，緊隨其后是UGA，為終止密碼子，因此表達的蛋白質含115個氨基酸。132課時作業答案解析1.高中生物學實驗中，在接種時不進行嚴格無菌操作對實驗

40、結果影響最大的一項是A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C.將轉基因植物葉片接種到無菌培養基上D.將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養基上12345678910解析解析在釀制葡萄酒的過程中，如果滅菌不徹底會影響葡萄酒的品質，但影響不大；在制作腐乳的過程中，發酵過程有多種微生物的參與，所以該過程不進行嚴格的無菌操作對結果影響不大；在植物組織培養過程中，如果滅菌不徹底，雜菌產生的物質會影響外植體的生長，甚至殺死外植體，導致培養失敗，對結果影響最大；土壤浸出液本身就含有大量的雜菌，另外在選擇培養基上只能生存我們所要篩選的細菌，所以無菌操作不嚴格，對結果影響也不會太大

41、。123456789102.(2017張家口檢測)下列有關微生物培養與應用的說法，正確的是A.天然培養基是指直接取自自然界不需加工的培養基B.接種前需對培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手等進行嚴格的 滅菌處理C.大腸桿菌的純化培養過程包括培養基的配制和純化大腸桿菌兩個階段D.分離分解尿素的細菌時，尿素是培養基中唯一的氮源和碳源答案解析12345678910解析解析天然培養基是指用天然物質制成的培養基，但也需要加工，A項錯誤；實驗操作者的雙手應消毒，不是滅菌，B項錯誤；分離分解尿素的細菌時，尿素是培養基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有機物(如葡萄糖)作為碳源，D項錯誤。1234

42、5678910答案解析3.下面是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為1、2、3、4、5。下列敘述正確的是A.在五個區域中劃線前后都要對接種環和培養基進行滅菌B.劃線操作時完全打開皿蓋，劃完立即蓋上C.接種時不能劃破培養基，否則難以達到分離單菌落的目的D.第1區和第5區的劃線最終要連接起來，以便比較前后的菌落數12345678910解析解析在每次劃線前后都要對接種環進行滅菌，但不能對培養基進行滅菌；進行劃線操作時，左手將培養皿的皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋；注意接種時不能劃破培養基，否則難以達到分離單菌落的目的；第1區和第5區的劃線不能相連。1

43、2345678910答案解析4.(2018吉林模擬)下面關于土壤中分解尿素的細菌的分離與計數的敘述中，正確的是A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B.篩選分解尿素的細菌時，應以尿素作為培養基中唯一的營養物質C.統計樣品中的活菌數目一般用平板劃線法D.在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍，則 表明篩選到了分解尿素的細菌12345678910解析解析只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A項正確；篩選分解尿素的細菌的實驗中，采用的是以尿素為唯一氮源的培養基，B項錯誤；統計樣品中的活菌數目一般用稀釋涂布平板法，C項錯誤；在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑，培養某種細菌后，

44、如果pH升高，指示劑變紅，這樣就能初步鑒定該種細菌能夠分解尿素，D項錯誤。12345678910答案解析5.某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是A.培養基分裝到培養皿后進行滅菌B.轉換劃線角度后需灼燒接種環再進行劃線C.接種后的培養皿須放在光照培養箱中培養D.培養過程中每隔一周觀察一次12345678910解析解析培養基滅菌后再分裝到培養皿中，A項錯誤；轉換劃線角度后要灼燒接種環，冷卻后再從上次劃線的末端開始進行劃線，B項正確；接種后的培養皿必須放在恒溫箱中進行培養，C項錯誤；培養過程中一般每隔12 h或24 h觀察一次，D項錯誤。123456789106.在農業生產

45、研究上，常需要進行微生物的分離和計數。(1)下表為兩種微生物的培養基配方：A組B組KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖 尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g 15.0 g纖維素粉NaNO3Na2HPO47H2O KH2PO4MgSO47H2O KCl 酵母膏水解酪素5 g1 g1.2 g0.9 g0.5 g0.5 g0.5 g0.5 g注：注：上述兩種培養基中的物質溶解后，均用蒸餾水定容至1 000 mL。12345678910從功能上來看，上述兩種培養基均屬于_培養基。如果要對土壤中分解尿素的細菌進行分離，則需要選擇_(填“A”或“B”)培養基，該培養基

46、中的碳源是_。在分離尿素分解菌所用的培養基中可加入_指示劑，根據指示劑的顏色可鑒定某種細菌能否分解尿素，若有分解尿素的細菌，培養基將會呈現_。選擇A葡萄糖紅色酚紅答案解析12345678910解析解析據題表中的培養基的配方分析可知，A組中的氮源為尿素，是篩選尿素分解菌的選擇培養基。B組中的碳源是纖維素，是篩選纖維素分解菌的選擇培養基。對土壤中分解尿素的細菌進行分離時，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，故應當選擇A組培養基，該培養基中的碳源是葡萄糖。尿素分解菌可以用酚紅指示劑進行鑒定。尿素分解菌產生的脲酶能夠將尿素分解為氨而使pH升高，使酚紅指示劑呈紅色。12345678910(2)下圖是某

47、同學采用的接種微生物的方法，請回答下列問題：本實驗采用的接種微生物的方法是_法，把聚集的菌種逐步_分散到培養基的表面，為達到這一目的，操作上應注意：_ (至少答2項)。平板劃線前要灼燒接種環；冷卻后從上一次劃線的末端開始劃線稀釋每次劃線答案12345678910解析解析解析據圖分析可知，圖示表示平板劃線法接種，是把聚集的菌種逐步稀釋到培養基的表面，操作上應注意每次劃線前要灼燒接種環；冷卻后從上一次劃線的末端開始劃線。12345678910三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數量，在對應稀釋倍數為106的培養基中，得到以下統計結果：甲同學涂布了兩個平板，統計的菌落數是236和260，取

48、平均值248；乙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是210、240和250，取平均值233；丙同學涂布了三個平板，統計的菌落數是21、212和256，取平均值163；在三位同學的統計中，_同學的統計是正確的。乙答案解析12345678910解析解析在進行平板菌落計數時，應選擇菌落數在30300之間的平板，同時為減小誤差應選擇至少3個或3個以上的平板進行計數并取平均值，在三位同學的統計中，乙同學的統計是正確的。答案解析7.大腸桿菌是與我們日常生活聯系非常密切的細菌，請回答有關檢測飲用水中大腸桿菌的問題：(1)檢測飲用水中大腸桿菌的含量時，通常將樣品進行一系列的梯度稀釋，將不同稀釋度的水樣用涂布器分

49、別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養，然后記錄菌落數，這種方法稱為_。判斷下面所示的4個菌落分布圖中，不可能是用該方法得到的是_。D稀釋涂布平板法12345678910解析解析D中菌落分布情況為平板劃線法所得。為判斷培養基是否被雜菌污染(滅菌是否合格)，本實驗需要設置對照組。可將未接種的培養基在適宜的溫度條件下放置一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生，若發現有菌落說明培養基已被污染。消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。對培養基和培養器皿進行滅菌處理，對操作者的雙手需要進行清洗

50、和用酒精消毒。12345678910答案(2)用上述方法統計樣本中菌落數時是否需要設置對照組？_(填“需要”或“不需要”)，其原因是需要判斷培養基_，對于固體培養基應采用的檢測方法是將_的培養基在適宜的溫度下放置一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生。是否被雜菌污染(滅菌是需要未接種否合格)(3)在微生物培養操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養基和培養器皿進行_(填“消毒”或“滅菌”)處理；操作者的雙手需要進行清洗和_；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使其內蛋白質變性，還能損傷它的_結構。DNA滅菌消毒(4)檢測大腸桿菌實驗結束后，使用過的培養基及其培養物必須經過_處理才能丟棄，

51、以防止培養物的擴散。滅菌123456789108.某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題：12345678910答案(1)培養基中加入化合物A的目的是_，這種培養基屬于_培養基。選擇篩選目的菌解析解析解析在選擇培養基中加入特定物質，可以篩選出特定的細菌。12345678910答案(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養基中的_。實驗需要振蕩培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是_。異養需氧型化合物A解析解析解析根據題目所給的培養

52、基配方，“目的菌”生長所需的氮源和碳源只能來自培養基中的化合物A。異養需氧型細菌在培養時需要振蕩。12345678910答案(3)在上述實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關鍵是_。菌入侵防止外來雜(4)轉為固體培養基時，常采用平板劃線的方法進行接種，此過程中所用的接種工具是_，操作時采用_滅菌的方法。灼燒接種環解析解析解析獲得純凈“目的菌”的關鍵是防止外來雜菌入侵。解析解析用平板劃線的方法進行接種，所使用的接種工具是接種環，操作時一般采用灼燒滅菌。123456789109.現在國家大力提倡無紙化辦公，但是每年仍然不可避免地產生大量廢紙，其主要成分是木質纖維，人類正努力將其轉化為一種新的資源乙

53、醇。下圖是工業上利用微生物分解纖維素生產乙醇的基本工藝流程，請回答相關問題：(1)將從土壤中獲得的微生物培養在以_為唯一碳源的培養基上。純化菌種時，為了得到單一菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。答案解析稀釋涂布平板法纖維素平板劃線法12345678910解析解析要從土壤中獲得能分解纖維素的微生物，需要將土壤中獲得的微生物培養在以纖維素為唯一碳源的培養基上。純化菌種時，常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。12345678910答案(2)若環節選擇霉爛的木頭，則環節獲得的酶中至少包括C1酶、_和_三種組分，其中能夠將纖維二糖分解為葡萄糖的是_。解析CX酶 葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶解析解析

54、環節獲得的酶為纖維素酶，是由Cl酶、CX酶、葡萄糖苷酶3種組分組成的復合酶，其中Cl酶、CX酶可將纖維素分解為纖維二糖，葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。12345678910答案(3)在含纖維素的培養基中通常加入_染料，此染料可與纖維素形成_色復合物。用含有此染料的該種培養基培養纖維素分解菌時，培養基上會出現以該菌的菌落為中心的_。我們可以通過此方法來篩選纖維素分解菌。解析透明圈剛果紅紅解析解析解析在培養基中加入剛果紅染料，可與培養基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。12345678910答案10.(2015全國，39)已知微生物A可以產生油脂，微生物B可以產生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產。回答有關問題：(1)顯微觀察時，