1、 心包積液肝炎綜合征（安卡拉病） 劉會芳 石家莊神九所 2015-12-6 一、安卡拉病的歷史與流行情況 二、主要癥狀、病變 三、我國流行株的序列與基因進化樹 四、安卡拉病在我國的暴發(fā)的原因和流行預測 四、安卡拉病的治療 五、安卡拉病的預防 一、安卡拉病的歷史與流行情況 安卡拉病簡史：它是腺病毒1群C種4亞型毒株，最初于1987年發(fā)生于巴基斯坦的安拉卡地區(qū)，俗稱為安卡拉病，后發(fā)生于中東、東北亞、南北美洲、歐洲，它與包涵體肝炎還不一樣。我國2015暴發(fā)于山東的安卡拉病已蔓延至河南、江蘇、安徽、河北、山西、陜西、遼寧、內(nèi)蒙、吉林、湖北、四川等地，兩廣單獨另發(fā)生的，這需要做相應的基因測序和比對工作。

2、在疾病流行過程中，疾病暴發(fā)程度可能減輕，死亡率也有所下降，但個別地方、個別區(qū)域疾病發(fā)生仍很嚴重。感染家禽主要是：肉雞、肉雜、蛋雞、黃雞、麻雞、土雞以及鴨、鵝、鴿等。雛禽和青年家禽發(fā)病居多，但成年家禽仍有一定比例的發(fā)病，發(fā)病比較晚的也有，如400多天山西運城某雞場的蛋雞。一般發(fā)病在1070天之間，發(fā)病最早的可見第6日齡（山東某肉雜雞場），發(fā)病晚的可見300多日齡（河北某種雞場），集中死亡時間主要在1530天之間，病程一般有20天，日均死亡率約為13%，死淘率達1030%，發(fā)病越早，則死亡率越高，如果發(fā)病期間，有流感、新城疫、大腸桿菌、沙門氏菌等病毒或細菌混合感染，則死亡率大幅增加，最近，河南許昌

3、地區(qū)某地青腳麻雞死亡率創(chuàng)下記錄，1萬只20多日齡麻雞10多天死亡9900多只，幾近全軍覆滅。一般患病雞群的排毒時間在48周左右。二、主要癥狀、病變最明顯的特征就是心包腔有黃色或淡黃色積液，液體從0.58ml不等，心包液內(nèi)有時能檢到腺病毒，也有時能檢測到細菌。 肺水腫，肝略腫大，部分雞的腎臟有尿酸鹽沉積甚至出血或胰腺出血。 一般從肝臟中容易檢測到病毒。 有時腺胃與肌胃交界處出血。心包囊中淡黃色清亮積液，肺水腫、肝臟腫脹和變色、腎臟腫大，伴有腎小管變性腫脹。在心臟和肝臟出現(xiàn)多個局灶性壞死區(qū)域，伴隨單核細胞浸潤。在肝細胞內(nèi)有嗜堿性包涵體。染片鏡檢，能看到肝細胞內(nèi)形成明顯大而近圓形的嗜堿性包涵體。在電

4、鏡下，可見細胞核內(nèi)有大量的病毒顆粒。 三、我國流行株的序列與基因進化樹我國現(xiàn)在主流行的山東莘縣毒株也屬于腺病毒I群C種4亞型流行株。腺病毒毒株圖示如下： 無囊膜，有纖突及頭部的頭節(jié)，主要是Hexon和Penton蛋白，內(nèi)部有核衣殼包裹遺傳DNA。我所已對山東流行株已分離，并進行了一些相關工作。該病毒株毒力較強，雞胚有應激現(xiàn)象，胚體及內(nèi)臟器官出血。雞胚生長變慢，比正常對照明顯小很多。 用引物在PCR儀上能較快檢測出病毒來，如果拿到純化毒株，再擴增時，病毒量會變很大。目前除山東株外，還有石家莊株和大連株等。 我們對Hexon的部分基因進行測序，基因序列已傳至美國GenBank（基因庫）上，申請?zhí)枺?/p>

5、1868443 登陸號：kt999720。從網(wǎng)站上看，這可能是中國2015年首個上傳的腺病毒I群基因序列。相關基因序列如下： LOCUS Seq1 1128 bp DNA linear VRT 03-NOV-2015DEFINITION hexon protein gene, partial cds.ACCESSION Seq1VERSIONKEYWORDS .SOURCE Gallus gallus (chicken) ORGANISM Gallus gallus Eukaryota; Metazoa; Chordata; Craniata; Vertebrata; Euteleostomi

6、; Archelosauria; Archosauria; Dinosauria; Saurischia; Theropoda; Coelurosauria; Aves; Neognathae; Galloanserae; Galliformes; Phasianidae; Phasianinae; Gallus.REFERENCE 1 (bases 1 to 1128) AUTHORS Zhu,w., Wang,h., Liu,h., Liu,j., Wang,y., Wang,c., Xu,l., Gao,y. and Song,q. TITLE Fowl aviadenovirus 4

7、isolate from ShanDong,hexon protein gene,partial cds JOURNAL UnpublishedREFERENCE 2 (bases 1 to 1128) AUTHORS Zhu,w., Wang,h., Liu,h., Liu,j., Wang,y., Wang,c., Xu,l., Gao,y. and Song,q. TITLE Direct Submission JOURNAL Submitted (04-NOV-2015) Shijiazhuang SHENJIU Animal and Poultry Disease Institute

8、, Institute, ShiJiaZhuang heping West Road No. 598, ShiJiaZhuang, HeBei 050000, ChinaCOMMENT Bankit Comment: TOTAL # OF SEQS:1. #Assembly-Data-START# Sequencing Technology : Sanger dideoxy sequencing #Assembly-Data-END#FEATURES Location/Qualifiers source 1.1128 /organism="Gallus gallus" /p

9、roviral /mol_type="genomic DNA" /isolate="liver" /host="chicken" /db_xref="taxon:9031" /country="China" /collection_date="2015" CDS 1.>1128 /note="Fowl aviadenovirus 4" /codon_start=1 /product="hexon" /translation=&qu

10、ot;TRAVLQPYCGTAYNPLAPKESMFNNWSETAPGQNVSASGQLSNV YTNTSTSKDTTAAQVTKISGVFPNPNQGPGRNPLRRVQNANTGVLGRFAKSQYNYAYG AYVKPVAADGSQSLTQTPYWIMDNTGTNYLGAVAVEDYTNSLSYPDTIVVPPPEDYDD YNIGTTRALRPNYIGFRDNFINLLYHDSGVCSGTLNSERSGMNVVVELPDRNTELSYQ YMLADMMSRHHYFALWNQAVDQYDPEVRVFSNDGYEEGAPSYAFNPEAVGAGEGYGPD LSQIKLYTNNTAANDK

11、NTAVANATTNFYFGTVPSYEIDISATQRRNFIMANIAEYLPD RYKFSISGFDATSVAPTTYEYMNKRVPLTNVVDMSRTWCAVG"BASE COUNT 262 a 388 c 283 g 195 tORIGIN 1 acgagggccg tccttcagcc ctactgcggc acggcttaca acccgctggc tcccaaggag 61 tccatgttta acaactggtc ggagacggca cccgggcaga acgtgtccgc ctccggtcag 121 ctgtccaacg tctataccaa cacga

12、gcacc tccaaagaca cgacggcggc gcaggtgacg 181 aagatttccg gcgtcttccc caatcccaac cagggacccg gaagaaatcc tctgcgacgg 241 gtacaaaacg ccaacaccgg cgtgctcggt cgcttcgcca agtctcagta caattacgct 301 tacggtgcct acgtcaagcc cgtcgccgcc gacggttccc agtccctcac gcagaccccc 361 tactggatca tggataacac gggcaccaat tacctgggag cgg

13、tggccgt cgaggactac 421 accaacagcc tctcgtaccc agataccata gtcgtgccgc ctcccgagga ctacgacgat 481 tataacatag gcaccacgcg tgcgctcagg cccaactaca tcgggttcag ggataacttc 541 attaacctgc tgtatcacga ctccggcgtg tgctcgggca ccctcaactc ggagcgttcg 601 ggcatgaacg tggtggtcga gctgcccgac cggaataccg agctcagcta ccagtacatg 6

14、61 ctggccgaca tgatgtcccg ccatcactat ttcgccctgt ggaaccaggc cgtggaccag 721 tacgaccccg aggtgcgagt cttctccaat gacggttacg aagaaggcgc gcccagctac 781 gccttcaacc ccgaagcggt aggcgcggga gaaggctacg gccccgatct cagtcaaatt 841 aaactctaca ccaacaacac cgccgcgaac gacaaaaaca ccgccgtggc taacgccact 901 accaacttct acttcg

15、gcac ggtaccctcc tacgaaatcg atatcagcgc tacccagagg 961 cgcaacttta tcatggccaa catcgccgag tatctgcccg accgttacaa gtttagcatc 1021 tccggcttcg acgccaccag cgtcgcgcct accacctacg agtacatgaa caagcgcgtc 1081 cccctcacca acgtcgtcga catgtcacga acgtggtgcg cggtgggg根據(jù)這些基因序列，進行進化樹遺傳分析，圖示如下：由此可見，病毒變化不大，在亞、美常態(tài)形存在。四、安卡拉病在

16、我國的暴發(fā)的原因和流行預測我國發(fā)病，主要是有病毒毒株基礎性存在，它最少能夠通過接觸進行水平傳播。發(fā)病的另外兩個原因，一是“種”蛋的垂直傳播問題，二是低質(zhì)量非SPF蛋做的疫苗的污染問題，一些廠家的疫苗有可能有嫌疑。檢測圖如下：隨機抽檢8個廠家產(chǎn)品，其中4個廠家產(chǎn)品的嫌疑特征片段高于普通種雞胚和SPF的背景基因片段。 綜合以上分析，在當下的養(yǎng)殖模式下，此病不可能被根除，還會不斷地發(fā)病，從思想上和產(chǎn)品上應做好長時間的治療和預防準備。 四、安卡拉病的治療最好的治療方案就是特異性的血清或提純的卵黃抗體注射治療，飲水也有一定的效果，只能起到一定的低病毒潛伏時的清除作用。養(yǎng)殖戶十幾年前就發(fā)現(xiàn)，發(fā)病后的雞產(chǎn)的蛋對此病有治療和“預防”作用。現(xiàn)在的機理也一樣，給雞注射新分高的毒株疫苗，收獲高免雞蛋，提純抗體。本動物的血清成本較高，不適合做商品雞使用。 市場上的抗體含量問題：有效抗體含量越高，效果則越明顯，相關檢測圖如下：好的抗體一般在1ng/L，有的是.，有的是.，也有的僅.，還有的含量為0。造成這種情況的原因可能有以下幾種：一是不能分離到病毒，只能用病死雞的器官做一些組織苗，而器官的病毒含量不穩(wěn)定，所以免疫效果就差。二是加水比較多。至于抗體含量為零的問題，則超出本文討論范圍內(nèi)，這