1、醬油中糖精鈉的薄層色譜法測定 一、試驗目的 把握以薄層色譜法(tlc)測定醬油中糖精鈉(c6h4connaso2)含量的原理與辦法。 二、試驗原理 在酸性條件下，食品中的糖精鈉經乙醚提取、濃縮、薄層色譜分別、顯色后，與標準品比較，可實現定性與半定量分析。 三、儀器與試材 1儀器與器材 綻開槽、薄層板(10cm20cm)、玻璃噴霧器、微量注射器等。 2試劑 除特殊解釋外，試驗中所用試劑均為分析純，水為去離子水或蒸餾水。 (1)常規試劑：乙醚(不含過氧化物)、hcl、naoh、cuso45h2o、正丁醇、氨水、異丙醇、無水na2so4、無水乙醇、95乙醇、聚酰胺粉(200目)、可溶性淀粉、溴甲酚紫

2、。 (2)常規溶液：hcl溶液(1+1，體積比)、naoh溶液(40gl)、乙醇溶液(50，體積分數)、cuso4溶液(100gl，將10gcuso45h2o以水溶解并定容至100ml)、正丁醇一氨水一無水乙醇綻開劑(7+1+2，體積比)、異丙醇一氨水一無水乙醇綻開劑(7+1+2，體積比)。 (3)溴甲酚紫顯色劑(0.4gl)：稱取0.04g溴甲酚紫，以乙醇溶液溶解后，用naoh溶液調整ph為8，定容至100ml。 (4)糖精鈉標準溶液(1mgml)：取0.0851g經120干燥4h后的糖精鈉，以95乙醇溶解，移入100ml容量瓶中，再以95乙醇稀釋至刻度。 3試驗材料 23種醬油，各250m

3、l。 四、試驗步驟 1樣品提取 (1)取200ml醬油，置于100ml容量瓶中，加水至約60ml后，加20mlcuso4溶液，混勻，再加44mlnaoh溶液，加水至刻度，混勻，靜置30min，過濾。 (2)取50ml濾液置于150ml分液漏斗中，加2mihcl溶液，用30ml、20ml、20ml乙醚分三次提取，合并乙醚提取液。 (3)以5mlhcl酸化的水洗滌乙醚提取液，棄水層。乙醚層以無水na2so4脫水后，使乙醚揮發，加20ml乙醇溶解殘留物，密封保存，備用。 2薄層板的制備 (1)稱取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加約7.0ml水，研磨35min。 (2)立刻涂成0250.30

4、mm厚的10cm20cm的薄層板，室溫干燥后，在80下干燥1h。置于干燥器中保存，備用。 3測定 (1)在薄層板縱向的一端(這一端稱為下端，另一端稱為上端)2cm處，用微量注射器分離點10l、20l樣品提取液，同時點3.0l、5.0l、7.0l、10.0l糖精鈉標準溶液，各點間距大于1.0cm。 (2)將點好的薄層板放入盛有綻開劑(兩種綻開劑任選一種，綻開劑液層約0.5cm，薄層板下端朝下)并預先已達到飽和狀態的綻開槽中，綻開至l0cm左右后，取出，揮干。 (3)勻稱噴霧顯色劑于薄層板上，糖精鈉斑點顯黃色。按照樣品點和標準點的rf值舉行定性，按照斑點色彩深淺舉行半定量。 4計算 按照下式計算樣品中糖精鈉的含量： x=m0/v(v2/v1) 式中，x為樣品中糖精鈉的含量，gl；m0為測定用樣液中糖精鈉的質量，mg；v為樣品的體積，ml；v1為樣品提取液殘留物加入乙醇的體積