1、答：當DNA傷時，其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞，在細一、 外源化合物毒性作用的影響因素可歸納哪四個方面，請舉例說明。答：化學物質(zhì)因素。機體因素、化學物與機體所處的環(huán)境條件，化學物的聯(lián)合作用（四個方面每個1 分，舉例說明2 分）二、什么是 Ames試驗，試述其原理。答：細菌回復突變實驗利用突變體的測試菌株觀察受試物能否糾正或補償突變體所攜帶的突變改變，判斷其致突變性，常用菌株為鼠傷寒沙門氏菌（ 3 分） ： 人工誘變的突變株在組氨酸操縱子中有一個突變。突變的菌株必需依賴外源性組氨酸才能成長，致突變物可使其基因發(fā)生回復突變，使它在缺乏組氨酸的培養(yǎng)基上也能生長（ 3 分） 。三、毒物興奮效應(yīng)及其生物學意義。

2、答：指某些毒物具有高劑量抑制和低劑量刺激作用的這種現(xiàn)象稱為毒物興奮效應(yīng)。改變了傳統(tǒng)的劑量反應(yīng)關(guān)系模式；改變了對毒物低劑量的認識；改變了對衛(wèi)生標準制定措施。四、什么是染色體畸變分析。答：染色體畸變分析：觀察染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)目改變稱為染色體畸變分析，方法有：缺失，除染色缺失外需作核型分析或用流式細胞儀做電腦圖像分析，關(guān)于倒位、插入、重復以及易位均需顯帶技術(shù)，對于染色體分離異常，需在染毒后經(jīng)過一次細胞分裂才能發(fā)現(xiàn)，但此時一些不穩(wěn)定的染色體畸變往往消失。五、彗星試驗的原理。胞裂解液作用下，細胞膜，核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞，細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，RNA以及其他成分均擴散到細胞裂解液中，而核DNA由于分子量太大只

3、能留在原位置，在堿性電解質(zhì)作用下，DNA發(fā)生解螺旋，損傷的 DNA斷鏈及其片段被釋放出來。由于這些DNA勺分子量太小且堿變性為單鏈，所以在電泳過程中帶負電荷的DN心離開核DNA向正極遷移形成彗星狀圖像，DNA受損越嚴重，在相同的電泳條件下遷移的DNA量就愈多，遷移的距離就愈長。通過測定DNAf移部分的光密度或遷移長度就可 以測定單個DN順傷程度，從而確定受試物的作用劑量 與DNA傷效應(yīng)的關(guān)系。六、什么是急性毒性其觀察指標可分為哪四個方面答：急性毒性是指實驗動物一次接觸或24h 內(nèi)多次接觸一定劑量的某些外源化學物短期內(nèi)嗦產(chǎn)生的健康損害作用和致死效應(yīng)。觀察指標：中毒癥狀：行動、神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)、自 主

4、神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)等。體重：隔日測量。死亡和死亡 時間。病理學檢查及其他指標。七、毒物代謝酶的基本特征有哪些試舉例說明解釋答：特異型廣泛、持續(xù)少量表達、立體選擇性、有結(jié)構(gòu)酶和誘導酶之分四個方面闡述。八、 16 世紀的瑞士醫(yī)生Paracelsus 被認為是毒理學的先驅(qū)，他曾經(jīng)說過：“ All substances are poisons,there is none which is not a poison. The rightdose differentiates a poison from a remedy. ”請說明這句話的含義，并解釋劑量、毒性。（ 5 分）參考答案：所有的物質(zhì)都是毒物，劑量將

5、其分為毒劑量是指毒物引起損害作用的暴露劑量、吸收劑量答：評分標準：遺傳學終點多樣，需要的檢測對象和靶劑量。因毒物進入機體的途徑、方式不同，所以在 暴露劑量相同情況下，最終進入機體內(nèi)的吸收劑量和靶 劑量有所不同。毒性是指毒物引起損害作用的固有能力。論述 九、化學致癌物篩檢的基本方法有哪些，請列舉并進行 簡單介紹 參考答案：（1）短期試驗：定量構(gòu)效關(guān)系，用于QSARI論預測毒物的致癌性；致突變試驗常用 AmeS式驗、微核 試驗、染色體畸變試驗、程序外DN蛤成試驗等用于驗證其致突變性；細胞惡性轉(zhuǎn)化試驗，指體外培養(yǎng)的細 胞所誘發(fā)的惡性表型改變、包括增殖速度、生長特征、 染色體畸變等變化，揭示細胞染毒后

6、的生物學變化，如 自控生長能力、接觸抑制和細胞排列紊亂或灶狀生長， 既可篩查遺傳毒性，又可篩查非遺傳毒性毒物；哺乳 動物短期致癌試驗，以癌前病灶為觀察終點，所需時間較傳統(tǒng)的致癌試驗所需時間短。（5 分 ）（ 2） 哺乳動物長期致癌試驗。（3 分 ） 是確認動物致癌物的可靠方法，在毒理學安全性評價中的地位是其他 體外試驗所不能替代的（ 3） 人群腫瘤流行病學調(diào)查。（3 分 ） 是確定人類致癌物的重要手段，許多環(huán)境致癌物都是通過人群流行病 學調(diào)查發(fā)現(xiàn)的。（ 4） 促癌劑的檢測；轉(zhuǎn)基因動物的應(yīng)用（該項可不寫介紹）十、 為什么檢查致突變物需要一組配套試驗方案在選擇一組試驗方案時應(yīng)注意哪些問題多，所以綜

7、合考慮應(yīng)配套進行試驗。（ 5 分） ；注意問題包括：陰性與陽性的判定；體外活化系統(tǒng)，方案應(yīng)包含各個遺傳終點。（ 5 分）詳細答案：沒有一種試驗能涵蓋以上所有遺傳學終點（ 1 分） ，所以需要一組試驗配套進行。化學毒物的種類和結(jié)構(gòu)多種多樣，其致突變的機制不盡相同，作用的靶細胞也不一樣，有的是體細胞，或生殖細胞，或兩者兼而有之，故在成套觀察項目中既要用體細胞檢測又要用生殖細胞（ 2 分） ； 除了從分子水平還要從細胞水平來檢測化學毒物的遺傳毒性。致突變物中僅少數(shù)具有直接致突變作用，大多數(shù)為間接致突變作用，即需要在體內(nèi)代謝活化后，才具有致突變作用（2 分） 。化學毒物的致突變性有強，也有弱；有的在某

8、一檢測系統(tǒng)中是強致突變物，而在另一系統(tǒng)中可能是弱的致突變物。對于弱致突變物在某些系統(tǒng)中比較容易漏檢，即出現(xiàn)假陰性（ 2 分） 。 通常，對于一種受試物應(yīng)當先用原核細胞或體細胞的體外試驗按遺傳學終點合理配套進行試驗，并對有陽性結(jié)果的遺傳學終點驗證其在體內(nèi)的真實性，再行選用生殖細胞致突變試驗進行遺傳危害的評價。（ 1 分）應(yīng)注意的問題：陰性和陽性對照的設(shè)立；體外試驗的活化系統(tǒng)（2 分） ；十一、 16 世紀的瑞士醫(yī)生Paracelsus 被認為是毒理學的先驅(qū)， 他曾經(jīng)說過：“ All substances are poisons,there is none which is not a poiso

9、n. The rightdose differentiates a poison from a remedy. ”請說明這句話的含義，并運用毒理學知識圍繞劑量、毒性、毒作用等從多個角度進行分析并舉例說明。（ 14 分）所有的物質(zhì)都是毒物，劑量將其分為毒物和藥物（ 2 分） 。第二階段試驗致畸作用和胚胎毒性的評定（1 分）直到分娩和哺乳結(jié)束（4 分） 。驗項目管理。本問題為開放性論述題，考察學生對毒理學相關(guān)基本概念的理解。學生首先應(yīng)明確提出劑量、毒性、毒物興奮效應(yīng)、半數(shù)致死劑量以及劑量反應(yīng)關(guān)系的定義。然后圍繞劑量舉例說明闡述影響毒作用的因素有哪些包括暴露的時間、頻率、染毒劑量、靶器官等問題綜合分

10、析。其中劑量 （ 2） 、 毒性 （ 2 分） 毒物興奮效應(yīng)（ 3 分） ，半數(shù)致死劑量（2 分）劑量與劑量反應(yīng)關(guān)系（3 分） ，靶器官 2 分，舉例3 分，闡述，條理清晰（2）十二、某工廠女工畸形兒發(fā)病率增高，工廠需對其生產(chǎn)環(huán)境進行毒理學監(jiān)測，并評價某化合物的發(fā)育毒性，該如何操作（ 15 分）答： 第一階段試驗即生育力與生殖功能試驗（ 1 分）目的是檢驗外源化學物對受孕能力和生殖功能的影響（ 1 分） 。在性成熟的雄鼠開始接觸受試物60 天后，雌鼠在接觸14 天， 并進行交配。上述接觸或可以包括全部精子發(fā)生期和排卵期。一般分為23個劑量組和一個對照組。高劑量組可引起母體輕度中毒，不能出現(xiàn)嚴重

11、中毒癥狀或10以上的死亡。低劑量組只能出現(xiàn)受試物可能引起對人體的生理預應(yīng)、藥理學治療效應(yīng)或能對組織中某些酶的活力造成一定的影響，但不應(yīng)出現(xiàn)中毒癥狀。中間劑量與高劑量和低劑量成等比級教，只能出現(xiàn)極為輕微的中毒或無任何癥狀。每組雌性動物20 只， 雄性 10 只， 最好選用兩種哺乳動物。在妊娠接觸有害環(huán)境因素， 第 14 天時， 將一半受試孕鼠處死，剖開子宮，觀察記錄黃體數(shù)、著床數(shù)和吸收胎數(shù)，并分別計算著床前死亡率和著床后死亡率。另一半孕鼠繼續(xù)接觸受試物，每組雌鼠20 只在妊娠6 至 15 日接觸受試物。自然分娩前 1 天，處死孕鼠，取出胎仔，稱重、鑒定性別并檢查內(nèi)臟和骨骼有無畸形（3 分） 。第

12、三階段試驗圍產(chǎn)期及出生后發(fā)育情況試驗（ 1 分）受孕動物在妊娠期的第15 天 開始接觸受試物，直到幼仔斷奶， 以評定受試物可能對胎仔發(fā)育后期、母體妊娠、分娩和受乳以及幼仔在新生期間存活和生長發(fā)育的影響（ 1 分） 。觀察指標有受孕率、幼仔性別比例或雌雄兩性各占幼仔總數(shù)的百分率、出生存活率、哺育成活率等。此外觀察生長指數(shù)，即雌性和雄性幼仔在出生時和出生后4、 7、 14、及21 天的平均作重。第三階段試驗還可能發(fā)現(xiàn)第二階段試驗中來被檢出的畸形，例如某些心肺畸形可在第二階段內(nèi)造成死胎，而未被檢出（ 3 分） 。十三、慢性毒性試驗設(shè)計方案的建立應(yīng)考慮哪些問題答： 1. 合理實驗設(shè)計：劑量設(shè)計是慢性毒

13、性實驗成敗的關(guān)鍵。2. 動物質(zhì)量和檢疫：按照實驗方案的要求嚴格選擇。3. 動物的飼養(yǎng)環(huán)境：動物飼養(yǎng)室的溫濕度和照明，動物喂養(yǎng)飼料和飲用水，墊料及動物飼養(yǎng)室使用的消毒劑等均與動物的健康狀況密切相關(guān)。密切觀察并對異常情況及時處理并記錄，以判斷對實驗是否影響。（ 5） 物的配制及管理：對受試物的接受、保存、 使用、留樣、 剩余供試品的廢棄、返還等進行詳細記錄和監(jiān)控，總量、 保存條件和使用過程嚴格控制。5. 實驗操作：動物中毒癥狀觀察：準確規(guī)范。動物血樣采集：注意樣本處理條件的一致性。給藥操作：熟練操作技術(shù)。體重和攝食量測定：操作統(tǒng)一，避免誤差。6. 檢測條件的控制：多次檢測，保持一致，具有可比性。7

14、. 重視實十四、化學致癌的多階段學說答：分為引發(fā)、促長、進展三個階段引發(fā)階段：化學致癌物不可逆地將正常細胞轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤細胞的起始步驟。致癌劑誘導細胞的基因突變或表觀遺傳變異，導致異常增長的單個克隆細胞生成，從而引發(fā)致癌過程。化學致癌物對靶細胞DNA產(chǎn)生損傷作用經(jīng)細胞分裂增殖固定下成為突變細胞。促長階段：單個克隆的癌細胞在一種或多種致癌物質(zhì)的不斷作用下，表型發(fā)生了改變，惡性腫瘤細胞的各種性狀得以表達的過程。進展階段：由兩性腫瘤轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒阅[瘤，并進一步衍變成更具惡性變形或具有侵襲特征的腫瘤。遺傳不穩(wěn)定性增加和惡性變化，在形態(tài)上或功能代謝和行為方面逐漸表現(xiàn)出腫瘤的特征。案例分析題1） 近日，復旦大學某

15、研究生因喝了一口宿舍“過期的飲用水”而永遠離開了人世，經(jīng)調(diào)查該飲用水被人蓄意投毒，這種毒物就是 N-二甲基亞硝胺，淺黃色油狀液體，易溶于水、醇、醚。本品遇熱分解放出氮氧化物，可致中毒。用于醫(yī)藥及食品分析研究。可經(jīng)吸入、食入、經(jīng)皮膚吸收。對眼睛、皮膚的刺激作用。攝入、吸入或經(jīng)皮膚吸收可能致死，接觸可引起肝、腎損害。可在實驗動物中人為制造肝損傷模型。較小劑量長期暴露也可能增加肝癌風險問題： （ 1）為何肝臟或腎臟容易成為某些毒物的靶器官其原因具體有哪些（5 分）2） 2） 一般腌制食品都含有亞硝酸鹽，而亞硝酸鹽在特定條件下會轉(zhuǎn)化成亞硝胺，為什么普通人使用后并未引起損害（ 5 分）答： （ 1 ）

16、因為肝腎分別為毒物吸收和排泄器官; 肝腎的血液供應(yīng)充足；肝臟存在大量的毒物代謝酶，可實現(xiàn)代謝增毒與代謝減毒；肝臟的再生能力強；毒物在肝臟與各類酶及蛋白結(jié)合，容易造成蓄積。靶器官存在可能與一下原因有關(guān)：器官在體內(nèi)的解剖位置和功能；該器官的血液供應(yīng)；具有特殊的攝入系統(tǒng)；代謝毒物的能力和活化解毒系統(tǒng)的平衡；存在特殊的酶或生化途徑；毒物與特殊的生物大分子結(jié)合；對損傷的修復能力；對特異性損傷的易感性。（ 2）外源性化合物的一般毒性和致畸作用的劑量反應(yīng)關(guān)系是有閾值的，有害效應(yīng)閾值在NOAELW LOAEL之間，普通人白服用量在 NOAELA下，所以為觀察到有害作用。而該學生的服用劑量應(yīng)在LOAELH上，根

17、據(jù)劑量效應(yīng)關(guān)系，該學生服用劑量應(yīng)超過致死劑量，即超過NOAE與有害效應(yīng)閾值，故出現(xiàn)致死后果。2. DDT是一種用作農(nóng)用殺蟲劑的有機氯農(nóng)藥，可經(jīng)皮膚吸收，是暴露中毒的典型代表，由于其在常壓時即使在12C。以下，也有一定的蒸發(fā)，所以吸入DDT蒸汽亦能引起中毒 , 還可以經(jīng)消化道進入體內(nèi)引起中毒. 該化學物吸收進入體內(nèi)后, 可隨血液分布至全身, 其主要受損部位是神經(jīng)系統(tǒng), 肝臟腎臟及心臟. 本品為脂溶性物質(zhì), 故對富含脂肪的組織具有特殊的親和力, 在人體和動物的脂肪中的畜積性極強。其損傷作用包括以下幾個方面（ 1 ）分泌亢進如流延，平滑肌痙攣如尿失禁，心血管抑制，如低血壓。（2） CNS®狀，如煩躁不安 。（3）煙堿樣癥狀， 如肌肉痙攣。 （ 4） 其他并發(fā)癥，如腦水腫（ 10 分）問題 :（1） DDT在職業(yè)循環(huán)主要是什么途徑吸收生活中主要是什么途徑吸收(2)什么叫首過效應(yīng)其對DDT在體內(nèi)的代謝產(chǎn)生什么影響(3)動物長期慢性給予 DDT后，短時間禁食(一天) 會 出現(xiàn)什么現(xiàn)象，為什么(4)如短期暴露DDT 一般情況下，體胖者與體瘦者誰 的耐受性更大，為什么答案：(1).經(jīng)皮膚，呼吸道，消化道；經(jīng)消化道。(2) . 首過效應(yīng)：外源性化學物質(zhì)經(jīng)吸收后在進入體循環(huán)之前首先經(jīng)過門靜脈循環(huán)進入肝臟，在肝臟生