1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上有關(guān)物質(zhì)分析方法驗證的可接受標(biāo)準(zhǔn)簡介CDE 黃曉龍摘要：本文介紹了在對有關(guān)物質(zhì)檢查所用的分析方法進行方法學(xué)驗證時，各項指標(biāo)的可接受標(biāo)準(zhǔn)，以利于判斷該分析方法的可行性。關(guān)鍵詞：有關(guān)物質(zhì)檢查 分析方法驗證 可接收標(biāo)準(zhǔn)藥品中的有關(guān)物質(zhì)泛指在藥品的生產(chǎn)與儲存過程中產(chǎn)生的工藝雜質(zhì)或降解產(chǎn)物。由于這些有關(guān)物質(zhì)的存在會影響到藥品的純度，進而可能會產(chǎn)生毒副作用，所以有關(guān)物質(zhì)的控制是藥品研發(fā)的一個重要方面，也是我們在藥品審評中一直重點關(guān)注的要點之一。而要對有關(guān)物質(zhì)進行嚴(yán)格的控制，就離不開專屬性強、靈敏度高的分析方法，這就涉及到分析方法的篩選與驗證。從現(xiàn)有的申報資料看，藥品研發(fā)

2、單位已基本上意識到分析方法驗證的重要性，但是對驗證時各具體指標(biāo)是否可行尚沒有一個明確的可接受標(biāo)準(zhǔn)，從而難以對驗證結(jié)果進行評判。為解決這一問題，本文結(jié)合國外一些大型藥品研發(fā)企業(yè)在此方面的要求，提出了在對有關(guān)物質(zhì)檢查方法進行驗證時的可接受標(biāo)準(zhǔn)，供國內(nèi)的藥品研發(fā)單位在進行研究時參考。1準(zhǔn)確度該指標(biāo)主要是通過回收率來反映。驗證時一般要求根據(jù)有關(guān)物質(zhì)的定量限與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中該雜質(zhì)的限度分別配制三個濃度的供試品溶液各三份（例如某雜質(zhì)的限度為0.2%，則可分別配制該雜質(zhì)濃度為0.1、0.2和0.3的雜質(zhì)溶液），分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率，并計算9個回收率數(shù)據(jù)的相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）。該項目的

3、可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下的平均回收率均應(yīng)在80%-120%之間，如雜質(zhì)的濃度為定量限，則該濃度下的平均回收率可放寬至70%-130%，相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于10%。2線性線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗證方法為：在定量限至一定的濃度范圍內(nèi)配制6份濃度不同的供試液，分別測定該雜質(zhì)峰的面積，計算相應(yīng)的含量。以含量為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），進行線性回歸分析。可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.990，Y軸截距應(yīng)在100響應(yīng)值的25以內(nèi)，響應(yīng)因子的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于10%。3精密度1）重復(fù)性配制6份雜質(zhì)濃度（一般為0.1%）相同的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相

4、同的條件下進行測試，所得6份供試液含量的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于15%。2）中間精密度配制6份雜質(zhì)濃度（一般為0.1%）相同的供試品溶液，分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試，所得12個含量數(shù)據(jù)的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于20%。4專屬性可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：空白對照應(yīng)無干擾，該雜質(zhì)峰與其它峰應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。5檢測限雜質(zhì)峰與噪音峰信號的強度比應(yīng)不得小于3。6定量限雜質(zhì)峰與噪音峰信號的強度比應(yīng)不得小于10。另外，配制6份最低定量限濃度的溶液，所測6份溶液雜質(zhì)峰保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于5.0%。7耐用性分別考察流動相比例變化±5、流動相p

5、H值變化±0.2、柱溫變化±5、檢測波長變化±5nm、流速相對值變化±20以及采用三根不同批號的色譜柱進行測定時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次。可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達到基線分離；各條件下的雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對值在±0.1以內(nèi)。8、系統(tǒng)適應(yīng)性配制6份相同濃度的雜質(zhì)溶液進行分析，該雜質(zhì)峰峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于1.0%。另外，雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。9溶液穩(wěn)定性

6、按照分析方法分別配置對照品溶液與供試品溶液，平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量，然后將上述溶液分別貯存在室溫與冰箱冷藏室（4）中，在1、2、3、5和7天時分別平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量。可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：主成分的含量變化的絕對值應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對值在±0.1以內(nèi)，并不得出現(xiàn)新的大于報告限度的雜質(zhì)。我們做的時候,會把雜質(zhì)大于0.02%以上的都積分出來的.這樣,算總雜質(zhì)更可靠.而且,我們會把未知雜質(zhì)控制在0.05%以下.(可參考ICH指南要求,未知雜質(zhì)的限度要求與人體每天所攝入的量有關(guān),如我們所做的產(chǎn)品,對于歐洲來說,其單一的未知雜質(zhì)是不得過0.05%;而對于北美市場而言,則

7、只要求在0.1%以下就可以了)對于制劑而言，由于原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已對各雜質(zhì)進行了控制，在制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅控制降解產(chǎn)物，故在新制劑的雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則中規(guī)定：在制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中任一單個非特定降解產(chǎn)物的限度不得過鑒定限度（見表2）。 表2：制劑的雜質(zhì)限度報告限度最大日劑量1g>1g限度0.1%0.05%鑒定限度最大日劑量<1mg1mg-10mg>10mg-2g>2g限度1.0%或5g(取最小值)0.5%或20g(取最小值)0.2%或2mg(取最小值)0.1%質(zhì)控限度最大日劑量<10mg10mg-100mg>100mg-2g>2g限度1.0%或5g(取最小值)1.0%或5g(取最小值)1.0%或5g(取最小值)0.15“ 如果是制劑仿制藥，一般小于0.05%主峰面積的峰可以忽略的，當(dāng)然，對于重點關(guān)注的雜質(zhì)是要特別注意雜質(zhì)的變化情況的2010版中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范關(guān)于高效液相色譜法（Page86）中提到，可以以主成分的檢測限度（